Giám sát sự lưu hành virus cúm ah5n1 và đánh giá hiệu quả sử dụng vắc xin cúm gia cầm tại địa bàn tỉnh quảng ninh

Giám sát sự lưu hành virus cúm ah5n1 và đánh giá hiệu quả sử dụng vắc xin cúm gia cầm tại địa bàn tỉnh quảng ninh

Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip i bộ giáo dục và đào tạo Trờng đại học nông nghiệp hà nội ------------------------ Tống xuân độ Giám sát sự lu hành virus cúm A/H5N1 và đánh giá hiệu quả sử dụng vắc xin cúm gia cầm tại địa bàn Quảng Ninh LUậN VĂN THạC Sỹ NÔNG NGHIệP Chuyên ngành: Thú y M số : 60.62.50 Giảng viên hớng dẫn: TS. Nguyễn Bá Hiên Hà Nội 2009 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip i Lời cam đoan - Tôi xin cam đoan rằng, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực và cha từng đợc sử dụng để bảo vệ môn học vị nào. - Tôi xin cam đoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn này đ đợc chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày 15 tháng 12 năm 2009 Tác giả Tống Xuân Độ Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip ii Lời cảm ơn Trong thời gian học tập, rèn luyện tại trờng và làm đề tài luận văn Thạc sỹ tôi đ nhận đợc sự giúp đỡ nhiệt tình của Ban giám Hiệu nhà trờng, Viện sau đại học, khoa Thú y và các thầy, cô của trờng Đại học Nông nghiệp Hà Nội. Đến nay tôi đ hoàn thành luận văn Thạc sỹ nông nghiệp với đề tài Giám sát sự lu hành virus cúm A/H5N1 và đánh giá hiệu quả sử dụng vắc xin cúm gia cầm tại địa bàn tỉnh Quảng Ninh. Nhân dịp này tôi xin bày tỏ biết ơn chân thành tới Ban giám Hiệu nhà trờng, các Phòng ban chức năng, Viện sau đại học, Ban chủ nhiệm khoa Thú y và toàn thể các thầy, cô đ tận tình giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập. Đặc biệt tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới Thầy hớng dẫn, TS. Nguyễn Bá Hiên chủ nhiệm bộ môn Vi sinh - Truyền nhiễm thú y. Tôi xin cảm ơn tới Ban lnh đạo, cán bộ Chi cục Thú y tỉnh Quảng Ninh, đ tạo mọi điều kiện giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện đề tài luận văn Thạc sỹ. Qua đây tôi xin cảm ơn bạn bè, đồng nghiệp đ thờng xuyên giúp đỡ, tạo mọi điều kiện và dành cho tôi sự động viên quý báu trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu và quá trình hoàn thành luận văn này. Hà Nội, ngày 15 tháng 9 năm 2009 Tác giả Tống Xuân Độ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… iii Danh môc viÕt t¾t AI : Avian Influenza FAO : Food and Agriculture Organization GMT : Genomic Mean Titer HA : Hemagglutination Assay HI : Hemagglutination Inhibition HPAI : Hight Pathogenic Avian Influenza ARN : Acid Ribonucleoic DAN : Acid Deoxyribonucleoic LPAI : Low Pathogenic Avian Influenza M : Matrix N : Neuraminidase NK : Natural Killer OIE : Office International Epizooties RT/PCR: Reverse Transcription Polimenase Chain Riaction WHO : World Health Organization Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip iv Mục lục Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Danh mục viết tắt iii Mục lục iv Danh mục bảng . viii Danh mục đồ thị x 1. Mở đầu . 1 1.1- Đặt vấn đề . 1 1.2- Mục tiêu đề tài 3 1.3- ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài . 3 2. Tổng quan tài liệu . 4 2.1- Lịch sử bệnh cúm gia cầm 4 2.1.1- Lịch sử bệnh cúm gia cầm trên thế giới 4 2.1.2- Bệnh cúm gia cầm ở Việt Nam 5 2.2- Căn bệnh cúm gia cầm . 7 2.2.1- Hình thái và cấu trúc của virus cúm A . 7 2.2.2- Kháng nguyên của virus cúm 8 2.2.3- Đặc tính nuôi cấy và lu giữ virus cúm gia cầm 9 2.2.4- Đặc tính sinh hóa 9 2.2.5- Độc lực của virus 9 2.2.6- Khả năng biến chủng của virus 10 2.2.7- Sức đề kháng của virus . 11 2.3- Dịch tễ học bệnh cúm gia cầm 11 2.3.1- Động vật cảm nhiễm . 11 2.3.2- Loài vật mang virus . 12 2.3.3- Sự truyền lây . 12 2.4- Triệu chứng và bệnh tích của bệnh cúm gia cầm . 13 2.4.1- Triệu chứng . 13 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip v 2.4.2- Bệnh tích 14 2.5- Phơng pháp chẩn đoán bệnh cúm gia cầm . 14 2.6- Phòng chống bệnh cúm gia cầm 15 2.7- Đáp ứng miễn dịch chống virus cúm ở gia cầm 15 2.7.1- Miễn dịch không đặc hiệu 15 2.7.2- Miễn dịch đặc hiệu 16 2.8- Sử dụng vắc xin phòng chống bệnh cúm gia cầm 18 2.8.1- Các loại vắc xin đang dùng hiện nay 18 2.8.2- Tình hình sử dụng vắc xin cúm gia cầm trên thế giới 19 2.8.3- Một số chú ý khi sử dụng vắc xin phòng chống cúm gia cầm 20 2.9- Tình hình sử dụng vắc xin cúm gia cầm ở Việt Nam . 21 3. Nội dung, nguyên liệu và phơng pháp nghiên cứu 22 3.1- Nội dung nghiên cứu . 22 3.1.1- Điều tra tình hình dịch cúm gia cầm trên địa bàn Quảng Ninh các năm 2007-2009 . 22 3.1.2- Xác định mức độ lu hành của virus H5N1 (tỷ lệ nhiễm từng loài) trên đàn gia cầm tại Quang Ninh (gia cầm nuôi trong đàn, gia cầm nhập lậu, gia cầm lu thông trên thị trờng) 22 3.1.3- Đánh giá đáp ứng miễn dịch của gia cầm đối với vắc xin cúm đợc sử dụng giai đoạn 2007-2009, điều kiện thực địa tại Quảng Ninh . 22 3.1.4- Đánh giá khả năng xẩy ra dịch cúm gia cầm trên cơ sở giám sát sự lu hành của virus cúm, đề ra giải pháp phòng chống . 22 3.2- Đối tợng nghiên cứu 22 3.3- Phơng pháp nghiên cứu . 22 3.4- Nguyễn liệu, dụng cụ và các phơng pháp thí nghiệm . 23 3.4.1- Nguyên liêu, dụng cụ nghiên cứu 23 3.4.2- Phơng pháp lấy, xử lý mẫu . 23 3.4.3- Phơng pháp xác định kháng nguyên 24 3.4.4- Phơng pháp phát hiện kháng thể 31 3.4.5- Xử lý số liệu. 32 4. kết quả và thảo luận 33 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip vi 4.1- ảnh hởng của dịch virus cúm A H5N1 tới ngành chăn nuôi gia cầm tại Quảng Ninh 33 4.1.1- Tình hình chăn nuôi gia cầm một số năm gần đây tại Quảng Ninh. 33 4.1.2- Điều tra về thiệt hại kinh tế do dịch cúm gia cầm tại Quảng Ninh . 34 4.1.3- Điều tra kết quả tiêm phòng vắc xin cúm cho đàn gia cầm của tỉnh Quảng Ninh qua các năm 2007-2008 36 4.2- Giám sát sự lu hành của virus cúm H5N1 trên đàn gia cầm cha đợc tiêm phòng tại Quảng Ninh năm 2007 37 4.2.1- Kiểm tra huyết thanh phát hiện kháng thể kháng virus Cúm A H5N1 trên đàn gia cầm cha tiêm vắc xin năm 2007 . 37 4.2.2- Kiểm tra kháng thể kháng virus cúm A H5N1 trong huyết thanh đàn thủy cầm cha tiêm phòng 39 4.2.3- Kiểm tra phát hiện virus trong ổ nhớp của gia cầm cha tiêm phòng vắc xin bằng phơng pháp RT/PCR 41 4.2.4- Kết quả giám sát virus cúm gia cầm tại các chợ, các điểm giết mổ . 42 4.2.5- Giám sát lu hành của virus trên đàn gà nhập lậu vào Quảng Ninh 43 4.3- Đánh giá đáp ứng miễn dịch chống virus cúm ở gia cầm sau tiêm phòng tại Quảng Ninh năm 2007 44 4.3.1- Giám sát huyết thanh đối với các đàn gia cầm, thủy cầm trên địa bàn Quảng Ninh năm 2007 44 4.3.2- Hiệu giá kháng thể (HI) kháng virus cúm Subtype H5 của gà sau tiêm phòng năm 2007 . 47 4.3.3- Kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus cúm Subtype H5 của đàn vịt sau tiêm phòng năm 2007 . 49 4.3.4- So sánh đáp ứng miễn dịch chống virus cúm của gà và vịt đ tiêm phòng năm 2007 51 4.4- Giám sát lu hành virus cúm gia cầm địa bàn Quảng Ninh năm 2008 54 4.4.1- Giám sát lu hành virus cúm gia cầm trên đàn gia cầm, thuỷ cầm cha tiêm phòng năm 2008 54 4.4.2- Giám sát lu hành virus cúm gia cầm tại các chợ, các điểm giết mổ năm 2008 55 4.4.3- Giám sát sự lu hành virus cúm trên gia cầm nhập lậu tại 56 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip vii Quảng Ninh. 4.5 - Đánh giá đáp ứng miễn dịch chống virus cúm gia cầm ở đàn gà, vịt sau tiêm phòng trên địa bàn Quảng Ninh năm 2008 57 4.5.1- Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 đàn gia cầm, thủy cầm địa bàn Quảng Ninh năm 2008 57 4.5.2- Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 của gà sau tiêm phòng năm 2008 60 4.5.3- Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 của vịt sau tiêm phòng năm 2008 61 4.5.4- So sánh đáp ứng miễn dịch của gà và vịt sau tiêm phòng năm 2008 62 4.6- Giám sát sự lu hành virus cúm H5N1 năm 2009 65 4.6.1- Giám sát sự lu hành virus cúm H5N1 trên đàn gà, vịt cha tiêm phòng . 65 4.6.2- Giám sát sự lu hành virus cúm trên gà tại chợ và các điểm giết mổ 67 4.6.3- Giám sát lu hành virus cúm trên gà nhập lậu . 68 4.7. Đánh giá đáp ứng miễm dịch chống cúm ở gia cầm trên địa bàn tỉnh năm 2009 . 69 4.7.1. Giám sát huyết thanh đối với đàn gà, vịt sau tiêm phòng trên địa bàn Quảng Ninh năm 2009 . 69 4.7.2. Hiệu giá kháng thể (HI) kháng virus cúm subtype H5 của gà sau tiêm phòng . 71 4.7.3. Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 của đàn vịt sau tiêm phòng năm 2009 . 72 4.7.4. So sánh đáp ứng miễm dịch của gà và vịt sau tiêm phòng năm 2009. 73 4.8 - So sánh đáp ứng miễn dịch gia cầm của các địa phơng năm 2007- 2009. 75 4.9- So sánh đáp ứng miễn dịch chống virus cúm của gà và vịt trong 03 năm 2007-2009 . 77 4.10- Đánh giá hiệu quả của chơng trình sử dụng vắc xin cúm gia cầm trên địa bàn tỉnh Quảng Ninh 78 5. Kết luận và đề nghị . 80 5.1- Kết luận 80 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip viii 5.2- Đề nghị . 80 Danh mục bảng Bảng 4.1: Số lợng gia cầm, sản phẩm gia cầm của tỉnh Quảng Ninh 2002-2008 33 Bảng 4.2: Kết quả điều tra thiệt hại do dịch cúm gia cầm tại Quảng Ninh qua các năm 2004-2009 . 35 Bảng 4.3: Kết quả tiêm phòng vắc xin cúm gia cầm . 36 Bảng 4.4: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus trong huyết thanh của gà cha tiêm phòng vắc xin . 38 Bảng 4.5: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus trong huyết thanh thủy cầm cha tiêm phòng vắc xin 40 Bảng 4.6: Kết quả xét nghiệm virus trong dịch ổ nhớp của gia cầm cha tiêm phòng vắc xin 41 Bảng 4.7: Kết quả xét nghiệm virus cúm gia cầm tại các chợ, các điểm giết mổ 42 Bảng 4.8: Kết quả giám sát lu hành virus cúm H5N1 gà nhập lậu . 43 Bảng 4.9: Phân bố hiệu giá kháng thể kháng virus cúm trong huyết thanh của gà, vịt sau tiêm phòng năm 2007 45 Bảng 4.10: Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 trong huyết thanh gà đ tiêm phòng năm 2007 48 Bảng 4.11: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm Subtype H5 ở vịt sau tiêm phòng năm 2007 50 Bảng 4.12: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5N1 trong huyết thanh của gà và vịt sau tiêm phòng năm 2007 51 Bảng 4.13: So sánh tỷ lệ bảo hộ theo đàn gà và vịt đ tiêm phòng năm 2007 52 Bảng 4.14: Kết quả giám sát lu hành virus cúm tại Quảng Ninh năm 2008 55 Bảng 4.15: Kết quả giám sát sự lu hành virus cúm gia cầm tại các 56 Trng i hc Nụng nghip H Ni Lun vn thc s khoa hc nụng nghip ix chợ, các điểm giết mổ Bảng 4.16. Kết quả giám sát virus cúm H5N1 trên gà nhập lậu . 57 Bảng 4.17: Hiệu giá kháng virus cúm H5 trên đàn gia cầm, thủy cầm tại Quảng Ninh sau tiêm phòng 2008 58 Bảng 4.18: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 gà sau tiêm phòng năm 2008 60 Bảng 4.19: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm Subtype H5 vịt sau tiêm phòng năm 2008 61 Bảng 4.20: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 của gà và vịt sau tiêm phòng năm 2008 . 63 Bảng 4.21: Tỷ lệ bảo hộ theo đàn ở gà và vịt sau tiêm phòng năm 2008 63 Bảng 4.22: Kết quả giám sát lu hành virus cúm tại Quảng Ninh năm 2009 . 66 Bảng 4.23: Kết quả giám sát sự lu hành virus cúm gia cầm tại các chợ, các điểm giết mổ 67 Bảng 4.24: Kết quả giám sát lu hành virus cúm gia cầm trên gà nhập lậu 68 Bảng 4.25: Hiệu giá khàng thể (HI) kháng virus cúm (H5) của gà và vịt sau tiêm phòng năm 2009 . 69 Bảng 4.26: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 của gà sau tiêm phòng năm 2009 . 71 Bảng 4.27: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm subtype H5 của vịt sau tiêm phòng năm 2009 72 Bảng 4.28: Hiệu giá kháng thể kháng virus cúm H5 của gà và vịt sau tiêm phòng năm 2009 73 Bảng 4.29: Tỷ lệ bảo hộ theo đàn ở gà và vịt sau tiêm phòng năm 2009 74 Bảng 4.30: Đáp ứng miễn dịch chống virus cúm của đàn gia cầm ở các địa phơng của tỉnh Quảng Ninh từ năm 2007-2009 . 75 . A/H5N1 và đánh giá hiệu quả sử dụng vắc xin cúm gia cầm tại địa bàn tỉnh Quảng Ninh. Nhân dịp này tôi xin bày tỏ biết ơn chân thành tới Ban giám Hiệu nhà. virus cúm của gà và vịt đ tiêm phòng năm 2007 51 4.4- Giám sát lu hành virus cúm gia cầm địa bàn Quảng Ninh năm 2008 54 4.4.1- Giám sát lu hành virus cúm