Real-time PCR ứng dụng định lượng tác nhân vi sinh vật trong mẫu thử

Một phần của tài liệu Nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện và định lượng human immonodeficiency virus – 1 trong huyết tương người bằng kỹ thuật realtime pcr (Trang 26 - 27)

Có hai cách định lượng tác nhân đắch dựa vào mục đắch định lượng mà người làm thử nghiệm quan tâm

Hình 11: Biển đồ chuẩn vẽ lên đường biểu diễn chuẩn về mối

quan hệ giữa số lượng bản DNA đắch có trong các mẫu chuẩn

và chu kỳ ngưỡng tương ứng. Trong biểu đồ ở trên này, chúng

ta E2-E4-E7 là các ống phản ứng chứa các mẫu chuẩn còn B4

15

Định lượng tuyệt đối: Người làm thử nghiệm sẽ sử dụng định lượng tuyệt đối

nếu mục đắch của xét nghiệm là định lượng để biết rõ số copies của tác nhân đắch có trong mẫu thử hay trong bệnh phẩm. Vắ dụ xét nghiệm định lượng virus viêm gan B, hay viêm gan C, hay HIV trong mẫu máu của bệnh nhân để theo dõi hiệu quả điều trị đặc hiệu. Phương pháp định lượng này đòi hỏi phải biết rõ lượng (thể tắch, hay có thể là trong lượng) của mẫu thử. Để có thể thực hiện phương pháp định lượng tuyệt đối, nhà nghiên cứu hay người làm thắ nghiệm phải thực hiện xét nghiệm real-time PCR của mẫu thử cùng lúc với các mẫu chuẩn đã biết trước số lượng rồi tắnh ra số copies DNA của tác nhân đắch có trong ống[9].

Định lượng tương đối: Nếu muốn định lượng tác nhân đắch mà người làm thắ

nghiệm không thể cân đo đong đếm được mẫu thử để có được số lượng chắnh xác thì nên làm phương pháp định lượng tương đối. Vắ dụ định lượng HIV, HBV hay HCV trong các mẫu mô sinh thiết. Định lượng tương đối cũng được sử dụng trong các nghiên cứu về ung thư để định lượng một biển hiện gene nào đó, hay cũng được sử dụng trong định lượng sản phẩm biến đổi gene.

5 CHỨNG DƯƠNG, ÂM VÀ CHỨNG NỘI TẠI

Một phần của tài liệu Nghiên cứu xây dựng quy trình phát hiện và định lượng human immonodeficiency virus – 1 trong huyết tương người bằng kỹ thuật realtime pcr (Trang 26 - 27)