Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ và xác định type vi rút gây bệnh lở mồm long móng ở trâu, bò tại tỉnh Lai Châu

ĐẠI HỌC THÁI NGYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM PHẠM ANH HÙNG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ VÀ XÁC ĐỊNH TYPE VI RÖT GÂY BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ở TRÂU, BÕ TẠI TỈNH LAI CHÂU Chuyên ngành: Thú y Mã số: 62 62 50 LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học : TS. Nguyễn Văn Quang Thái Nguyên, năm 2012 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng: - Các kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực, khách quan và chưa được sử dụng để bảo vệ một học vị nào. - Mọi sự giúp đỡ trong quá trình thực hiện nghiên cứu và viết luận văn đã được cảm ơn. Tất cả các thông tin trích dẫn trong luận văn đã được ghi rõ nguồn gốc. Lai Châu, ngày 20 tháng 9 năm 2012 Tác giả Phạm Anh Hùng ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn sự giúp đỡ quý báu của Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Phòng Quản lý Đào tạo Sau đại học, Khoa Chăn nuôi - Thú y đã tổ chức và tạo điều kiện cho tôi tham dự khóa học Cao học Thú y K18, đồng thời giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và hoàn thành luận văn. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới các thầy, các cô và các giảng viên của Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên đã tận tình giảng dạy, giúp đỡ tôi trong thời gian học tập tại trường, đặc biệt là sự hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của Tiến sỹ Nguyễn Văn Quang, Phó Giáo sư - Tiến sỹ Nguyễn Thị Kim Lan trong suốt quá trình nghiên cứu, thực hiện đề tài và hoàn thành luận văn này. Cuối cùng tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban lãnh đạo, tập thể cán bộ, nhân viên của Cục Thú y, Viện Thú y, Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ương, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Chi cục Thú y tỉnh Lai Châu, Hội Nông dân tỉnh Lai Châu đã tạo điều kiện cho tôi triển khai và thực hiện nghiên cứu hoàn thành tốt đề tài. Một lần nữa, tôi xin ghi nhớ và bày tỏ lòng biết ơn tới tất cả những giúp đỡ quý báu và nhiệt tình của các thày cô, gia đình, bạn bè, đồng nghiệp. Lai Châu, ngày 20 tháng 9 năm 2012 Tác giả Phạm Anh Hùng iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU i 1. Đặt vấn đề 1 2. Mục tiêu nghiên cứu của đề tài 3 3. Ý nghĩa khoa học của đề tài 3 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 1.1. Lịch sử phát hiện bệnh 4 1.1.1. Tên gọi 4 1.1.2. Khái niệm 4 1.1.3. Lịch sử phát hiện bệnh 4 1.1.4. Bệnh LMLM trên thế giới 6 1.1.5. Bệnh LMLM ở Việt Nam 11 1.2. Vi rút LMLM 16 1.2.1. Hình thái và cấu trúc 17 1.2.2. Đặc tính di truyền, cấu trúc gen, kháng nguyên 17 1.2.3. Đặc tính kháng nguyên 20 1.2.4. Các điểm quyết định kháng nguyên 21 1.2.5. Tiến hóa của vi rút LMLM 21 1.2.6. Đặc tính gây nhiễm trong phòng thí nghiệm 22 1.2.7. Đặc tính nuôi cấy tổ chức tế bào 23 1.3. Một số đặc điểm dịch tễ học của vi rút LMLM 24 1.3.1. Nguồn dịch 24 1.3.2. Động vật cảm thụ 25 1.3.3. Đường xâm nhập 26 1.3.4. Cơ chế sinh bệnh 26 1.3.5. Chất chứa vi rút 27 1.3.6. Con đường và phương thức truyền lây 28 1.3.7. Lứa tuổi mắc bệnh 30 1.3.8. Tỷ lệ ốm và chết 30 1.4. Miễn dịch trong bệnh LMLM 30 1.5. Triệu chứng và bệnh tích ở trâu, bò 32 iv 1.5.1. Triệu chứng 32 1.5.2. Bệnh tích 35 1.6. Chẩn đoán 35 1.6.1. Chẩn đoán lâm sàng 35 1.6.2. Chẩn đoán phòng thí nghiệm 36 1.7. Phòng bệnh LMLM 40 1.7.1. Vệ sinh phòng dịch 40 1.7.2. Vắc xin phòng bệnh 41 Chƣơng 2: NỘI DUNG, VẬT LIỆU, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 44 2.1. Đối tượng, thời gian và địa điểm nghiên cứu 44 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu 44 2.1.2. Thời gian, địa điểm nghiên cứu 44 2.2. Nội dung nghiên cứu 44 2.2.1. Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ học về bệnh LMLM ở trâu, bò tại tỉnh Lai Châu giai đoạn 2006 - 2011. 44 2.2.2. Xác định tỷ lệ dương tính huyết thanh học đối với các chủng vi rút chủ yếu (O, A, Asia1), đánh giá tỷ lệ mang trùng ở trâu, bò. 44 2.2.3. Định type vi rút gây bệnh LMLM ở trâu, bò tại tỉnh Lai Châu. 44 2.2.4. Xác định loại vắc xin LMLM phù hợp tiêm cho đàn trâu, bò tại tỉnh Lai Châu. 44 2.3. Vật liệu nghiên cứu 44 2.3.1. Mẫu bệnh phẩm 44 2.3.2. Tài liệu, số liệu 45 2.3.3. Sinh phẩm và Kit xét nghiệm 45 2.3.4. Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 45 2.4. Phương pháp nghiên cứu 46 2.4.1. Phương pháp lấy mẫu máu 46 2.4.2. Phương pháp lấy mẫu biểu mô 46 2.4.3. Phương pháp 3ABC - ELISA phát hiện kháng thể nhiễm tự nhiên 46 2.4.4. Thiết kế thí nghiệm xác định tình hình nhiễm vi rút tự nhiên 47 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 49 3.1. Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh LMLM tỉnh Lai Châu giai đoạn 2006 - 2011 49 v 3.1.1. Tình hình dịch LMLM tỉnh Lai Châu từ 2006 đến 2011 49 3.1.2. Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM ở tỉnh Lai Châu từ năm 2006 - 2011 51 3.1.3. Thời gian lưu hành bệnh LMLM ở trâu, bò tại tỉnh Lai Châu: 53 3.1.4. Lứa tuổi mắc bệnh 56 3.1.5. Tỷ lệ trâu, bò chết do mắc bệnh LMLM trong các ổ dịch 59 3.2. Xác định tỷ lệ dương tính huyết thanh học đối với kháng nguyên phi cấu trúc 3ABC, đánh giá tỷ lệ mang trùng do nhiễm vi rút tự nhiên ở trâu, bò 62 3.2.1. Tỷ lệ dương tính huyết thanh 3ABC tỉnh Lai Châu từ năm 2006 - 2012 62 3.2.2. Tỷ lệ dương tính huyết thanh 3ABC tại một huyện 63 3.2.3. Diễn biến tỷ lệ nhiễm vi rút tự nhiên tại một điểm 65 3.3. Định type vi rút gây bệnh LMLM ở trâu, bò tỉnh Lai Châu 66 3.4. Xác định loại vắc xin phòng bệnh LMLM phù hợp cho trâu, bò trên địa bàn tỉnh Lai Châu 66 3.5. Bản đồ Dịch tễ bệnh LMLM ở trâu, bò tỉnh Lai Châu giai đoạn 2006- 2011 67 KẾT LUẬN 1 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AND : Acid Deoxyribonucleic ARN : Acid ribonucleic ELISA : Enzyme Linked Immunosorbent Assay FMD : Foot and Mouth Disease LMLM : Lở mồm long móng LPB : Liquid Phase Blocking OIE : Tổ chức Thú y Thế giới PBS : Phosphate Buffered Saline PCR : Polymerase Chain Reaction RT : Reverse Transciption vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1. Tổng hợp số ổ dịch LMLM ở các huyện của tỉnh Lai Châu (2006- 2011) 49 Bảng 3.2a: Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM qua các năm (tách riêng trâu và bò) 51 Bảng 3.2b: Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM theo năm (tính chung trâu, bò) 52 Bảng 3.3a. Số ca bệnh LMLM ở trâu qua các năm theo mùa (2006 - 2011). 53 Bảng 3.3b. Số ca bệnh LMLM ở bò qua các năm theo mùa (2006-2011). 54 Bảng 3.3c. Số ca bệnh LMLM ở trâu, bò theo mùa (tính chung trâu, bò) 54 Bảng 3.3d. Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM qua các năm theo mùa (2006 - 2011) 54 Bảng 3.4a: Tỷ lệ trâu mắc bệnh LMLM theo lứa tuổi 56 Bảng 3.4b: Tỷ lệ bò mắc bệnh LMLM theo lứa tuổi 57 Bảng 3.4c: Tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM theo lứa tuổi (tính chung trâu, bò) 57 Bảng 3.5: Tỷ lệ trâu, bò chết do mắc bệnh LMLM theo tuổi (2006 - 2011) 59 Bảng 3.6: Tỷ lệ trâu, bò chết do bệnh LMLM theo mùa (2006 - 2011) 60 Bảng 3.7: Tỷ lệ trâu, bò chết do bệnh LMLM theo năm 61 Bảng 3.8: Tỷ lệ dương tính huyết thanh học 3ABC ở trâu, bò tỉnh Lai Châu (2006 - 2012) 62 Bảng 3.9. Tỷ lệ dương tính huyết thanh học 3ABC ở trâu, bò năm 2012 63 Bảng 3.10. Tỷ lệ dương tính ABC - ELISA ở trâu bò tại một huyện (Tam Đường) 64 Bảng 3.12. Tổng hợp kết quả xét nghiệm mẫu biểu mô từ trâu, bò (2006 - 2011) 66 viii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1. Bản đồ dịch tễ bệnh LMLM trên thế giới năm 2009 10 Hình 1.2. Cấu trúc của virion vi rút LMLM type O1BFS [38] 16 Hình 1.3. Sơ đồ hệ gen của vi rút LMLM [38] 18 Hình 1.4. Triệu chứng và bệnh tích ở miệng bò bị bệnh LMLM [54] 33 Hình 1.5. Bệnh tích ở miệng và lưỡi bò bị bệnh LMLM [53] 33 Hình 1.6. Bệnh tích ở vú bò bị bệnh LMLM [52] 34 Hình 3.1. Đồ thị số ổ dịch biến động theo thời gian (năm) 50 Hình 3.2. Đồ thị tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM theo năm 52 Hình 3.3. Đồ thị trâu, bò mắc bệnh LMLM theo mùa 55 Hình 3.4. Đồ thị tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh theo lứa tuổi 58 Hình 3.5. Đồ thị tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM chết theo lứa tuổi 59 Hình 3.6. Đồ thị tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM chết theo mùa 60 Hình 3.7. Đồ thị tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh LMLM chết theo năm 61 Hình 3.8. Bản đồ dịch tễ bệnh LMLM tỉnh Lai Châu giai đoạn 2006 - 2011 1 MỞ ĐẦU 1. Đặt vấn đề Bệnh Lở mồm long móng (LMLM) là một bệnh truyền nhiễm cấp tính, lây lan rất nhanh, rất mạnh gây thiệt hại nặng nề đối với động vật dễ nhiễm thuộc loài móng guốc chẵn như: Trâu, bò, dê, lợn Bệnh đã được tổ chức Dịch tễ thế giới (OIE) xếp đầu bảng A (bảng các bệnh truyền nhiễm nguy hiểm của động vật) và bắt buộc các nước thành viên phải khai báo. Bệnh do vi rút LMLM thuộc họ Picornaviridae, giống Aphthovirus gây ra, có 2 đặc tính đặc biệt liên quan đến dịch tễ học, đó là tính đa type và tính dễ biến đổi kháng nguyên. Các type vi rút tuy gây ra các triệu chứng giống nhau, nhưng lại không gây miễn dịch chéo với nhau. Bệnh LMLM là một bệnh của xã hội, bởi vì nó ảnh hưởng đến lợi ích chung của cộng đồng nhiều hơn là riêng lẻ từng hộ chăn nuôi. Bệnh có thể lây lan trong phạm vi một nước hoặc nhiều nước và trở thành đại dịch. Trong những năm gần đây, sự phát triển kinh tế thị trường đã thúc đẩy quá trình giao lưu, buôn bán động vật và sản phẩm động vật giữa các tỉnh trong nước và với nước ngoài như Trung Quốc, Lào, Cam Pu Chia Từ đó bệnh LMLM ở trâu, bò càng diễn biến phức tạp, gây ảnh hưởng lớn đến kinh tế - xã hội ở nước ta. Trên thực tế, việc khống chế và thanh toán bệnh LMLM đã gặp không ít khó khăn, từ việc kiểm dịch vận chuyển cho đến chăn nuôi thiếu qui hoạch, trâu bò thả rông Tiêm phòng vắc xin được xác định là giải pháp quan trọng, tuy nhiên việc chọn vắc xin phù hợp cho từng vùng, từng tỉnh đòi hỏi cần phải nghiên cứu kỹ type vi rút gây bệnh trên thực địa để tránh trường hợp tiêm phòng loại vắc xin không phù hợp, gây lãng phí và thiệt hại cho người chăn nuôi. Tỉnh Lai Châu có diện tích tương đối rộng, với 273 km đường biên giới Việt - Trung, địa hình chia cắt phức tạp, thời tiết khí hậu diễn biến phức tạp. Hàng năm dịch LMLM gia súc vẫn tái phát trên địa bàn tỉnh làm hàng ngàn [...]... của dịch LMLM ở tỉnh Lai Châu đòi hỏi phải có những nghiên cứu về sự phân bố và lưu hành vi rút LMLM, từ đó có cơ sở khoa học để lựa chọn vắc xin phù hợp, góp phần nâng cao hiệu quả phòng chống bệnh LMLM trên địa bàn tỉnh Để giải quyết vấn đó, chúng tôi triển khai đề tài: Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ và xác định type vi rút gây bệnh LMLM trên đàn trâu, bò tại tỉnh Lai Châu" 2 Mục tiêu nghiên cứu. .. của đề tài Xác định sự phân bố của các type vi rút LMLM tại tỉnh Lai Châu, làm cơ sở lựa chọn loại vắc xin phù hợp, góp phần nâng cao hiệu quả phòng chống bệnh LMLM cho gia súc 3 Ý nghĩa khoa học của đề tài - Luận văn là công trình đầu tiên nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ và xác định type vi rút gây bệnh LMLM trên đàn trâu, bò tại tỉnh Lai Châu - Các kết quả điều tra, nghiên cứu tại tỉnh Lai Châu sẽ cung... Năm 2001, bệnh xảy ra ở 16 tỉnh thành với 3.976 trâu, bò mắc bệnh [4] Năm 2002, bệnh xảy ra ở 26 tỉnh thành với 10.287 trâu, bò mắc bệnh [4] Năm 2003, 38 tỉnh thành có dịch, trong đó 28 tỉnh thành có dịch ở trâu, bò và 28 tỉnh có dịch ở lợn, với tổng số 20.303 trâu, bò; 1.178 dê và 3.533 lợn mắc bệnh, chủ yếu ở các tỉnh: Quảng Trị, Phú Yên, Khánh Hoà, Gia Lai, Hà Giang [9] Năm 2004, số tỉnh có dịch LMLM... ở Châu Á, dịch đã có mặt tại 11 nước và hầu hết các ổ dịch cũng do vi rút type Asia 1 Ở Châu Phi, dịch LMLM gây thiệt hại ở nhiều nước, đặc biệt là Kenia và Ethiopia (1984-1985) Vi rút type C là căn bệnh chính của những ổ dịch ở 2 nước này Tại các nước còn lại của châu lục này, bệnh LMLM đều do vi rút thuộc 3 type SAT gây ra [6] 7 Năm 1989, theo thông báo của OIE, dịch LMLM đã xảy ra ở 53 nước ở khắp... dịch LMLM do vi rút type O và Asia 1 xảy ra ở Pakistan và Myanmar; type O và A tại Nepal, Buhtan; type A ở Thái Lan Tại Malaysia, không công bố dịch từ năm 1998, nhưng trong thực tế 2 type vi rút O và Asia 1 vẫn lưu hành tại bán đảo Malay này (không gửi bệnh phẩm đến WRL) Hai ổ dịch địa phương tại Đài Loan và Philippines (đảo Luzon) đều do vi rút type O gây ra Tại Trung Quốc, dịch tại xảy ra tại Vân Nam... Châu sẽ cung cấp, bổ sung và hoàn thiện thêm các thông tin về dịch tễ học bệnh LMLM tại vi t Nam - Các kết quả nghiên cứu về một số đặc điểm dịch tễ học, xác định sự phân bố của các type vi rút LMLM gây bệnh trên trâu, bò tại tỉnh Lai Châu là cơ sở khoa học, giúp các cơ quan chức năng lựa chọn loại vắc xin LMLM phù hợp Từ đó có biện pháp quản lý, chỉ đạo công tác phòng chống dịch bệnh hiệu quả 4 Chƣơng... trâu bò và 172 xã, 71 huyện thuộc 26 tỉnh có dịch LMLM trên lợn với tổng số 11.355 trâu, bò và 12.386 lợn mắc bệnh Số phải xử lý tiêu huỷ và chết là 3.765 trâu, bò và 11.122 lợn Type virus lưu hành chủ yếu là type O, type A chỉ có ở Phú Yên và type Asia1 có ở Quảng Trị và Thanh Hoá [3] Năm 2008, dịch có giảm so với các năm trước, có 122 xã của 43 huyện thuộc 14 tỉnh có dịch làm 2.408 trâu, bò và 67... Iran và Malaysia, type C giới hạn ở tiểu lục địa Ấn Độ và Philippines Theo kết quả phân tích gen vi rút gây bệnh ở phòng thí nghiệm giám định vi rút LMLM (IAH, Pirbright, UK), type O gây bệnh năm 2000 có cấu trúc gen khác với type O gây bệnh ở Đài Loan năm 1997 và khác với một số ổ dịch xảy ra gần đây trên thế giới, được đặt tên là South Asia topotype, chúng gây bệnh cho trâu, bò và lợn, phân bố rất... 160 huyện Số gia súc mắc bệnh là: 28.241 trâu, bò, 3.976 lợn và 81 dê, trong đó có 3 tỉnh do virus LMLM serotype A, 13 tỉnh do virus LMLM serotype O, 3 tỉnh do cả 2 virus LMLM serotype O và A, 2 tỉnh do virus LMLM serotype Asia 1 (Lào Cai và Khánh Hoà vào tháng 10/2005) [3] Năm 2006, dịch LMLM trên trâu bò đã xảy ra tại 1410 xã của 283 huyện thuộc 47 tỉnh, số gia súc mắc bệnh là 114.015 con Dịch LMLM... ở Châu Phi (Mauritania, Senegal, Liberia, Tanzannia, Nigeria ) và Châu Á (Indonesia, Malaisia, Thái Lan ) [4], [14] Vào những năm 80, dịch LMLM có mặt ở nhiều châu lục Trong 5 năm (1981 – 1985), dịch đã xuất hiện ở khắp 80 nước Ở Châu Âu có 804 ổ dịch tại 12 quốc gia do vi rút thuộc các type O, A, và C gây ra Năm 1985, dịch LMLM do vi rút thuộc type Asia 1 xảy ra ở Hy Lạp [36] Cùng thời gian này, ở . PHẠM ANH HÙNG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ VÀ XÁC ĐỊNH TYPE VI RÖT GÂY BỆNH LỞ MỒM LONG MÓNG Ở TRÂU, BÕ TẠI TỈNH LAI CHÂU Chuyên ngành: Thú y Mã số: 62 62 50 LUẬN VĂN. tiên nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ và xác định type vi rút gây bệnh LMLM trên đàn trâu, bò tại tỉnh Lai Châu. - Các kết quả điều tra, nghiên cứu tại tỉnh Lai Châu sẽ cung cấp, bổ sung và hoàn. về dịch tễ học bệnh LMLM tại vi t Nam. - Các kết quả nghiên cứu về một số đặc điểm dịch tễ học, xác định sự phân bố của các type vi rút LMLM gây bệnh trên trâu, bò tại tỉnh Lai Châu là cơ sở