Luận văn, khóa luận, chuyên đề, cao học, thạc sĩ, tiến sĩ
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM =====***====== Nguyễn Tuấn Anh KHẢO SÁT MỘT SỐ ðẶC ðIỂM DỊCH TỄ BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ở TRÂU, BÒ TẠI LÂM ðỒNG TỪ NĂM 2004 – 2009 VÀ ðÁNH GIÁ HIỆU QUẢ SỬ DỤNG CỦA VACXIN LUẬN VĂN THẠC SỸ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS. TÔ LONG THÀNH HÀ NỘI: 2010 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp i LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành bản luận văn này, tôi ñã ñược sự giúp ñỡ tận tình của quý thầy cô giáo, các cấp lãnh ñạo Viện khoa học Nông nghiệp Việt Nam ,Chi cục Thú y tỉnh Lâm ñồng, trường cao ñẳng CN và KT Bảo lộc cùng gia ñình, người thân và bạn bè ñã ñộng viên giúp ñỡ ñể tôi vượt qua mọi khó khăn trong quá trình thực hiện ñề tài Nhân dịp này tôi xin ñược bày tỏ lòng biết ơn chân thành ñến: - Quý thầy cô giáo - Ban lãnh ñạo, Ban ðào tạo sau ñại học Viện Khoa học Nông nghiệp Việt Nam. -Ban lãnh ñạo và tập thể cán bộ, giáo viên trường cao ñẳng CN và KT Bảo lộc -Toàn thể gia ñình, người thân cùng bạn bè - ðặc biệt tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñến thầy giáo: PGS.TS.Tô Long Thành ñã tận tình hướng dẫn tôi trong suốt quá trình thực tập và hoàn thành luận văn tốt nghiệp. Một lần nữa tôi xin chân thành cảm ơn! Hà nội, ngày 30 tháng 6 năm 2010 Học viên Nguyễn Tuấn Anh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ii LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu và kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và chưa từng ñược ai công bố trong bất cứ công trình nào khác. Các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả Nguyễn Tuấn Anh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iii MỤC LỤC Trang Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục các bảng viii Danh mục các hình ix MỞ ðẦU 1 1 Tính cấp thiết của ñề tài 1 2 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài 3 3 Mục tiêu của ñề tài 3 4 ðối tượng và phạm vi nghiên cứu 3 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1 ðịnh nghĩa 4 1.2 Lịch sử bệnh 4 1.2.1 Tình hình bệnh LMLM trên thế giới 4 1.2.2 Tình hình bệnh LMLM ở Việt Nam 5 1.3 Các ñặc tính sinh học của Vi rút 8 1.3.1 Thành phần hoá học và cấu trúc chung của vi rút 8 1.3.2 Quá trình xâm nhập vào tế bào và sự nhân lên của vi rút 9 1.3.2.1 Giai ñoạn hấp thụ lên bề mặt tế bào 9 1.3.2.2 Giai ñoạn vi rút xâm nhập vào tế bào 9 1.3.2.3 Giai ñoạn tổng hợp các thành phần của vi rút 10 1.3.2.4 Giai ñoạn lắp ráp các thành phần của vi rút 11 1.3.2.5 Giai ñoạn giải phóng vi rút khỏi tế bào 12 1.4 Vi rút gây bệnh LMLM 12 1.4.1 Hình thái, kích thước của vi rút gây bệnh LMLM 12 1.4.2 Cấu tạo của vi rút gây bệnh LMLM 13 1.4.3 Phân loại vi rút gây bệnh LMLM 14 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp iv 1.4.4 ðặc tính nuôi cấy của vi rútgây bệnh LMLM 14 1.4.5 Sức ñề kháng của vi rút gây bệnh LMLM 16 1.5 Bệnh LMLM 16 1.5.1 Loài vật mắc bệnh 16 1.5.2 Chất chứa vi rút 16 1.5.3. ðường xâm nhập 17 1.5.4 Cách sinh bệnh 17 1.5.5 Cách truyền lây 19 1.5.6 Triệu chứng - bệnh tích 20 1.5.6.1 Triệu chứng 20 1.5.6.2 Bệnh tích 22 1.6 Các phương pháp chẩn ñoán bệnh 23 1.6.1 Chẩn ñoán lâm sàng 23 1.6.2. Chẩn ñoán vi rút học 24 1.6.2.1 Tiêm nội bì lưỡi bò 24 1.6.2.2 Dùng chuột 24 1.6.2.3 Nuôi cấy trên môi trường tế bào 24 1.6.3 Chẩn ñoán huyết thanh học 25 1.6.3.1 Phản ứng trung hoà vi rút 25 1.6.3.2 Phản ứng kết hợp bổ thể 26 1.6.3.3 Phản ứng ELISA 27 1.6.3.4 Các phản ứng huyết thanh học khác 29 1.6.4 Chẩn ñoán bằng kỹ thuật PCR 29 1.7 Phòng bệnh LMLM 31 1.7.1 Vệ sinh phòng bệnh 31 1.7.2 Tiêm phòng vacxin 31 1.7.2.1 Vacxin focmon keo phèn 32 1.7.2.2 Vacxin vô hoạt 32 1.7.2.3 Vacxin nhược ñộc 33 1.7.2.4 Vacxin sản xuất theo công nghệ gen 33 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp v Chương 2. NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP GHIÊN CỨU 34 2.1 Nội dung nghiên cứu 34 2.2 Nguyên liệu 35 2.3 Phương pháp nghiên cứu 35 2.4 Phương án bố trí thí nghiệm 38 2.5 Phương pháp thu thập mẫu 38 2.6 Phản ứng ELISA phát hiện kháng thể (dùng cho 1 type) 39 2.7 Phát hiện trâu bò nhiễm vi rút LMLM bằng ELISA CHECKIT FMD-3ABC 43 2.8 Xử lý số liệu 46 Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 3.1 ðiều kiện tự nhiên, xã hội và công tác chăn nuôi, thú y của Lâm ñồng ảnh hưởng ñến sự phát sinh và phát triển bệnh LMLM 48 3.1.1 ðiều kiện tự nhiên, xã hội của Lâm ñồng ảnh hưởng ñến sự phát sinh và phát triển bệnh LMLM 48 3.1.2 Tình hình chăn nuôi và thú y ở Lâm ñồng 52 3.2 Một số ñặc ñiểm dịch tễ bệnh LMLM trên ñàn trâu, bò ở Lâm ñồng từ năm 2004-2009 57 3.2.1 Diễn biến dịch LMLM trên trâu, bò ở Lâm ñồng từ năm 2004 – 2009 58 3.2.2 Hình thái, mức ñộ dịch, năm dịch LMLM ở trâu bò tại Lâm ñồng từ 2004 ñến 2009 62 3.2.3 Tỷ lệ hiện mắc bệnh LMLM của trâu bò ở Lâm ñồng từ năm 2004-2009 63 3.2.3.2 Tốc ñộ mới mắc bệnh LMLM ở trâu bò tại Lâm ñồng từ 2004-2009 64 3.2.3.3 Tỷ lệ tử vong ở trâu bò mắc bệnh LMLM tại Lâm ñồng từ năm 2004-2009 66 3.3 Kết quả chẩn ñoán, ñịnh typ vi rút LMLM 67 3.4 Khảo sát tình hình nhiễm vi rút LMLM ở trâu, bò tại Lâm ðồng bằng phương pháp ELISA CHECKIT FMD -3ABC 68 3.5 ðánh giá hiệu quả sử dụng của vaccine phòng bệnh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vi LMLM ở ñàn trâu bò tại Lâm ñồng 70 3.5.1 Tình hình tiêm phòng vacxin LMLM cho ñàn trâu bò tại Lâm ñồng từ 2004-2009 70 3.5.2 Tỷ lệ bảo hộ của trâu bò ñược tiêm vacxin Aftovax ở thực ñịa 71 3.5.3 Khả năng ñáp ứng miễn dịch của trâu bò ñối với vacxin LMLM A ftovax trong tiêm phòng thực nghiệm 73 3.5.3.1 Diễn biến kháng thể ở trâu bò không có kháng thể trướ c khi tiêm vacxin 74 3.5.3.2 Biến ñộng kháng thể ở trâu bò có kháng thể trước khi tiêm vacxin trong tiêm phòng thực nghiệm tại Lâm ñồng 77 3.5.3.3 Tỷ lệ bảo hộ ở trâu bò tại Lâm ñồngñược tiêm thực nghiệm vacxin Aftovax 80 3.5.3.4 So sánh tỷ lệ bảo hộ ở trâu bò ñược tiêm phòng tại thực ñịa và trong thực nghiệm 81 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 84 4.1 Kết luận 84 4.2 ðề nghị 85 Tài liệu tham khảo 86 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Viết ñầy ñủ LMLM Lở mồm long móng OIE Office Internationale des Epizooties PCR Polimerase Chain Reaction KHBT Kết hợp bổ thể HSND Hệ số năm dịch CSMBTBT/N Chỉ số mắc bệnh trung bình tháng/năm CSMBTBT/NN Chỉ số mắc bệnh trung bình tháng/nhiều năm TLHM Tỷ lệ hiện mắc TLMM Tỷ lệ mới mắc TðMM Tốc ñộ mới mắc TLTV Tỷ lệ tử vong KSGM Kiểm soát giết mổ KTVSTY Kiểm tra vệ sinh thú y KDðV Kiểm dịch ñộng vật Lð Lâm ñồng SM Số mẫu XN Xét nghiệm TB Trung bình UBND Ủy ban nhân dân Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 3.1 Các ñơn vị hành chính thuộc tỉnh Lâm ñổng 50 3.2 Số lượng ñàn gia súc trong những năm gần ñậy 53 3.3 Kết quả công tác kiểm dịch từ năm 2004-2009 của Lâm ñồng 56 3.4 Diễn biến dịch LMLM trên trâu, bò ở Lâm ñồng từ năm 2004-2009 58 3.5 Hệ số năm dịch của từng năm trong giai ñoạn 2002-2007 63 3.6 Tỷ lệ hiện mắc bệnh LMLM của trâu bò ở Lâm dồng từ 2004-2009 64 3.7 Tốc ñộ mắc bệnh LMLM của trâu bò tại Lâm ñồng từ 2004-2009 65 3.8 Tỷ lệ tử vong của trâu bò mắc bệnh LMLM tại Lâm ñồng từ năm 2004-2009 66 3.9 Kết quả xét nghiệm, ñịnh typ vi rút LMLM trên trâu bò ởLâm ñồng 67 3.10 Kết quả xác ñịnh tỷ lệ nhiễm vi rút LMLM ở trâu bò tạ i các vùng sinh thái khác nhau của tỉnh Lâm ñồng 69 3.11 Tỷ lệ tiêm phòng vacxin LMLM cho ñàn trâu bò tại Lâm ñồng từ năm 2004 -2009 71 3.12 Tỷ lệ bảo hộ của trâu bò ở Lâm ñồng sau khi tiêm vacxin Aftovax tại thực ñịa 73 3.13 Biến ñộng kháng thể của trâu bò không có kháng thể trướ c khitiêm vacxin, trong tiêm phòng thực nghiệm tại Lâm ñồng. 75 3.14 Diễn biến kháng thể của trâu bò có kháng thể trước khi tiêm, trong tiêm thực nghiệm vacxin Aftovax ở Lâm ñồng. 78 3.15 Tỷ lệ bảo hộ ở trâu bò ñược tiêm thực nghiệm vacxin Aftovax 81 3.16 Tỷ lệ bảo hộ ở trâu bò ñược tiêm phòng tại thực ñịa và trong thực nghiệm 82 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ix DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Hình ảnh của vi rút LMLM 12 1.2 Sơ ñồ cấu trúc gen của vi rút LMLM 13 3.1 Bản ñồ hành chính tỉnh Lâm ñồng 50 3.1 Biểu ñồ phạm vi dịch qua các năm nghiên cứu 61 3.2 Biểu ñồ phạm vi dịch qua các năm nghiên cứu 62 3.3 Biểu ñồ biến ñộng kháng thể của trâu bò không có kháng thểtrước khi tiêm thực nghiệm vacxin Aftovax 77 3.4 Biểu ñồ biến ñộng kháng thể ở trâu bò có kháng thể trước khi tiêm thực nghiệm vacxin Aftovax 80 3.5 Biểu ñồ tỷ lệ bảo hộ của trâu bò sau khi tiêm vacxin Aftovax trong thí nghiệm và tại thực ñịa 85