Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá gan (fasciolosis) ở trâu, bò tại tỉnh bắc kạn và đề xuất biện pháp phòng chống hiệu quả

Rất Rất Hay!

DANH MỤC CÁC BẢNG

Bảng 3.1 Thực trạng chăn nuôi và phòng chống bệnh ký sinh trùng cho trâu,

bò ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn 35

Bảng 3.2 Kết quả mổ khám trâu, bò và thu thập sán lá Fasciola 38

Bảng 3.3 Kết quả định loài sán lá gan ký sinh ở trâu, bò nuôi tại 3 huyện, tỉnh Bắc Kạn 39

Bảng 3.4 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan ở trâu nuôi tại 3 huyện 40

Bảng 3.5 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan ở bò nuôi tại 3 huyện 42

Bảng 3.6 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tuổi trâu 45

Bảng 3.7 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tuổi bò 47

Bảng 3.8 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo mùa vụ ở trâu 49

Bảng 3.9 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo mùa vụ ở bò 50

Bảng 3.10 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tính biệt ở trâu 52

Bảng 3.11 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tính biệt ở bò 52

Bảng 3.12 Sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò 54

Bảng 3.13 Kết quả định loài và sự phân bố loài ốc – ký chủ trung gian của sán Fasciola ở 3 huyện 55

Bảng 3.14 Tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan của ốc nước ngọt 56

Bảng 3.15 Tỷ lệ mẫu cỏ thủy sinh nhiễm Adolescaria 58

Bảng 3.16 Xác định hiệu lực của một số thuốc tẩy sán lá gan đã sử dụng nhiều năm trên trâu 59

Bảng 3.17 Xác định hiệu lực của một số thuốc tẩy sán lá gan đã sử dụng nhiều năm trên bò 60

Bảng 3.18 Hiệu lực tẩy sán lá gan của Bio – Alben trên trâu thí nghiệm 62

Bảng 3.19 Hiệu lực tẩy sán lá gan của thuốc Bio - Alben trên bò thí nghiệm 62

Bảng 3.20 Hiệu lực của thuốc Bio – Alben tẩy sán lá gan cho trâu trên thực địa 63 Bảng 3.21 Hiệu lực của thuốc Bio – Alben tẩy sán lá gan cho bò trên thực địa 64

DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ VÀ ĐỒ THỊ

Hình 3.1 Biểu đồ về tỷ lệ nhiễm sán lá gan ở trâu nuôi tại 3 huyện 41

Hình 3.2 Biểu đồ cường độ nhiễm sán lá gan ở trâu nuôi tại 3 huyện 41

Hình 3.3 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm sán lá gan ở bò nuôi tại 3 huyện 43

Hình 3.4 Biểu đồ cường độ nhiễm sán lá gan ở bò nuôi tại 3 huyện 44

Hình 3.5 Đồ thị về tỷ lệ nhiễm sán lá gan theo tuổi trâu 46

Hình 3.6 Đồ thị về tỷ lệ nhiễm sán lá gan theo tuổi bò 48

Hình 3.7 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm sán lá gan theo mùa vụ ở trâu 49

Hình 3.8 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm sán lá gan theo mùa vụ ở bò 50

MỞ ĐẦU

1 Tính cấp thiết của đề tài

Trong những năm gần đây ngành chăn nuôi nước ta đã và đang chiếmmột vị trí quan trọng trong sản xuất nông nghiệp nói riêng và trong cơ cấu nềnkinh tế nói chung của đất nước Đặc biệt chăn nuôi trâu, bò đã đóng vai tròquan trọng trong việc cải thiện kinh tế, góp phần nâng cao đời sống của ngườilao động Tuy nhiên hiện nay, ở các tỉnh miền núi việc chăn nuôi trâu, bò chủyếu là thả rông, vấn đề vệ sinh thú y trong quá trình chăn nuôi chưa được coitrọng, do đó dịch bệnh thường xuyên xảy ra, gây thiệt hại lớn về kinh tế

Bệnh sán lá gan lớn (Fasciolosis) là một bệnh ký sinh trùng xảy ra khá

phổ biến ở trâu, bò Bệnh thường ở thể mãn tính làm cho con vật gầy yếu,thiếu máu, còi cọc và giảm sức đề kháng với các bệnh khác Trong khi ngườichăn nuôi thường ít quan tâm đến việc phòng trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò

Bệnh sán lá gan do các loài sán thuộc giống Fasciola gây ra, từ lâu đã

được coi là bệnh ký sinh trùng gây tác hại lớn cho ngành chăn nuôi trâu, bò ởViệt Nam và nhiều nước trên thế giới Cho đến nay, bệnh sán lá gan vẫn làmột trong những bệnh ký sinh trùng nguy hiểm không những cho gia súc mà

cả cho con người Ở nước ta, bệnh sán lá gan ở trâu, bò được phát hiện ở khắpcác tỉnh từ Bắc đến Nam Tỷ lệ trâu, bò nhiễm sán lá gan thường cao và nhiềucon nhiễm ở cường độ nặng Bệnh thường tiến triển chậm với biểu hiệnkhông rõ ràng, không gây chết hàng loạt nhưng làm giảm quá trình sinhtrưởng và sinh sản của trâu, bò, tác động xấu đến chất lượng và sản lượngthịt, gan và sữa, làm giảm sức đề kháng của con vật, khiến cho một số bệnhkhác dễ bùng phát Sán lá gan ký sinh ở ống dẫn mật hút máu ký chủ, làm kýchủ thiếu máu nặng, đồng thời sán thường xuyên tiết độc tố, độc tố hấp thu vàomáu gây huỷ hoại máu Khi trâu, bò nhiễm nặng có rất nhiều buồng gan không

sử dụng được do sán gây viêm, cứng gan (Phan Địch Lân, 1985) [14] Nhiều tácgiả cho biết, tác hại của sán lá gan ở trâu, bò rất lớn, biểu hiện rõ nhất làthiếu máu, viêm và xơ gan khi gia súc bị nhiễm sán lá gan ở mức độ nặng.Trong những năm gần đây, bệnh sán lá gan lớn trên người đã được phát hiện

ở nhiều tỉnh, thành trong cả nước Thực trạng này càng làm cho vấn đềphòng chống bệnh sán lá gan cho người và vật nuôi trở nên cấp thiết hơn

Theo đánh giá của các nhà khoa học trong những năm qua, điều kiện tựnhiên và xã hội ở Việt Nam nói chung và ở tỉnh Bắc Kạn nói riêng có nhiềuthay đổi Sự thay đổi rõ nét về điều kiện thời tiết khí hậu và đời sống xã hội

đã dẫn đến hậu quả là sự phát sinh và phát triển của bệnh sán lá gan thay đổi

Vì vậy, việc nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ, từ đó có biện pháp phòng chốngbệnh sán lá gan cho trâu, bò ở tỉnh Bắc Kạn là vấn đề cần thiết

Từ yêu cầu cấp bách của thực tiễn chăn nuôi trâu bò ở tỉnh Bắc Kạn,

chúng tôi thực hiện đề tài: “Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá

gan (Fasciolosis) ở trâu, bò tại tỉnh Bắc Kạn và đề xuất biện pháp phòng chống hiệu quả”.

2 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài

2.1 Ý nghĩa khoa học

Kết quả của đề tài là những thông tin khoa học có giá trị về đặc điểmdịch tễ, về quy trình phòng chống bệnh sán lá gan trâu, bò, có một số đónggóp mới cho khoa học

3 Những đóng góp mới của đề tài

- Là công trình đầu tiên nghiên cứu có hệ thống về đặc điểm dịch tễ vàbiện pháp phòng trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò ở một số huyện trên địa bàntỉnh Bắc Kạn

- Xây dựng quy trình phòng trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò có hiệuquả, khuyến cáo và áp dụng rộng rãi tại các nông hộ, trang trại chăn nuôi trâu,

bò tập thể và gia đình

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 Cơ sở khoa học của đề tài

1.1.1 Vị trí của sán lá Fasciola trong hệ thống phân loại động vật học

Theo Skrjabin và cs (1977) [35] sán lá gan ký sinh và gây bệnh cho giasúc nhai lại được xếp trong hệ thống phân loại động vật như sau:

Ngành Plathelminthes Schneider, 1873

Phân ngành Platodes Leuckart, 1854

Lớp Trematoda Rudolphi, 1808 Phân lớp Prosostomadidea Skrjabin và Guschanskaja, 1962

Bộ Fasciolida Skrjabin et Schulz, 1937 Phân bộ Fasciolata Skrjabin et Schulz, 1937

Họ Fasciolidae Railliet, 1895

Phân họ Fasciolinae Stiles et Hassall, 1898 Giống Fasciola Linnaeus, 1758

Loài Fasciola hepatica (Linnaeus, 1758)

Loài Fasciola gigantica (Cobbold, 1885)

1.1.2 Đặc điểm hình thái của sán lá Fasciola

Cũng như nhiều loài sán lá khác, sán lá gan lưỡng tính, có thể thụ tinhchéo hoặc tự thụ tinh Sán có giác miệng và giác bụng, giác bụng không nốivới cơ quan tiêu hoá Sán không có hệ hô hấp, tuần hoàn và cơ quan thị giác(ở giai đoạn mao ấu có dấu vết sắc tố mắt) Hệ sinh dục rất phát triển với cả

bộ phận sinh dục đực và cái trong cùng một sán Tử cung sán chứa đầy trứng

Có thể phân biệt hai loài sán lá gan thuộc giống Fasciola như sau:

* F gigantica : Có chiều dài thân gấp 3 lần chiều rộng, “vai” không có

hoặc nhìn không rõ rệt, nhánh ruột chia toả ra nhiều nhánh ngang

F gigantica (nghĩa là sán lá “khổng lồ”) dài 25 - 75 mm, rộng 3 - 12 mm, u

lồi hình nón của đầu là phần tiếp theo của thân, vì vậy nó không có “vai” như loài

khác của giống Fasciola Hai rìa bên thân sán song song với nhau, đầu cuối của

thân tù Giác bụng tròn lồi ra Ruột, tuyến noãn hoàng, buồng trứng và tinh hoànđều phân nhánh Trứng hình bầu dục, màu vàng nâu, phôi bào to đều và xếp kín

vỏ Kích thước trứng: 0,125 - 0,170 x 0,06 - 0,10 mm

* F hepatica: Trái với loài trên, loài này thân rộng, đầu lồi và nhô ra phía

trước làm cho sán có “vai”, nhánh ruột chia ít nhánh ngang hơn

F hepatica (nghĩa là sán lá ở gan) dài 18 - 51 mm, rộng 4 - 13 mm,

phần trước thân nhô ra, tạo cho sán có vai bè ra hai bên Hai rìa bên thân sánkhông song song với nhau mà phình ra ở chỗ vai rồi thót lại ở đoạn cuối thân.Những ống dẫn tuyến noãn hoàng chạy ngang, chia vùng giữa của sán thànhphần trước và phần sau thân Phần sau thân có tinh hoàn và bộ phận sinh dụcđực Tinh hoàn phân nhiều nhánh xếp phía sau thân Tử cung ở giữa phầnthân trước tạo nên một mạng lưới dày đặc Buồng trứng phân nhánh nằm ởsau tử cung

Trứng sán có hình thái, màu sắc tương tự trứng của loài F gigantica,

kích thước 0,13 - 0,145 x 0,07 - 0,09 mm

Bệnh sán lá gan ở trâu, bò do hai loài sán lá ký sinh ở ống dẫn mật và

gan gây ra (Fasciola hepatica và Fasciola gigantica) Ngoài trâu, bò, hai loài

sán này còn gây bệnh cho các động vật nhai lại khác, đôi khi thấy cả ở người

F hepatica và F giantica là hai loài sán lá phổ biến ở các vùng thuộc

châu Á và châu Phi Tác hại của sán lá gan đối với gia súc nhai lại rất lớn,biểu hiện rõ nhất là gây thiếu máu, viêm và xơ gan khi gia súc bị nhiễm sán lágan ở mức độ nặng

1.1.3 Vòng đời của sán lá Fasciola

Trong vòng đời phát triển, sán lá gan cần trải qua 5 giai đoạn để trở

thành sán trưởng thành Fasciola trưởng thành ký sinh trong ống dẫn mật của

trâu, bò Sau khi thụ tinh, mỗi sán đẻ hàng chục vạn trứng Những trứng này

cùng dịch mật vào ruột, sau đó theo phân ra ngoài Nếu gặp điều kiện thuậnlợi (được nước mưa cuốn trôi xuống các vũng nước, hồ, ao, suối, ruộngnước nhiệt độ 15 - 30oC, pH = 5 - 7,7, có ánh sáng thích hợp) sau 10 - 25

ngày trứng nở thành Miracidium bơi tự do trong nước Nếu thiếu ánh sáng, Miracidium không có khả năng thoát vỏ nhưng vẫn tồn tại đến 8 tháng trong

vỏ, Miracidium có hình tam giác, xung quanh thân có lông và di chuyển được trong nước Khi gặp vật chủ trung gian thích hợp (ốc Lymnaea), Miracidium xâm nhập cơ thể ốc và phát triển thành bào ấu (Sporocyst) Những Miracidium không gặp vật chủ trung gian thì rụng lông, rữa dần và chết.

Bào ấu (Sporocyst) hình túi, màu sáng, được bao bọc bởi lớp màng

mỏng, các tế bào ngọn lửa hoạt động hình thành hầu, ống ruột và các đámphôi Trong 1 ốc có thể có 1 - 2 ấu trùng Khoảng 3 - 7 ngày, bào ấu sinh sản

vô tính cho ra nhiều Redia (lôi ấu) Một bào ấu sinh ra 5 - 15 lôi ấu.

Redia hình suốt chỉ, ít hoạt động, có miệng, hầu, ruột, hình túi đơn

giản, có hai hệ: Redia thế hệ I và Redia thế hệ II cùng phát triển trong ốc - vật

chủ trung gian Ở nhiệt độ phù hợp (20 - 300C), sau 29 - 35 ngày, lôi ấu biến

thành vĩ ấu (Cercaria) Một Redia có thể sinh ra 12 - 20 Cercaria.

Cercaria (vĩ ấu) là ấu trùng ở pha sống tự do của sán lá gan, có cấu tạo

thân hình tròn lệch, đuôi dài hơn thân giúp vĩ ấu vận chuyển được dễ dàngtrong nước Cấu tạo của vĩ ấu gồm giác miệng, giác bụng, hầu, thực quản vàruột phân thành hai nhánh

Theo Ginyecisz - Kaija (1960), trong cơ thể Cercaria còn có những hạt

Glycogen cung cấp năng lượng cho hoạt động sống của ấu trùng, đặc biệt làcho sự vận động không ngừng của đuôi Đuôi là cơ quan vận động của vĩ ấu.Theo một số tác giả, đuôi làm nhiệm vụ thay đổi vị trí của ấu trùng trong môitrường nước Nhờ sự hoạt động tích cực của đuôi mà vĩ ấu tiếp cận để bám

vào các cây thuỷ sinh, tạo thành kén (Adolescaria).

Từ khi Miracidium chui vào ốc đến khi phát triển thành Cercaria cần khoảng 50 - 80 ngày Sau khi thành thục, Cercaria thoát khỏi ốc, ra môi trường

ngoài, bơi tự do trong nước, có kích thước 0,28 - 0,30 mm chiều dài và 0,23 mm

chiều rộng Sau vài giờ bơi trong nước, Cercaria rụng đuôi, tiết chất nhầy xung quanh thân, chất nhầy gặp không khí khô rất nhanh Lúc này Cercaria đã biến thành Adolescaria.

Adolescaria hình khối tròn, bên trong chứa phôi hoạt động Phôi có giác miệng, giác bụng, ruột phân nhánh và túi bài tiết Adolescaria thường ở

trong nước hoặc bám vào cây cỏ thuỷ sinh Nếu trâu, bò, dê nuốt phải

Adolescaria, vào đến dạ dày và ruột, lớp vỏ ngoài bị phân huỷ, ấu trùng được

giải phóng và di chuyển đến ống mật bằng 3 con đường:

- Một số ấu trùng dùng tuyến xuyên chui qua niêm mạc ruột, vào tĩnhmạch ruột, qua tĩnh mạch cửa vào gan, xuyên qua nhu mô vào ống mật

- Một số ấu trùng khác cũng dùng tuyến xuyên chui qua thành ruột vàoxoang bụng, đến gan, xuyên qua vỏ gan vào ống mật

- Một số ấu trùng từ tá tràng ngược dòng dịch mật để lên ống dẫn mật.Sau khi vào ống dẫn mật, ấu trùng ký sinh ở đó và phát triển thành sán

lá gan trưởng thành, thời gian hoàn thành vòng đời là 92 - 117 ngày Fasciola

trưởng thành có thể ký sinh trong ống dẫn mật của súc vật nhai lại 3 - 5 năm,

có khi tới 11 năm

Theo Phan Địch Lân (1994, 2004) [15], khoa học thú y nước ta đãnghiên cứu thành công vòng đời của sán lá gan Trong điều kiện nhiệt độthích hợp (28 - 300C), có ốc vật chủ trung gian (Lymnae swinhoei và Lymnae viridis), có vật chủ cuối cùng (trâu, bò, dê, cừu) thì vòng đời của sán lá gan ở

nước ta được xác định với các mức thời gian sau:

- Ở ngoài thiên nhiên: Trứng sán lá gan nở thành mao ấu (Miracidium)

trong khoảng 14 - 16 ngày

- Ở trong ốc vật chủ trung gian:

Mao ấu (Miracidium) phát triển thành bào ấu (Sporocyst) cần 7 ngày Bào ấu (Sporocyst) phát triển thành lôi ấu (Redia) cần 8 - 21 ngày Lôi ấu (Redia) phát triển thành vĩ ấu (Cercaria) non cần 7 - 14 ngày,

thành vĩ ấu trưởng thành cần 13 - 14 ngày

- Ở ngoài ốc vật chủ trung gian: Vĩ ấu phát triển thành kén

(Adolescaria) sau 2 giờ.

- Ở trâu, bò: Khi trâu, bò, bê, nghé nuốt phải Adolescaria, sau 79 - 88

ngày trong ống dẫn mật của trâu, bò đã có sán lá gan trưởng thành đẻ trứngtheo phân ra ngoài

Điều kiện nhiệt độ và ẩm độ của nước ta rất thuận lợi cho sự nhiễm vàgây bệnh của sán lá gan (kể cả gây nhiễm và nhiễm tự nhiên) Ở những vùng cómầm bệnh tồn tại, cứ trung bình 3 tháng sán lá gan lại hoàn thành vòng đời trong

cơ thể trâu, bò, nghĩa là trong trâu, bò lại tạo ra một đời sán mới Con vật trong khi

đã có sán lá gan ký sinh lại tiếp tục nhiễm thêm mầm bệnh mới, gây tình trạng bộinhiễm sán lá gan, vì vậy cường độ nhiễm tăng lên theo tuổi trâu, bò

Tóm tắt sơ đồ vòng đời của sán lá Fasciola Fasciola

(ống dẫn mật) Phân Trứng As, to, pH Mao ấu

Ốcnướcngọt

Nang ấu

Rời KCTG sau 2giờ

20-28 ngày

Vĩ ấu (lơ lửng trong nước hoặc bám vào

cây cỏ thuỷ sinh)

Sơ đồ vòng đời của sán lá gan

1.1.4 Đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá Fasciola

Bệnh sán lá gan phổ biến ở khắp các châu lục và nhiều nước trên thếgiới Ở Việt Nam, bệnh thấy ở khắp các tỉnh thành trong cả nước

Trịnh Văn Thịnh (1978) [28] cho biết, trâu trưởng thành mắc bệnh sán

lá gan do F gigantica, tỷ lệ nhiễm tới 50 - 70% Theo Phan Địch Lân (1980),

mổ khám 1.043 trâu ở Thái Nguyên, số trâu nhiễm sán lá gan là 57%, trong

đó có nhiều gan phải huỷ bỏ do số lượng sán quá nhiều Kết quả điều tra ởhuyện Bình Lục - Nam Hà, tỷ lệ nhiễm sán lá gan ở trâu là 51,2 - 57,5%

Đoàn Văn Phúc (1980) [19] đã kiểm tra 64 bò tại trại bò sữa Hà Nội,

thấy tỷ lệ nhiễm sán Fasciola là 73,43% Tác giả còn cho biết, bệnh sán lá

gan đã ảnh hưởng rõ rệt đến sức khoẻ và sản lượng sữa của đàn bò

Đoàn Văn Phúc và cs (1995) [21] cho biết, trâu bò thuộc khu vực HàNội nhiễm sán lá gan tỷ lệ 53,41%

Kết quả kiểm tra trâu, bò ở một số địa phương xung quanh Hà Nội, BắcGiang, Thái Nguyên, Hoà Bình, tỷ lệ nhiễm sán lá gan là 44,53% Trong đó, trâunhiễm 33,92%, bò nhiễm 54,21% (Lương Tố Thu và cs, 1996 [29])

Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan ở gia súc nhai lại phụ thuộc vàonhững yếu tố sau:

- Yếu tố thời tiết, khí hậu và mùa vụ:

Thời tiết, khí hậu của một vùng, một khu vực có liên quan trực tiếp đến

sự tồn tại và phát triển của ốc - vật chủ trung gian của sán lá gan Điều kiện

ẩm ướt, mưa nhiều tạo ra môi trường nước, giúp ốc nước ngọt sống và sinhsản thuận lợi

Trịnh Văn Thịnh (1963) [27], Trịnh Văn Thịnh và cs (1978) [28] PhạmVăn Khuê và cs (1996) [4], Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [8] đều chobiết, gia súc nhai lại nhiễm sán lá gan thường tăng lên vào mùa vật chủ trunggian phát triển Những năm mưa nhiều, tỷ lệ nhiễm sán lá gan tăng lên so với

những năm nắng ráo và khô hạn Mùa vụ gắn liền với sự thay đổi thời tiết khíhậu Mùa Hè - Thu, số gia súc bị nhiễm sán lá gan tăng cao hơn các mùa kháctrong năm Cuối mùa thu và mùa đông bệnh thường phát ra.

- Yếu tố vùng và địa hình:

Vùng và địa hình là hai khái niệm khác nhau, song có liên quan chặtchẽ với nhau Các vùng khác nhau có địa hình không giống nhau Địa hình làyếu tố quan trọng quyết định sự khác nhau giữa các vùng

Các vùng khác nhau trên thế giới nói chung và ở Việt Nam nói riêngđều thuộc bốn loại địa hình: ven biển, đồng bằng, trung du và miền núi

Hầu hết các nhà ký sinh trùng học thống nhất rằng, gia súc nhai lại ởvùng đồng bằng nhiễm sán lá gan nhiều nhất, tỷ lệ và cường độ nhiễm giảmdần đối với đàn gia súc nhai lại ở vùng ven biển, vùng trung du và vùng núi

Về nguyên nhân dẫn đến quy luật này, các tác giả Trịnh Văn Thịnh (1963)[27]; Phạm Văn Khuê và cs (1996) [4]; Kaufmann (1996) [45] ) đều giảithích: vùng đồng bằng có nhiều hồ, ao, kênh, rạch, có điều kiện cho ốc - vậtchủ trung gian sống và sinh sản Các kiểu địa hình khác thì vấn đề này hạnchế hơn so với đồng bằng

Phan Địch Lân (1994, 2004) [15] đã điều tra 7.359 trâu, bò ở 26 tỉnhmiền Bắc Việt Nam, kết quả thấy: Trâu, bò ở vùng đồng bằng nhiễm sán lágan cao nhất, sau đó đến vùng trung du, vùng ven biển và miền núi (bìnhquân tỷ lệ nhiễm sán ở các vùng điều tra như sau: vùng đồng bằng từ 19,6%đến 61,3%, vùng trung du từ 16,4% đến 50,2%, vùng ven biển từ 13,7% đến39,6%, vùng núi từ 14,7% đến 44,0%) Theo Lương Tố Thu (2000), tỷ lệnhiễm sán lá gan ở trâu, bò vùng đồng bằng qua mổ khám là 88%, vùng trung

du là 77,6%

- Yếu tố loài và tuổi vật chủ cuối cùng:

Súc vật nhai lại đã được thuần hoá như trâu, bò, dê, cừu đều nhiễm sán

lá gan Fasciola Ngoài ra, súc vật hoang dã cũng nhiễm sán lá này (hươu, nai,

hoẵng ) Cũng có những trường hợp thỏ, ngựa, lợn nhiễm Fasciola, ngay cả

người cũng có thể nhiễm sán

Ở nước ta, theo Trịnh Văn Thịnh và cs (1978) [28], Phạm Văn Khuê và

cs (1996) [4], loài súc vật nhiễm sán lá Fasciola nhiều nhất là trâu (79,6%), bò ít

hơn (36%), dê ít nhất (20%) Sở dĩ trâu nhiễm sán lá gan nhiều là do đặc tính ưanước của chúng (thích ăn gần chỗ có nước, đằm tắm trong nước và uống nước ởvũng, ao, kênh rạch), trong khi đặc điểm của bò và dê ít ưa nước hơn

Về mối liên quan giữa tỷ lệ, cường độ nhiễm sán lá gan và tuổi vật chủ,các tác giả đều thống nhất rằng, tuổi súc vật càng cao thì tỷ lệ và cường độnhiễm càng tăng lên Một điều dễ nhận thấy là, súc vật tuổi càng tăng lên(thời gian sống càng dài) thì sự tiếp xúc với môi trường ngoại cảnh càng

nhiều, cơ hội gặp và nuốt phải nang ấu (Adolescaria) càng cao Mặt khác, sán Fasciola trưởng thành có thời gian ký sinh ở súc vật nhai lại tương đối dài (3

- 5 năm, thậm chí tới 11 năm) Đó chính là cơ sở khoa học giải thích cho quy

luật nhiễm theo tuổi vật chủ của sán lá Fasciola spp

Phan Địch Lân (1994, 2004) [15] cho biết, trâu dưới 3 năm tuổi chỉnhiễm sán lá gan 17,2 - 22,0%; trâu 3 - 5 năm tuổi nhiễm sán lá gan 31,2 -40,2%, trâu 5 - 8 năm tuổi nhiễm 42,4 - 57,5%, trâu trên 8 năm tuổi nhiễm56,8 - 66,3%, trâu ở độ tuổi phế canh (loại thải) khi mổ khám thấy tỷ lệ nhiễmcao tới 84,6% (những trâu này bị bệnh rất nặng, gan phải huỷ bỏ toàn bộ do

có quá nhiều sán ký sinh) Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2000) [9], tỷ lệ vàcường độ nhiễm sán lá gan cũng tăng lên theo tuổi dê

Nguồn gieo rắc bệnh chủ yếu là súc vật nuôi (trâu, bò, dê, cừu ) và

những dã thú mang Fasciola Trứng sán lá gan theo phân của súc vật ra ngoài

tự nhiên Hàng năm, mỗi sán lá gan ký sinh đẻ khoảng 6000 trứng Vì vậy,mỗi súc vật mang sán hàng năm thải khối lượng trứng khá lớn ra đồng cỏ vàcác bãi chăn thả Những đồng cỏ ẩm thấp, lầy lội là những nơi cần thiết để mầmbệnh phát triển và xâm nhập vào súc vật, đồng thời thuận lợi cho trứng

nở thành Miracidium và thuận lợi cho vật chủ trung gian của Fasciola

tồn tại và phát triển

- Vật chủ trung gian của Fasciola spp.

Sự phân bố các loài ốc - vật chủ trung gian của sán lá gan phụ thuộcvào các vùng địa lý khác nhau Theo Phạm Văn Khuê và cs (1996) [4],

Kaufmann (1996) [45], vật chủ trung gian của sán lá Fasciola là các loài ốc nước ngọt họ Lymnaea: L auricularia, L swinhoei, L viridis, Galba truncatula, Radix ovata

Phan Địch Lân (1985) [14], đã tổng hợp và cho biết: Loài ốc - vật chủ

trung gian của F gigantica ở Ấn Độ là L acuminata, ở châu Phi là L natalensis, ở Pakistan là L permisca, ở Apganixtan là L luteola, ở Malaixia là

L auricularia, ở Nhật Bản là L pervia, ở Indonexia và Philippine là L viridis,

ở Hungari là G truncatula

Theo Jorgen Hansen và cs (1994) [44], nhiệt độ thích hợp nhất cho sựphát triển của ốc là 15 - 260C, khi ở nhiệt độ này chúng đẻ số lượng trứng rấtlớn Trứng nở trong vòng 2 tuần và sau 1 tháng thành ốc trưởng thành Mộtcon ốc trong vòng 10 - 12 tuần có thể sinh sản ra hàng ngàn con ốc Ở dưới

100C, ốc không phát triển và ngừng hoạt động Tuy nhiên, ốc có thể chui vàobùn và sống trong điều kiện bất lợi nhiều tháng

Phan Địch Lân và cs (1985) [14] đã khảo sát đặc điểm sinh học của ốc

-vật chủ trung gian của F gigantica ở miền Bắc Việt Nam Tác giả cho biết, vật chủ trung gian của sán lá Fasciola là hai loài ốc nước ngọt thuộc giống Lymnae với tên gọi là ốc vành tai (L swinhoei) và ốc chanh (L viridis) Loài

L swinhoei có vỏ mỏng, dễ vỡ, không có nắp miệng, kích thước 20 mm, vòng

xoắn cuối cùng rất lớn, chiếm gần hết phần thân, vỏ loe ra như vành tai Loài

L viridis cũng có vỏ mỏng, không có nắp miệng, dài 10 mm, vỏ dễ vỡ, có 4

-5 vòng xoắn, vòng xoắn cuối cùng lớn Năm 2009,Viện sinh thái và Tàinguyên sinh vật đã tìm thấy 3 loài ốc sau:

Ốc L viridis thường sống ở những nơi nước xâm xấp, đẻ trứng thành ổ

7 - 10 trứng, sau 7 ngày nở thành ốc con Ốc L swinhoei thường sống trôi nổi

ở cống rãnh, ao, hồ, đẻ trứng quanh năm, mỗi ổ có 60 - 150 trứng Trong điềukiện nhiệt độ ở nước ta, ốc đẻ quanh năm và quanh năm có ốc con được nở ra

Phan Địch Lân (1994, 2004) [15] cho biết: ốc L swinhoei phân bố nhiều hơn ở vùng đồng bằng, trong khi ốc L viridis phân bố nhiều hơn ở vùng núi,

trung du và ven biển Theo kết quả nghiên cứu của tác giả thì hai loài ốc này đềuxuất hiện trong cả 12 tháng của năm, nhưng mật độ (tính trên 1 m2) khác nhau

theo vùng: vùng đồng bằng, mật độ ốc L swinhoei cao hơn và phân bố đều trong năm, còn ốc L viridis thì xuất hiện với mật độ cao hơn ở các vùng núi, trung du, ven biển Từ đó, tác giả nhận xét rằng, L swinhoei chịu nước hơn, còn L viridis

chịu cạn hơn

Sự tồn tại và phát triển quanh năm ở tất cả các vùng của ốc - vật chủtrung gian là điều kiện quan trọng nhất làm cho tỷ lệ nhiễm sán lá gan của súcvật nhai lại ở nước ta cao và phổ biến ở tất cả các vùng Phan Địch Lân (1994,2004) [15] đã tổng hợp và cho biết, nước ta được xếp vào một trong 5 nước ởChâu Á trồng lúa nước có đàn trâu, bò nhiễm bệnh sán lá gan với tỷ lệ caonhất Kết quả điều tra ở một số vùng cho thấy:

Ở 11 tỉnh miền núi, tỷ lệ nhiễm sán lá gan của trâu bò là 39%

Ở 4 tỉnh trung du, tỷ lệ nhiễm sán lá gan của trâu bò là 42,2%

Ở 5 tỉnh thuộc vùng đồng bằng, tỷ lệ nhiễm sán lá gan là 57,5%

Ở 6 tỉnh thuộc vùng ven biển, tỷ lệ nhiễm sán lá gan là 36,7%

Theo Nguyễn Trọng Kim (1997) [5], giữa tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lágan của ốc - vật chủ trung gian với tỷ lệ nhiễm sán lá gan của trâu, bò có mốitương quan thuận, nghĩa là, nếu tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan ở ốc nướcngọt cao thì tỷ lệ nhiễm sán lá gan của trâu, bò ở khu vực đó cũng cao

- Sức đề kháng của trứng và ấu trùng sán lá gan:

Trứng sán lá gan được thải theo phân súc vật nhai lại ra môi trườngngoại cảnh Trứng sán rất nhậy cảm với điều kiện khô hạn và tác động trực tiếpcủa ánh sáng mặt trời Ở trong phân khô, phôi ngừng phát triển, trứng bị chết sau

8 - 9 ngày

Trong điều kiện khô hạn, vỏ trứng bị nhăn nheo, biến đổi hình dạng,

Miracidium bị chết trong vỏ trứng sau 1 - 1,5 ngày Ở môi trường ẩm ướt, trứng

có khả năng sống khá lâu (trong phân hơi ẩm, trứng tồn tại đến 8 tháng) Dưới ánhnắng chiếu trực tiếp, trứng chết nhanh Phôi bị chết sau 2 ngày ở nhiệt độthấp (-50C  - 150C) Nhiệt độ 10 - 200 C, trứng ngừng phát triển Nhiệt độ 40

- 500C, phôi chết sau vài phút (Phạm Văn Khuê và cs 1996 [4])

Khi phát triển đến giai đoạn nang ấu (Adolescaria), sức đề kháng của chúng tăng lên rõ rệt Adolescaria có khả năng tồn tại ở nhiệt độ -40C  -60C

Ở điều kiện nhiệt độ bình thường, những Adolescaria có trong cỏ khô bị ẩm và

trong môi trường nước có thể tồn tại đến trên 5 tháng (Kaufmann (1996) [45])

1.1.5 Bệnh lý và lâm sàng bệnh sán lá gan ở trâu, bò

* Bệnh lý của bệnh sán lá gan trâu, bò:

Theo các nhà ký sinh trùng học, sán lá gan gây bệnh ở vật chủ bằng cáctác động cơ học, tác động của độc tố, sự chiếm đoạt dinh dưỡng và tác độngmang trùng Khi súc vật mới nhiễm bệnh, sán non di hành trong cơ thể làmtổn thương ở ruột, thành mạch máu, nhu mô gan Một số ấu trùng có thể theomáu di chuyển “lạc chỗ” đến phổi, lách, cơ hoành, tuyến tuỵ gây tổn thương

và xuất huyết nặng hoặc nhẹ Sán non xuyên qua các nhu mô gan, làm tổ chứcgan bị phá hoại, tạo ra những đường di hành đầy máu và mảnh tổ chức gan bịphá huỷ Gan bị viêm từ nhẹ đến nặng tuỳ theo số lượng ấu trùng nhiễm vào

cơ thể Súc vật bị thiếu máu do xuất huyết, có thể chết do mất máu

Tác động cơ giới của sán còn tiếp tục khi sán đã vào ống dẫn mật, tiếptục tăng lên về kích thước và phát triển thành sán trưởng thành Sán trưởngthành thường xuyên kích thích niêm mạc ống dẫn mật bằng các gai cutin trên

cơ thể, gây viêm ống mật Số lượng sán nhiều có thể làm tắc ống mật, mật ứlại không xuống ruột được sẽ tràn vào máu, gây hiện tượng hoàng đản

Trong quá trình ký sinh sán thường tiết độc tố Độc tố tác động vàothành ống dẫn mật và mô gan, gây biến đổi đại thể và vi thể, làm tăng quátrình viêm Đồng thời, độc tố của sán còn hấp thu vào máu, gây hiện tượngtrúng độc toàn thân, gây huỷ hoại máu, làm biến chất protein trong máu, làmAlbumin giảm, globulin tăng Độc tố của sán còn làm tăng nhiệt độ cơ thể,tăng bạch cầu (đặc biệt là bạch cầu ái toan) Độc tố của sán còn tác động vàothần kinh, làm cho con vật có triệu chứng thần kinh (run rẩy, đi xiêu vẹo…).Độc tố của sán lá gan tác động vào thành mạch máu, làm tăng tính thấm củathành mạch, gây hiện tượng thuỷ thũng, làm cho máu đặc lại Cũng do tácđộng của độc tố nên giữa những tiểu thuỳ gan có hiện tượng thấm nhiễmhuyết thanh và tế bào, hình thành nên các mô liên kết mới dọc theo các váchngăn của tiểu thuỳ gan và quanh ống mật, vì vậy những ống mật này cũng dàylên Quá trình viêm kéo dài làm cho các tế bào tổ chức tăng sinh, thay thếnhững tế bào nhu mô gan, gây hiện tượng xơ gan và teo gan Khi súc vậtnhiễm sán lá gan nặng, hiện tượng xơ gan chiếm diện tích lớn của gan, làmcho chức năng của gan bị phá huỷ Từ đó dẫn đến hàng loạt rối loạn khácnhư: rối loạn cơ năng dạ dày - ruột, thiếu máu, suy nhược, gầy dần, cổchướng, xoang phúc mạc tích nước

Một tác động quan trọng của Fasciola khi ký sinh ở vật chủ là chiếm

đoạt dinh dưỡng Dinh dưỡng của sán lá gan là máu súc vật mà nó ký sinh.Bằng phương pháp phóng xạ người ta đã thấy mỗi sán ký sinh ở ống dẫn mậtlấy 0,2 ml máu mỗi ngày Như vậy, nếu súc vật nhiễm ít sán thì vai trò chiếm

đoạt chất dinh dưỡng không rõ, nhưng nếu súc vật có hàng trăm, hàng nghìnsán ký sinh thì lượng máu mất đi rất nhiều.

Ngoài các tác động gây bệnh trên, trong khi di hành, sán non còn mangtheo các loại vi trùng từ bên ngoài vào máu, gan và những cơ quan khác, gâynhững bọc mủ hoặc gây bệnh truyền nhiễm khác

Tất cả những tác động trên của sán lá Fasciola làm cho sức đề kháng

của cơ thể trâu, bò giảm sút nghiêm trọng, dễ mắc các bệnh khác, hoặc làmcho các bệnh đang có trong cơ thể súc vật nặng thêm lên

Daves (1958) nhận xét rằng, gia súc bị suy nhược và thiếu máu là do

độc tố của F gigantica, độc tố của sán còn tác động gây hiện tượng protein

trong huyết thanh biến chất, lượng Albumin giảm và Globulin tăng Quá trình

dị ứng của cơ thể súc vật là kết quả tác động của các kháng nguyên sinh ra từsán với kháng thể xuất hiện trong tổ chức gan, và các chất sinh ra từ tổ chứckhác bị huỷ hoại Quá trình dị ứng dẫn đến những rối loạn đầu tiên, biểu hiệnbằng hiện tượng suy dinh dưỡng, thiếu vitamin A, bằng sự tăng quá nhiềubạch cầu ái toan trong cơ thể

* Triệu chứng bệnh sán lá gan ở trâu, bò:

Triệu chứng lâm sàng là biểu hiện ra bên ngoài bởi các tác động gây

bệnh của sán Fasciola Triệu chứng ở trâu, bò biểu hiện nặng hay nhẹ còn phụ

thuộc vào cường độ nhiễm sán, tình trạng sức khoẻ và tuổi của súc vật, tìnhtrạng chăm sóc quản lý…

- Thể cấp tính thường gặp ở trâu, bò 1,5 - 2 năm tuổi (Phạm Văn Khuê

và cs, 1996) [4], trong giai đoạn sán non di hành hoặc khi nuôi dưỡng, chămsóc kém

Súc vật biểu hiện: Ăn uống sút kém, suy nhược, chướng bụng, ỉa chảy,miệng hôi, sốt, gan sưng to và đau, thiếu máu, vàng da, đôi khi có triệu chứngthần kinh (lảo đảo, xiêu vẹo) Súc vật có thể chết do xuất huyết nặng, trúngđộc và suy nhược cơ thể

- Thể mãn tính thấy phổ biến ở trâu, bò trưởng thành, khi súc vật đượcnuôi dưỡng tốt và sán đã ở giai đoạn trưởng thành, ký sinh trong ống dẫn mậtvới số lượng ít Thể mãn tính thường xuất hiện sau thể cấp tính 1 - 2 tháng.

Súc vật biểu hiện: Ăn uống kém, suy nhược, niêm mạc nhợt nhạt, lông

xù và dễ rụng (nhất là lông ở vùng dọc hai bên sườn và dọc xương ức) Xuấthiện thuỷ thũng ở mí mắt, yếm, ngực, bộ phận sinh dục Thuỷ thũng ban đầulúc thấy, lúc không, về sau thấy liên tục Con vật nhai lại yếu, khát nước, ỉachảy xen kẽ táo bón, gày yếu dần Giai đoạn sau đi tháo nhiều hơn và gầy rấtnhanh Kiểm tra lâm sàng thấy gan sưng to và đau Có thể thấy hiện tượng sảythai ở bò cái bị bệnh, lượng sữa có thể giảm 30 - 50% Triệu chứng thần kinhcũng có thể gặp song rất hiếm Bệnh kéo dài nhiều tháng, con vật có thể chết dosuy nhược toàn thân

Phan Địch Lân (1994, 2004) [15] đã theo dõi 37 trâu bị bệnh sán lá gannặng, thấy các triệu chứng thường lặp đi lặp lại như: gày rạc, suy nhược cơthể (37/ 37); phân nhão không thành khuôn, có lúc ỉa lỏng (32/ 37); niêm mạcmắt nhợt nhạt, thiếu máu kéo dài (27/ 37); lông xù, da mốc, lông dễ rụng (26/37); phân đen, thối khắm (22/ 37); mắt sâu, có dử (18/ 37); bụng ỏng, ỉa chảykéo dài (13/ 37); thuỷ thũng ở nách, hai chân trước, gan to (11/ 37); thuỷthũng ở ngực, ức liên tục (9/ 37)

Nhìn chung, khi súc vật bị bệnh sán lá gan kéo dài, cơ thể suy nhượcnặng, nếu không được điều trị kịp thời thì súc vật thường chết

* Bệnh tích của trâu, bò mắc bệnh sán lá gan:

Tuỳ theo mức độ nhiễm sán mà bệnh tích có sự khác nhau

Đối với trâu bò nhiễm sán nặng, bệnh tích thấy rõ là viêm gan cấp tính,gan sưng to, màu nâu sẫm, sung huyết Trên mặt gan có thể thấy những đường

di hành của sán non tạo thành những vệt đỏ thẫm, dài 2 - 4 mm, trong có sánnon với số lượng nhiều Lớp thanh mạc xuất huyết nhẹ, đôi khi có tơ huyết

Khi nhiễm nặng thấy viêm phúc mạc, gan xuất huyết nhiều, niêm mạc mắtnhợt nhạt.

Ở những súc vật nhiễm sán lá gan đã lâu, gan viêm mãn tính, nhữngchỗ mô gan bị phá huỷ có sẹo mầu vàng xám Gan xơ cứng, niêm mạc ốngdẫn mật dầy, có hiện tượng canxi hoá mặt trong thành ống Lòng ống dẫn mật

giãn rộng, chứa đầy dịch màu nâu và sán Fasciola Khi ống mật bị canxi hoá

nhiều, sán ở chỗ đó thường bị chết hoặc chuyển đến chỗ ít biến đổi hơn

Ngoài gan và ống mật, đôi khi còn thấy sán ở phổi trâu, bò Trường hợpnày sán ở trong những bọc bằng quả trứng gà hoặc nhỏ hơn, trong chứa dịchmàu nâu

Quan sát biến đổi vi thể dưới kính hiển vi thấy: Nhu mô gan mất màu,liên bào ống mật thoái hoá, niêm mạc tăng sinh thành những u, trong u chứanhiều bạch cầu, lâm ba cầu, bạch cầu ái toan, đại thực bào chứa đầy sắc tố mật

và máu Quá trình viêm tăng sinh lan xuống lớp sâu hơn của ống mật: Tổ chứcliên kết tăng sinh, lan vào các thuỳ gan làm tan biến tổ chức gan, Phạm VănKhuê và cs (1996) [4]

Nghiên cứu bệnh sán lá gan ở trâu, bò, Phan Địch Lân (1994 - 2004)[15], cho biết: Khi mổ khám trâu, bò bị bệnh sán lá gan thấy có bệnh tích đặcbiệt là gan to hơn nhiều so với bình thường (gấp 2 - 3 lần) Gan màu đỏ sẫm,biểu hiện sung huyết Dưới vỏ gan thấy ứa nước, trên mặt gan còn giữ lạinhững đường ngoằn ngoèo do sán di hành Tổ chức liên kết phát triển tạo nênnhững sẹo đặc biệt Trong gan còn thấy những sán non không đến được ốngdẫn mật, đóng kén và chết trong kén to bằng hạt đậu Cắt tổ chức gan thấy lạoxạo do biến chất thoái hoá Do tăng sinh tổ chức liên kết nên gan cứng và xơgan Trường hợp viêm phúc mạc xoang bụng chứa nhiều nước (cổ chướng)

Nguyễn Thị Kim Thành và cs (1996) [25], đã nghiên cứu một số chỉtiêu sinh lý máu của trâu bị bệnh sán lá gan, kết quả thấy: Số lượng hồng cầu

giảm, hàm lượng huyết sắc tố giảm, số lượng bạch cầu tăng, công thức bạchcầu thay đổi nghiêng về bạch cầu ái toan.

1.1.6 Chẩn đoán bệnh do sán lá Fasciola gây ra

Việc chẩn đoán có thể tiến hành trên súc vật còn sống hoặc đã chết.Tuỳ điều kiện thực tế mà áp dụng biện pháp phù hợp

* Đối với súc vật còn sống:

Để chẩn đoán bệnh do Fasciola gây ra, thường áp dụng các biện pháp

như: chẩn đoán lâm sàng, kết hợp đặc điểm dịch tễ học, xét nghiệm phân convật nghi bệnh và chẩn đoán miễn dịch học

Triệu chứng lâm sàng của bệnh sán lá gan thường thấy nhất là: Kiệtsức, suy nhược, rụng lông, phù thũng ở ngực, ức Tuy nhiên, các biểu hiện

trên không chỉ thấy ở bệnh do Fasciola gây nên Vì vậy, triệu chứng lâm sàng

không phải là căn cứ duy nhất để kết luận bệnh

Những dẫn liệu dịch tễ học của bệnh cần xem xét là: Yếu tố mùa vụ,vùng và tuổi súc vật bệnh Song, những dẫn liệu này cũng chỉ là những thôngtin cần xem xét trong chẩn đoán chứ không phải là sở cứ quan trọng nhất đểkết luận về bệnh

Việc xét nghiệm phân tìm trứng Fasciola là biện pháp có tính quyết

định trong chẩn đoán Thường dùng phương pháp gạn rửa nhiều lần TheoPhạm Văn Khuê và cs (1996) [4], phương pháp này phổ biến nhưng chưa phát

hiện được tất cả mọi gia súc nhiễm sán Fasciola, nhất là ở những súc vật

nhiễm ít hoặc ở giai đoạn sán còn non Khi xét nghiệm phân, cần phân biệt

trứng Fasciola với trứng Paramphistomum ký sinh ở dạ cỏ (phân biệt về màu

sắc, hình dạng, tế bào noãn hoàng và kích thước)

Phương pháp miễn dịch học để phát hiện súc vật nhiễm Fasciola đã

được sử dụng là: Dùng kháng nguyên tiêm nội bì, căn cứ vào phản ứng ở nơitiêm để kết luận Các phương pháp khác như: Phương pháp miễn dịch menELISA, phương pháp miễn dịch huỳnh quang có thể áp dụng trong chẩn

đoán bệnh sán lá gan Tuy nhiên, do khó khăn về nguyên liệu và việc chếkháng nguyên chuẩn nên các phương pháp này còn ít được dùng để chẩn đoánbệnh ký sinh trùng nói chung và bệnh sán lá gan nói riêng.

* Đối với súc vật chết:

Khi súc vật chết, mổ khám tìm sán Fasciola ở giai đoạn ấu trùng và

trưởng thành trong ống dẫn mật, gan, xoang bụng Phương pháp này chínhxác hơn cả, vì tìm thấy cả sán non ở giai đoạn di hành

1.1.7 Phòng và trị bệnh

* Điều trị bệnh:

Hiện nay, có thể tẩy sán lá gan cho gia súc nhai lại bằng một trong cácloại thuốc sau:

- Thuốc Dertil: Dertil là thuốc có tác dụng đặc hiệu với sán lá gan

Fasciola Dertil được bào chế thành viên to, màu xanh lá cây đậm Viên

Dertil “O” có chứa 100 mg hoạt chất, viên Dertil “B” chứa 300 mg hoạt chất

Dertil có tác dụng diệt sán lá gan trưởng thành ở gia súc nhai lại, vớiliều cao còn diệt được cả sán non đang di hành trong nhu mô gan Thuốc chỉcần dùng một lần, không cần điều trị lặp lại Thuốc Dertil được chỉ định điềutrị bệnh sán lá gan cấp tính và mãn tính cho gia súc nhai lại

- Thuốc Fasciolid (tên khác: Fasciolidum):

Thuốc được bào chế dưới dạng dung dịch màu vàng nâu, chứa 25%

hoạt chất là Nitroxinil Fasciolid có tác dụng tẩy sán lá gan Fasciola dạng

trưởng thành, được chỉ định tẩy sán lá gan cho gia súc nhai lại

Liều lượng: 0,04 ml/ kgTT (1 ml/ 25 kg TT, tương đương 1 mg hoạtchất/ kg TT), tiêm dưới da Khi tẩy sán lá gan, nên dùng thuốc 2 - 3 lần, cáchnhau 25 - 30 ngày để có hiệu quả điều trị triệt để.

- Thuốc Tolzan - F (chế phẩm của Oxyclozanid), được bào chế dướidạng dung dịch hoặc viên nén, dùng với liều 10 - 11 mg/ kg TT Thuốc có tác

dụng đặc hiệu với sán Fasciola trưởng thành và sán non ở trâu, bò, dê, cừu.

Hiện nay, trên thị trường thuốc thú y thấy phổ biến thuốc Tolzan - F dạng

viên nén, cho uống tẩy sán Fasciola với liều 1 viên (1000 mg)/ 90 - 100 kg TT.

Thuốc Tolzan - F đã được sử dụng cho trâu, bò ở nước ta, song chưa cókết quả nghiên cứu thử nghiệm tẩy sán lá gan cho dê, vì vậy cần thử nghiệmtrước khi dùng đại trà

- Thuốc Fasinex (chế phẩm của Triclabendazol): Thuốc có tác dụngdiệt cả sán non và sán trưởng thành ký sinh ở ống dẫn mật hoặc đang di hànhtrong các nhu mô gan

Thuốc Fasinex được chỉ định dùng điều trị bệnh sán lá gan cho gia súcnhai lại

Liều lượng: 10 - 12 mg/ kg TT Cho uống một lần duy nhất

Thuốc có hiệu lực cao và an toàn cho gia súc dùng thuốc

Ngoài ra các thuốc Albendazol, Bithionol, Closantel cũng có tác dụng

tẩy sán lá Fasciola ở gia súc nhai lại.

Đoàn Văn Phúc (1980) [19], Đoàn Văn Phúc và cs (1980) [20], Lương

Tố Thu và cs (1996) [29], đã kiểm tra hiệu lực của thuốc tẩy sán lá gan chotrâu, bò Tác giả khuyến cáo rằng, trên thị trường Việt Nam hiện nay nên sửdụng Fasinex - 900 dạng viên (1 viên/ 75 - 100 kg TT) hoặc Fasinex - 900dạng sữa (10 ml/ 100 kg TT) Hai loại thuốc này đều cho hiệu lực tẩy sán lágan cao và an toàn

Sử dụng Fasinex liều 12 mg/ kg TT tẩy sán lá gan cho trâu, Lương TốThu và cs ( 1996) [30], cho biết, thuốc có hiệu lực và hiệu lực tẩy sạch sánđều đạt 100%.

Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2000) [10], đã thử nghiệm một số thuốc tẩysán lá gan cho dê địa phương ở tỉnh Thái Nguyên và Bắc Kạn, kết quả thấy:thuốc Dertil (liều 5 - 8 mg/ kg TT) có tác dụng tẩy sạch 100% và an toàn đốivới dê; thuốc Fasciolid (liều 0,04 ml/ kg TT) có hiệu lực tẩy sạch là 95% vàtương đối an toàn cho dê; thuốc Vermitan (chứa 20% Albendazol, liều 35 mg/

kg TT) đạt hiệu lực tẩy sạch và an toàn đều là 100%, ngoài ra Vermitan còn cótác dụng tẩy cả sán dây và giun tròn ở dê

- Ủ phân theo phương pháp sinh học, lợi dụng quá trình lên men sinhnhiệt các chất hữu cơ trong phân của hệ vi sinh vật để tiêu diệt trứng sán lágan trong phân súc vật nhai lại Biện pháp này có hiệu quả và đơn giản nhất

để phòng bệnh do sán Fasciola gây ra.

- Xử lý các cơ quan có sán ký sinh: Nếu gan nhiễm nhiều sán phải huỷ

bỏ (chôn, rắc vôi bột, đốt) hoặc không huỷ bỏ mà để lại chế biến chín làmthức ăn gia súc

- Diệt vật chủ trung gian của sán lá Fasciola: Tháo cạn nước, làm khô

những đồng cỏ, bãi chăn lầy lội, ẩm ướt Dùng một số chất hoá học có khảnăng diệt ốc (vôi bột, sulfat đồng ), đẩy mạnh chăn nuôi thuỷ cầm (vịt, ngan,ngỗng) và cá trắm đen

- Tăng cường vệ sinh thức ăn, nước uống Không chăn thả súc vật nhailại ở những bãi chăn lầy lội, ẩm thấp Nếu khó khăn về bãi chăn thả thì chỉchăn ở bãi chăn lầy lội, ẩm ướt 1,5 - 2 tháng, rồi phải chuyển sang chăn ở bãikhác Nếu lấy cỏ ở những chỗ ẩm ướt thì phải cắt cao hơn mặt nước để tránh

Adolescaria, sau đó phơi khô, bảo quản trong 6 tháng rồi cho gia súc ăn Nguồn nước uống phải sạch, không có vật chủ trung gian và Adolescaria.

- Không nhập súc vật nhai lại từ vùng có bệnh, khi chưa kiểm tra vàđiều trị triệt để

1.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước

1.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước

Trước đây, ở nước ta có nhiều cuộc điều tra về tỷ lệ nhiễm sán lá gan.Phan Địch Lân (1985) [14], tổng kết tình hình nhiễm sán lá gan ở trâu bò chothấy tỷ lệ nhiễm tăng theo lứa tuổi và tăng dần từ miền biển đến miền núi,trung du và đồng bằng; tỷ lệ nhiễm dao động từ 13,7 - 61,3%

Kết quả điều tra của Hồ Thị Thuận và Nguyễn Ngọc Phương (1987) [32], ởcác tỉnh miền Nam cho thấy, tỷ lệ trâu, bò nhiễm sán lá gan từ 1,4 - 36,2%

Phan Thế Việt và cs (1977) [34] cho thấy, tỷ lệ nhiễm sán lá gan trâu,

bò ở miền biển thấp 4,17%, còn ở đồng bằng cao hơn tới 44,5%

Đoàn Văn Phúc và cs (1995) [21] thông báo trâu, bò ở khu vực Hà Nộinhiễm sán lá gan với tỷ lệ 33,9%

Nguyễn Trọng Kim (1997) [5] công bố tỷ lệ nhiễm sán lá gan ở trâu, bò

ở Hà Bắc (cũ) là 49,95%; ở Nghệ An từ 25,27 - 32,65%; tỷ lệ nhiễm sán lágan chung ở miền Bắc Việt Nam là 43,56%

Lương Tố Thu và cs (2000) [31], Đặng Ngọc Thạch (2006) [23], cho thấy

bò ở khu vực Hà Nội bị nhiễm với tỷ lệ 42,3 - 73,3%, ở trâu là 32,3 - 76,8% Tỷ lệnhiễm sán lá gan trung bình trên cả nước ở trâu là 46,23%, dao động từ 8,74 -61,09%, ở bò là 30,64%, tỷ lệ này tăng dần từ Nam ra Bắc

Gần đây, Đỗ Đức Ngái và cs 2006 [18] thông báo tỷ lệ nhiễm sán lágan ở Đăklăk từ 34,2-62,6%, tỷ lệ nhiễm sán lá gan ở trâu, bò xung quanh HàNội là 28% (ở bò từ 3 - 24 tháng tuổi) và 39% (ở trâu, bò trưởng thành)

Theo Phan Địch Lân (1985) [14], ốc L viridis phân bố rộng ở tất cả các vùng, ở vùng núi chiếm 75% trong số 2 loài ốc Lymnaea thu được, còn ở

vùng trung du chiếm 66,5%, ven biển chiếm 51,5% và vùng đồng bằng là

42,0% Còn L.swinhoei phân bố hẹp hơn, tập trung chủ yếu ở đồng bằng và

ven biển, còn ở vùng núi và trung du ít hơn, đặc biệt ở miền núi rất ít, cónhiều nơi không có, vùng đồng bằng chiếm 58% Trứng ốc có thể nở đượcquanh năm với tỷ lệ rất cao, từ 89,1 - 100% và thời gian nở rất nhanh, mùa hècần 5,5 ngày, mùa đông xuân là 8,5 ngày

Nguyễn Trọng Kim (1997) [5] cho biết cả 2 loài ốc Lymnaea đều bị nhiễm

ấu trùng sán lá gan với tỷ lệ nhiễm rất cao (43,1 -62,1%) ở tỉnh Hà Bắc (cũ) Tỷ

lệ nhiễm trung bình ở các tỉnh miền Bắc ở ốc L swinhoei là 20,8% và ở ốc L viridis là 19,6%

Đỗ Đức Ngái và cs (2006) [18] cũng cho thấy, ốc L swinhoei ở Đăklăk

nhiễm ấu trùng sán lá gan với tỷ lệ là 40,0 - 50,0%

Theo Hồ Thị Thuận và Nguyễn Ngọc Phương (1987) [32], cả 2 loài ốc

ở các tỉnh miền nam đều là vật chủ trung gian của sán lá gan, nhưng tỷ lệnhiễm rất thấp (1,1%)

Kết quả điều tra trong nhiều năm của Nguyễn Thị Kim Thành và cs(1996) [25] ở Cổ Nhuế, Hà Nội cũng cho kết quả tương tự, tỷ lệ nhiễm ấutrùng sán lá gan ở 2 loài ốc chỉ từ 0,7 - 3,0%

Phan Thế Việt và cs (1977) cho biết [34] Tác giả đã không tìm thấy ấu

trùng sán lá gan trong hơn 1.000 ốc Lymneae ở tỉnh Hà Tây (cũ)

Theo Đỗ Đức Ngái và cs (2006) [18], tỷ lệ nhiễm ấu trùng Fasiola của

ốc L swinhoei ở ĐăkLăk là 0,45%;

Kết quả điều tra của Hoàng Văn Hiền và cs (2011) [1], cho thấy, chỉ

0,06% và 1% ốc L viridis ở Đông Anh và Phú Xuyên (Hà Nội) bị nhiễm ấu

trùng sán lá gan

1.2.2 Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài

Tổng kết về bệnh sán lá gan, Kendall (1954) [46] đã kết luận rằng,

F gigantica phổ biến trên toàn thế giới, ký chủ trung gian của chúng là các

loài ốc không dễ dàng phân biệt về mặt hình thái hoặc sinh thái Tác giả chorằng, các loài của vật chủ trung gian chính ở Nam, Tây và Đông châu Phi là

L Natalensis; ở Ấn Độ, Bangladesh và Pakistan là L rufescens Một loài ốc tương tự, L ollula, là vật chủ trung gian của F gigantica ở Nhật Bản và

Hawaii (Alicata, 1938) [36]

Trong nghiên cứu phòng thí nghiệm, Boray (1985) [37] đã gây nhiễm

thành công F gigantica ở ốc L stagnalis mới nở.

Một nghiên cứu hình thái tỷ mỉ và chính xác đã được thực hiện để phân

biệt 2 loài F hepatica và F gigantica, Dreyfuss G., (1997) [40]: (1) xem xét

vùng phân bố địa lý của ốc Lymnae; (2) chỉ sử dụng sán ở cùng một vật chủ;(3) để tránh sai số kỹ thuật, sán được cố định, nhuộm và gắn tiêu bản bằngcùng một phương pháp, trứng được xem tươi; (4) sử dụng hệ thống phân tíchhình ảnh qua máy tính (CIAS) để có các số đo 2 chiều, 3 chiều và cung cấp các

tỷ lệ có ý nghĩa cho các chỉ số

Nghiên cứu cho thấy, khi chỉ xem xét đặc điểm hình thái, mà khôngchú ý đến sự tương quan giữa các số đo kích thước của sán trưởng thành thì

có thể không phân biệt được 2 loài Từ kết quả phân tích tương quan, giá trị

cực đại của đa số các cơ quan liên quan đến chiều dài cơ thể (BL) ở F gigantica thường lớn hơn rất nhiều so với F hepatica Ngược lại, F hepatica có các số đo

cực đại liên quan đến chiều rộng cơ thể (BW) Những giá trị cực đại này cho

thấy, đặc điểm đặc trưng của F gigantica là phát triển theo chiều dài hơn so với F hepatica Mặc dù kích thước từ mút trước cơ thể đến giác bụng dường

như không khác nhau nhiều giữa 2 loài, song nghiên cứu tương quan cho thấy đặc

điểm hình thái khác nhau cho phép phân biệt 2 loài F hepatica và F gigantica ở

trong cùng một vật chủ Nghiên cứu về tỷ lệ phát triển cho thấy, chỉ có tỷ lệchiều dài/ chiều rộng (BL/ BW) là giá trị chính xác để phân biệt 2 loài(Soulsby (1982) [51]; Dreyfuss G., (1997) [40]

Ở Gilan, Iran, cả 2 loài F hepatica và F gigantica cùng tồn tại ở trâu

và bò; Dreyfuss G., (1997) [40])

Một câu hỏi đặt ra là, liệu có tồn tại 2 loài F hepatica và F gigantica

không? Đa số các nhà phân loại học mô tả dựa trên quan niệm về loài theoLinnaeus và duy trì cho đến ngày nay Thậm chí, các phương pháp và kỹ thuật

mới có giá trị phân loại Fasciola cũng đã được sử dụng , Mas-Coma và cs

(1995) [47], Mas-Coma và cs (2005) [48]

Như vậy, phân loại sán lá Fasciola chủ yếu dựa trên hình thái sán trưởng

thành, kích thước trứng, vật chủ chính, vật chủ trung gian và phân bố địa lý Vềhình thái sán trưởng thành, các chỉ số tương quan và sự khác biệt về tỷ lệ chiều

dài/ chiều rộng (BL/ BW) có thể giúp phân biệt 2 loài F hepatica và F gigantica

(Periago et al, 2006), Gomes D L (1985) [41], Jorgen Hansen và cs 1994 [44]

Về vật chủ chính, F hepatica và F gigantica có chung nhiều loài vật

chủ ăn cỏ và ăn tạp (Grigoryan G A (1958) [42]; Reid (1973) [49]; Rushton

B (1977) [50]; Mas-Coma và cs (1995) [47] Tính mẫn cảm và đặc điểm bệnh

lý do sán lá gan gây ra khác nhau đáng kể ở các vật chủ khác nhau (Das P M

1987 [38]; Nghiên cứu về Enzyme cho thấy, F hepatica và F gigantica khác

nhau, Rushton B., (1977) [50] Sự khác biệt giữa 2 loài chỉ có 5 vị trí khácnhau ở ITS-1 và 5 vị trí khác nhau ở ITS-2 (Mas-Coma và cs (2005) [48] Có

nhiều bằng chứng cho thấy, F hepatica có liên quan với nhóm Galba nguồn gốc từ Bắc cực, Trung và Nam Mỹ với G truncatula là vật chủ trung gian Ngược lại, F gigantica dường như liên quan đến nhóm ốc Radix, chủ yếu là loài R natalensis ở châu Phi và loài R auricularia ở Palaearctic, Dinnik và cs

(1963) [39] Sự chuyên biệt về ốc vật chủ trung gian này giải thích sự phân bố

địa lý của 2 loài sán lá gan Trái lại, F hepatica có thể lan rộng từ châu Âu đến tất cả 5 lục địa, F gigantica chỉ giới hạn ở châu Phi và châu Á (kể cả Hawaii) Yêu cầu sinh thái của ốc cũng giải thích tại sao F hepatica lại phổ

biến ở vùng ôn đới và như vậy phổ biến ở châu Âu, Mỹ và châu Đại dương,

trong khi F gigantica thích nghi ở vùng nhiệt đới và ẩm ở châu Phi và châu Á.

Tóm lại, những bằng chứng trên cho thấy tính đặc hiệu của 2 loài

F hepatica và F gigantica, chúng tách biệt thành 2 loài khác nhau Tuy nhiên,

sự lai giữa 2 loài ở châu Phi và châu Á, một quy luật chung khi có sự tiếp xúcgiữa 2 loài ở trong cùng một vật chủ Chúng sẽ duy trì khả năng lai chéo vì thờigian chỉ là vài nghìn năm từ khi tách biệt từ tổ tiên chung, chưa đủ để có bộgen hoàn toàn khác biệt

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU

2.1 Đối tượng, thời gian, địa điểm nghiên cứu

* Đối tượng nghiên cứu

- Trâu, bò các lứa tuổi nuôi tại nông hộ, trang trại gia đình ở các huyệnChợ Mới, Bạch Thông, Ngân Sơn - tỉnh Bắc Kạn

- Bệnh sán lá gan ở trâu, bò

* Thời gian nghiên cứu: Từ tháng 7 năm 2011 - tháng 7 năm 2012.

* Địa điểm nghiên cứu:

- Địa phương triển khai đề tài:

Đề tài được thực hiện trên địa bàn các huyện Chợ Mới, Bạch Thông,Ngân Sơn của tỉnh Bắc Kạn

- Địa điểm xét nghiệm mẫu:

+ Khoa Chăn nuôi thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên + Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật

* Vật liệu nghiên cứu:

- Mẫu phân trâu, bò;

- Mẫu đất bề mặt, mẫu nước chỗ trũng trên bãi chăn thả trâu, bò;

- Mẫu cỏ thuỷ sinh ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò;

- Mẫu ốc thu thập từ các ao, ruộng, suối trong khu vực chăn thả trâu, bò;

- Kính hiển vi quang học, kính lúp, máy ly tâm, buồng đếm Mc.Master, hóa chất và các dụng cụ thí nghiệm khác;

- Thuốc tẩy sán lá gan cho trâu, bò: Han-Dertil B, Nitroxinil - 25%,Bio-Alben

2.2 Nội dung nghiên cứu

2.2.1 Thực trạng chăn nuôi trâu, bò, công tác phòng chống bệnh ký sinh trùng nói chung và bệnh sán lá gan nói riêng ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn

- Thực trạng chăn nuôi trâu, bò ở 3 huyện thuộc tỉnh Bắc Kạn

- Thực trạng công tác phòng chống bệnh ký sinh trùng nói chung vàbệnh sán lá gan nói riêng

2.2.2 Xác định loài sán lá gan ký sinh ở trâu, bò ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn

2.2.3 Đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá gan trâu, bò ở Bắc Kạn

2.2.3.1 Tình hình nhiễm sán lá gan ở trâu và bò

- Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan ở trâu, bò tại 3 huyện

- Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tuổi trâu, bò

- Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo mùa vụ

- Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tính biệt trâu, bò

2.2.3.2 Nghiên cứu sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở ngoại cảnh và tỷ lệ nhiễm

ấu trùng sán lá gan trong ký chủ trung gian

- Sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở bãi chăn thả

- Xác định loài ốc nước ngọt - ký chủ trung gian của sán lá gan Fasciola spp

- Tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan ở ốc nước ngọt

- Tỷ lệ mẫu cỏ thủy sinh nhiễm Adolescaria.

2.2.4 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh sán lá gan cho trâu, bò ở 3 huyện, tỉnh Bắc Kạn

2.2.4.1 Xác định thuốc tẩy sán lá gan có hiệu lực cao và an toàn

- Xác định lại tác dụng của một số thuốc tẩy sán lá gan đã sử dụngtrong nhiều năm qua (Dertil, Fasciolid…)

- Thử nghiệm hiệu lực và độ an toàn của thuốc (Bio -Alben)

+ Thử nghiệm trên trâu, bò thí nghiệm

+ Thử nghiệm trên trâu, bò ở thực địa.

2.2.4.2 Đề xuất quy trình phòng trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò tại Bắc Kạn phù hợp và hiệu quả

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.3.1 Phương pháp điều tra tình hình chăn nuôi và phòng chống bệnh ký sinh trùng nói chung, bệnh sán lá gan nói riêng cho trâu, bò ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn

- Trực tiếp quan sát

- Kết hợp phỏng vấn và phát phiếu điều tra

2.3.2 Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá gan trâu, bò ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn

2.3.2.1 Quy định những yếu tố cần xác định liên quan đến tình hình nhiễm sán lá gan trâu, bò

* Tuổi trâu, bò được phân ra theo 4 lứa tuổi

+ Dưới 2 năm tuổi

+ 2 - 5 năm tuổi

+ 5 - 8 năm tuổi

+ Trên 8 năm tuổi

* Mùa vụ: Mùa vụ trong năm được theo dõi gồm 4 mùa

- Xu©n : Tõ th¸ng 2 - th¸ng 4;

- HÌ : Tõ th¸ng 5 - th¸ng 7;

- Thu : Tõ th¸ng 8 - th¸ng 10;

- §«ng : Tõ th¸ng 11 - th¸ng 1 n¨m sau

2.3.2.2 Sơ đồ bố trí thu thập mẫu

- Bố trí thu thập mẫu theo phương pháp lấy mẫu chùm nhiều bậc Chọn

3 huyện đại diện cho các vùng sinh thái của tỉnh Bắc Kạn Mỗi huyện chọn 5

xã đại diện cho huyện để lấy mẫu

Bố trí thu thập mẫu theo sơ đồ sau:

Loại mẫu Số lượng

mẫu

Số huyện

Số xó/ huyện

Mẫu đất bề mặt, bói chăn thả trõu, bũ 731 3 5

Mẫu cỏ thuỷ sinh trong khu vực chăn thả 1.048 3 5

Mẫu ốc nước ngọt ở khu vực chăn thả trõu,

Mẫu được thu thập ngẫu nhiờn tại cỏc nụng hộ, trang trại chăn nuụi trõu,

bũ gia đỡnh, cỏc bói chăn thả trõu, bũ của 3 huyện thuộc tỉnh Bắc Kạn

2.3.2.3 Phương phỏp xỏc định tỷ lệ và cường độ nhiễm sỏn lỏ gan

* Phương phỏp thu thập mẫu phõn trõu, bũ

- Thu nhập mẫu phõn ngẫu nhiờn ở trõu, bũ nuụi nụng hộ, trang trại giađỡnh Lấy phõn trực tiếp từ trực tràng con vật Để riờng mỗi mẫu vào một tỳinilon nhỏ và mỗi tỳi đều cú nhón ghi: Loại gia sỳc (trõu, bũ), địa điểm, tuổi,trạng thỏi phõn, thời gian lấy mẫu và cỏc biểu hiện lõm sàng của trõu, bũ.Ngoài ra căn cứ vào những yếu tố cần xỏc định cú liờn quan đến đặc điểmdịch tễ để lấy mẫu cho tương đối đồng đều về cỏc yếu tố khỏc

- Các loại mẫu đợc xét nghiệm ngay trong ngày hoặc xét nghiệm saukhi bảo quản theo quy trình bảo quản mẫu trong nghiên cứu ký sinh trùng học

* Phương phỏp xỏc định tỷ lệ nhiễm sỏn lỏ gan

Xỏc định bằng phương phỏp lắng cặn Benedek (1943): Cho từng mẫuphõn vào cốc thủy tinh, thờm 5 - 10 lần nước, khuấy tan, lọc qua lưới lọc bỏcặn bó thụ Nước lọc được để yờn 15 - 20 phỳt cho lắng xuống, gạn nước trờn

đi, lại cho nước vào, rửa đi rửa lại nhiều lần cho đến khi nước trong suốt, chocặn vào phiến kớnh, soi kớnh hiển vi để tỡm trứng sỏn lỏ gan Những mẫu phõntỡm thấy trứng sỏn lỏ gan được xỏc định là cú nhiễm, ngược lại là khụng nhiễm

* Phương pháp xác định cường độ nhiễm sán lá gan

Xác định cường độ nhiễm sán lá gan bằng phương pháp đếm trứng Mc.Master (đếm số trứng/ gam phân trên buồng đếm Mc Master theo tài liệu củaJorgen Hansen và cs, 1994)

Cường độ nhiễm sán lá gan được quy định như sau:

+ Cường độ nhiễm nhẹ:  200 trứng/ g phân

+ Cường độ nhiễm trung bình: > 200 – 500 trứng/ g phân

+ Cường độ nhiễm nặng: > 500 trứng/ g phân

2.3.3 Phương pháp nghiên cứu trứng sán lá gan ở ngoại cảnh và ấu trùng trong ký chủ trung gian

2.3.3.1 Phương pháp nghiên cứu sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở khu vực bãi chăn thả.

* Phương pháp thu thập mẫu ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò

- Mẫu đất bề mặt ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò: Tại mỗi khu vực chănthả, cứ khoảng 20 – 30 m2 lấy ngẫu nhiên ở vị trí 4 góc và ở giữa, trộn đềuđược một mẫu xét nghiệm khối lượng khoảng 80 – 100g/ mẫu Mỗi mẫu được

để riêng trong túi nilon có nhãn ghi địa điểm và thời gian lấy mẫu

Mẫu nước ở những chỗ trũng trên khu vực bãi chăn thả: Dùng quekhuấy đều nước, lấy cốc thủy tinh múc khoảng 400 - 500 ml/ vũng, mỗi mẫu

để riêng trong một túi nilon có nhãn ghi địa điểm và thời gian lấy mẫu

* Phương pháp xét nghiệm mẫu

Xét nghiệm mẫu bằng phương pháp lắng cặn để phát hiện trứngsán lá gan

2.3.3.2 Phương pháp xác định loài ốc nước ngọt – ký chủ trung gian của sán

lá gan Fasciola

Thu thập mẫu ốc (ốc không có nắp miệng): Bắt ốc ở ruộng lúa, mươngnước, ao, ao rau muống, các khe nước nhỏ, vũng nước nhỏ trong khu vực chăn

thả trâu, bò Ốc thu được để trong hộp nhựa chứa nước và các cây cỏ thuỷ sinhtại nơi bắt ốc, có nhãn ghi địa điểm và thời gian thu thập mẫu

* Định loại theo khóa định loại của Đặng Ngọc Thanh và cs (1980)[22]

2.3.3.3 Phương pháp xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan của ốc nước ngọt

Ép nát ốc Lymnaea giữa hai phiến kính, gạt cặn bã sang một đầu

phiến kính, kiểm tra dưới kính hiển vi độ phóng đại 100 lần để tìm ấutrùng sán lá gan

2.3.3.4 Phương pháp xác định tỷ lệ mẫu cỏ thủy sinh nhiễm Adolescaria

Thu thập các mẫu cỏ thủy sinh ở khu vực chăn thả trâu, bò Rửa kỹtừng mẫu cỏ thủy sinh vào chậu nước, để lắng cặn, gạn bỏ phần nước trong,

lấy phần cặn ở đáy kiểm tra dưới kính lúp để tìm Adolescaria của sán lá gan

2.3.4 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh sán lá gan cho trâu, bò ở tỉnh Bắc Kạn

2.3.4.1 Xác định thuốc tẩy sán lá gan có hiệu lực cao

* Xác định lại tác dụng của một số thuốc tẩy sán lá gan đã sử dụng trong nhiều năm qua

Sau khi xét nghiệm phân, phát hiện được những trâu, bò bị nhiễm sán

lá gan, chúng tôi dùng một số thuốc tẩy sán lá gan đã được sử dụng trongnhiều năm qua để tẩy cho trâu, bò nhiễm sán (Han-Dertil B, Nitroxinil-25%)

Trước khi dùng thuốc, xác định cường độ nhiễm sán lá gan bằng cáchđếm số trứng/ gam phân Sau khi dùng thuốc 15 ngày, xác định hiệu lực thuốcbằng phương pháp xét nghiệm lại phân trâu, bò tìm trứng sán và đếm sốlượng trứng sán/ gam phân

Từ đó xác định được hiệu lực tẩy của thuốc còn tốt hay không

* Thử nghiệm hiệu lực và độ an toàn của thuốc Bio-Alben

Chúng tôi đã thử nghiệm thuốc Bio-Alben - một loại thuốc mới để tẩysán lá gan cho trâu, bò

Thử nghiệm được tiến hành trên trâu, bò thí nghiệm, sau đó tiến hànhtrên trâu, bò ở một số địa phương của tỉnh Bắc Kạn.

Trước khi dùng thuốc, xác định cường độ nhiễm bằng cách đếm sốtrứng/gam phân Sau khi dùng thuốc 15 ngày, xác định hiệu lực thuốc bằngphương pháp xét nghiệm lại phân trâu, bò tìm trứng sán và đếm trứngsán/gam phân

Theo dõi một số chỉ tiêu sinh lý (nhịp thở, thân nhiệt, nhu động dạ cỏ )trước và sau dùng thuốc để xác định độ an toàn của thuốc

2.3.4.2 Thử nghiệm biện pháp phòng trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò tại 3 huyện thuộc tỉnh Bắc Kạn

- Lựa chọn và thử nghiệm một số biện pháp phòng chống phù hợp vớiđiều kiện chăn nuôi trâu, bò ở Bắc Kạn

- Theo dõi kết quả nhiễm sán lá gan sau 3 tháng thử nghiệm (so sánh lôthí nghiệm và lô đối chứng)

- Đề xuất quy trình phòng chống bệnh sán lá gan cho trâu, bò có hiệuquả cao và phù hợp, có tính khả thi khi áp dụng ở tỉnh Bắc Kạn

2.4 Phương pháp xử lý số liệu

Số liệu thu được được xử lý bằng phương pháp thống kê sinh học (theotài liệu của Nguyễn Văn Thiện (2008) [26]), trên phần mềm Excel 2003 vàphần mềm Minitab 14

CHƯƠNG 3

DỰ KIẾN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

3.1 Điều tra thực trạng chăn nuôi và phòng chống bệnh giun, sán cho trâu, bò ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn

Bảng 3.1 Thực trạng chăn nuôi và phòng chống bệnh ký sinh trùng cho

trâu, bò ở 3 huyện của tỉnh Bắc Kạn

Biện pháp sử dụng

Số hộ điề u tra

Số hộ áp dụn g

Tỷ lệ (%)

Số hộ điề u tra

Số hộ áp dụn g

Tỷ lệ (%)

Số hộ điề u tra

Số hộ áp dụn g

Tỷ lệ (%)

Chăn thả hoàn toàn tự nhiên 203 183 90,1

5 247 211 85,43 235 211 89,79 Bán chăn thả (có cho

ăn tại chuồng) 203 20 9,85 247 36

14,5

7 235 24

10,2 1 Chuồng trại xây dựng

Vệ sinh tốt chuồng nuôi

203 56 27,59 247 99 40,08 235 43 18,30Thu gom phân ủ

6 247 56

22,6

7 235 37

15,7 4Kết quả bảng 3.1 cho thấy:

- Về phương thức chăn thả: Điều tra 203 hộ tại huyện Chợ Mới có

183 hộ chăn thả hoàn toàn tự nhiên, chiếm tỷ lệ 90,15%; 20 hộ áp dụngbiện pháp bán chăn thả, chiếm tỷ lệ 9,85% Trong 247 hộ tại huyện Bạch