V phải lấy để pha masterm
S. aureus cho thấy không có tắn hiêu khuếch đại dương tắnh cho HIV1RNA mà chỉ có tắn
hiệu khuếch đại dương tắnh cho chứng nội (HIV1RNA-IC) chứng tỏ các mẫu thất sự âm
tắnh HIV1RNA. Các chuẩn định lượng cho đường khuếch đại màu đỏ.
2.5 Kết quả đánh giá khả năng chống ức chế
Kết quả làm xét nghiệm phát hiện và định lượng HIV1RNA của 4 cặp mẫu huyết tương có pha loãng HIV1RNA-C[+] và trong mỗi cặp có một mẫu có thêm chất ức chế và một mẫu không thêm chất ức chế. Kết quả biểu đồ khuếch dại được trình bày trong biểu đồ của hình 25 và kết quả định lượng được trình bày trong bảng 4.
45
Hình 25: Biểu đồ khuếch đại và biểu đồ chuẩn 4 cặp mẫu huyết tương có pha loãng HIVRNA-C[+] và trong mỗi cặp có 1 mẫu thêm chất ức chế (đường màu
đen) và 1 mẫu không thêm chất ức chế (đường màu xanh lá)
Bảng 4: Giá trị định lượng HIV1RNA trong từng cặp mẫu có và không có thêm chất
ức chế
Chất ức chế Có thêm chất ức chế Không thêm chất ức chế CV
Hemoglobin 1,642 1,672 0.9052505
BSA 22 29 13.72549
Lamivudine 1,227 1,249 0.8885299
DNA bạch cầu người0 36 42 7.6923077
Kết quả chất ức chế không ảnh hưởng lên kết quả định lượng thông qua giá trị định lượng HIV1RNA trong mẫu có thêm chất ức chế và mẫu không thêm chất ức chế là không khác biệt. Chỉ có mẫu có thêm BSA và mẫu không thêm BSA cho giá trị định lượng có CV = 13.7 (cao hơn 10%), tuy nhiên số định lượng này dưới 100 nên độ lặp lại đã được chứng minh trong phần trên là có thể tương đối thấp.
2.6 Kết quả đánh giá độ ổn định trong bảo quản
Hình 26: Kết quả biểu đồ khuếch đại và biểu đồ chuẩn của xét nghiệm phát hiện HIV1RNA trong 2
mẫu 103
và 107 copies HIV1RNA có trong 150ộl, thực hiện ngay sau khi pha.
Hình 27: Kết quả biểu đồ khuếch đại và biểu đồ chuẩn của xét nghiệm phát hiện HIV1RNA trong 2
46
Hình 28: Kết quả biểu đồ khuếch đại và biểu đồ chuẩn của xét nghiệm phát hiện HIV1RNA trong 2
mẫu 103 và 107 copies HIV1RNA có trong 150ộl, thực hiện sau 8 tháng bảo quản.
Hình 29: Kết quả biểu đồ khuếch đại và biểu đồ chuẩn của xét nghiệm phát hiện HIV1RNA trong 2
mẫu 103 và 107 copies HIV1RNA có trong 150ộl, thực hiện sau 12 tháng bảo quản.
Độ ổn định được đánh giá qua xét nghiệm phát hiện và định lượng HIV1RNA của 4 loạt mẫu huyết tương có pha HIV1RNA-C[+] ở nồng độ 103 và 107 trong 150ộl được bảo quản ở nhiệt độ -80oC và được đem ra làm xét nghiệm với cùng một bộ thử nghiệm mà các thành phần được bảo quản trong cùng một điều kiện tại các thời điểm ngay sau khi bắt đầu pha, và mỗi 4 tháng sau đó cho đến 12 tháng. Kết quả các đường biểu diễn khuếch đại và đường biểu diễn chuẩn của 4 đợt xét nghiệm được trình bày trong các hình 26, 27, 28 và 29. Số lượng copies của mỗi đợt và CV được trình bày trong bảng 5.
Bảng 5: Giá trị định lượng HIV1RNA trong 2 mẫu 103
và 107 thực hiện trong 4 lần cách nhau 4
tháng và giá trị CV
Đợt 0 Đợt 1 Đợt 2 Đợt 3 CV
833 898 880 861 2.7863362
12,270,173 15,168,135 12,377,530 14,321,509 9.2174617
Kêt quả cho thấy giá trị định lượng của 2 mẫu 103 và 107 là không thay đổi khi thử nghiệm trên cùng một qui trình xét nghiệm có các thành phần được bảo quản đúng điều kiện bảo quản của nó. Kết quả này cho phép kết luận qui trình xét nghiệm là bền trong ắt nhất 12 tháng khi bảo quản đúng điều kiện đã ghi trong các thành phần của nó.