3. Ý nghĩa khoa học của đề tài
1.2.7. Đặc tính nuôi cấy tổ chức tế bào
Nhiều tác giả đã nuôi cấy vi rút LMLM trên da của thai lợn, thai bò còn sống (giữ thai sống bằng phương pháp nhân tạo) hoặc tiêm vi rút LMLM vào phúc xoang chuột nhắt con, tính kháng nguyên của vi rút không thay đổi.
Mô động vật thích hợp nhất cho sự nuôi cấy vi rút LMLM là thượng bì lưỡi bò trưởng thành. Lưỡi bò tươi, thu thập ngay sau khi giết mổ bò, bảo quản ngay trong lạnh 2 - 3OC không quá 8 ngày. Vi rút LMLM phát triển ở thượng bì gây nhiễm hình thành mụn nước; Các mảnh thượng bì lưỡi có mụn nước là vật liệu chứa vi rút được dùng để tiếp đời hoặc thu vi rút chế vắc xin. Vi rút LMLM có thể giữ nguyên độc lực sau khi tiếp đời vi rút trên mô thượng bì lưỡi bò sau vài chục lần, phương pháp thường được dùng để nhân vi rút chế vắc xin vô hoạt.
Môi trường tế bào tốt nhất là lấy từ tuyến yên của bò hoặc lợn, thận bê hoặc cừu non, hoặc các dòng tế bào có độ mẫn cảm [49].
Viện Pirbright trong năm 1973 đã nuôi cấy 140 chủng vi rút LMLM, gần 120 chủng này đã sinh trưởng phù hợp trong môi trường BHK 21 [15].
Chế kháng nguyên: Dùng chuột lang từ 2 - 7 ngày tuổi để gây bệnh, sau
24 giờ có thủy thũng hoặc mọc mụn nước. Thu dịch thủy thũng hoặc mụn nước cấy vào môi trường tế bào, sau 24 giờ xuất hiện bệnh tích và tế bào chết. Thu dịch (trong môi trường có chứa vi rút được giải phóng từ tế bào) để làm kháng nguyên trong phản ứng ELISA. Nếu tế bào không biến đổi hoặc chuột bị chết, phải cấy truyền hai lần liên tiếp cách nhau 48 giờ với huyễn dịch vi rút - tế bào đông tan.