tách dòng và thiết kế vector chuyển gen mã hóa protein vỏ từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ ở Việt Nam

tách dòng và thiết kế vector chuyển gen mã hóa protein vỏ từ virus gây bệnh đốm vòng cây đu đủ ở Việt Nam

[...]... Gen CP của dòng virus PRSV HA 5-1 vào vector pGA482 và chuyển thành công vào giống đu đủ "Sunset" bằng súng bắn gen Họ đã tạo ra hai dòng đu đủ mang tên 55-1 và 63-1 có mang gen CP trong genom và đã kiểm tra bằng lai Southern và ELISA Kết quả thử nghiệm khả năng kháng bệnh của thế hệ R1 từ dòng 55-1 cho thấy nó có tính kháng bệnh rất cao (chỉ có 5% của 128 cây đợc thử nhiễm bệnh) đối với các dòng virus. .. Hassan Matd Daud tách phân lập gen CP từ các chủng virus của Malaysia Dr Tan Chong Seng thiết kế cấu trúc CP gen, đa vào vector p2K7 dùng cho chuyển gen bằng súng bắn gen và vector pCAMBIA2300 dùng cho chuyển gen bằng Agrobacterium Dr Vilasini Pillai: chuyển gen CP vào giống đu đủ Ekotika Hiện nay đã thu đợc cây chuyển gen Ro đợc khẳng định bằng lai southern nhng cha đợc thử khả năng kháng bệnh 1.3 Sinh... giống cây trồng kháng bệnh virus Nhóm các nhà khoa học gồm có: Dr Dennis Gonsalves, Khoa bệnh học thực vật, đại học Cornell, tham gia trong việc tách phân lập gen CP từ virus PRSV Dr Jerry Slightom thiết kế cấu trúc gene CP dùng cho chuyển gen Dr Maureen Fitch (USDA) chuyển gen CP vào đu đủ Dr Richarh Manshardt, Khoa trồng trọt, đại học Hawaii, tham gia kiểm tra và khảo nghiệm các dòng cây chuyển gen. .. phòng trừ bệnh PRSV 1.2.5 Những thành tựu trong việc chống lại PRSV ở cây đu đủ Trên thế giới đã có nhiều phòng thí nghiệm làm về chuyển gen ở thực vật, nhng đối với sự chuỷên gen CP để tạo cây kháng PRSV thì chỉ có một số phòng thí nghiệm nổi bật là: 1.2.5.1 Trờng đại học Hawaii và đại học Cornell, Mỹ Hai nơi này đã đi tiên phong trong việc chuyển gen CP vào đu đủ để kháng bệnh đốm vòng và đã mở ra một...thể virus gây nhiễm và tế bào chủ có sự hoà trộn sản phẩm biểu hiện của gen nên đã tạo ra tính kháng virus của cây Bằng việc sử dụng các tiến bộ trong kỹ thuật di truyền, ngời ta đã chuyển gen CP của virus vào giống đu đủ, tạo cho cây có khả năng kháng bệnh virus Đây là một thành tựu lớn của công nghệ sinh học trong việc chống lại bệnh PRSV Các dòng đu đủ chuyển gen này sẽ góp phần... gen chọn lọc, gen đánh dấu Hai cấu trúc này cùng đợc đa vào Agrobacterium, Khi các gen trên vector bổ trợ hoạt động thì các sản phẩm của nó sẽ tác động tới đoạn T-DNA trên vector chuyển gen dẫn đến sự chuyển đoạn T-DNA sang tế bào thực vật 1.3.1.3.3 Vector chuyển gen pCAMBIA2300 Vector pCAMBIA2300 đợc Leon Smith thuộc trung tâm CAMBIA thiết kế năm 1997 để làm vector chuyển gen vào thực vật Vector có kích... dịch mã với mã khởi đầu ATG của vector Vector pRSET có 3 loại pRSET A, B và C (hình 2) chỉ khác nhau đoạn trình tự giữa vùng mã cho đoạn peptide tín hiệu và MCS Để biểu hiện đúng protein đã đợc mã hoá bởi trình tự DNA, yếu tố quyết định đầu tiên là vị trí cắt giới hạn phải thích hợp cho sự lai ghép đoạn DNA và sau đó là vector nào sẽ duy trì đợc khung dịch mã của vector và đoạn DNA đợc chèn vào Vector. .. đối với các dòng virus tách từ Hawaii Nhng không kháng đợc các dòng tách từ nơi khác (vd: Thailand) Vì thịt quả của dòng 55-1 có mầu hồng không phù hợp với thị trờng nên dòng 55-1 này đã đợc lai với giống Kapoho tạo ra dòng "Rainbow" có thịt quả mầu vàng mang đầy 11 đủ các đặc tích của giống gốc Hiện nay dòng "Rainbow" đã đợc đăng ký bản quyền và trở thành giống đu đủ chuyển gen thơng mại đầu tiên... trên đây, các nhà khoa học đã cải tiến Ti-plasmit thành một hệ vector nhị thể gồm có vector chuyển gen (Ti-plasmid tái tổ hợp) và vector bổ trợ (helper Ti-plasmid) - Vector chuyển gen: Có cấu trúc từ Ti-plasmid với đoạn T-DNA đợc cắt bỏ hết các gen không cần thiết nh gen onc và gen tổng hợp opine ở giữa hai trình tự biên trái (T-border left) và biên phải (T-border right), gắn thêm một số thành phần tạo... chèn vào (hình ) Hình : Bản đồ vector TA-cloning pCR2.1 13 1.3.1.2 Vector biểu hiện protein pRSET Vector pRSET có nguồn gốc là các vector biểu hiện pUC, đợc thiết kế cho sự biểu hiện protein và tinh chế protein ở mức độ cao trong E coli Sự biểu hiện ở mức độ cao của các trình tự DNA đợc đa vào vector pRSET đợc tạo ra do sự điều khiển của T7 promoter Đoạn DNA đợc đa vào vị trí trong khung dịch mã với 123doc.vn