Chương 7: Cỏc Xột nghiệm Chẩn đoỏn
Cỏc xột nghiệm phõn tử
phẩm lõm sàng như mỏu, phõn, chất tiết hụ hấp hoặc cỏc dịch cơ thể bằng phản ứng chuỗi polymerase (PCR). Một số cỏch thức tiến hành PCR do cỏc thành viờn của mạng lưới xột nghiệm WHO phỏt triển hiện sẵn cú trờn website của WHO (http://www.who.int/csr/sars/primers/en/). Hơn nữa, kit xột nghiệm RT-PCR 5’-nuclease chứa đoạn mồi và chứng dương tớnh và õm tớnh do Viện Bernhard Nocht (http://www.bni-hamburg.de/; Drosten et al.) phỏt triển hiện sẵn cú trờn thị trường (http://www.artus- biotech.de). Một chế phẩm tiờu chuẩn bất hoạt cũng sẵn cú cho cỏc mục
đớch chẩn đoỏn thụng qua Mạng lưới Âu chõu đối với cỏc Nhiễm trựng Virus Nhập nội (ENIVD; http://www.enivd.de). ENIVD cũng đang chuẩn bị một kế hoạch tiếp cận chất lượng ngoại thương quốc tế đối với cỏc thử
nghiệm SARS-CoV.
Dự đụi khi cú độ nhạy cao, cỏc xột nghiệm PCR hiện cú khụng thể loại trừ một cỏch chắc chắn sự cú mặt của virus SARS ở bệnh nhõn (Peiris, McIntosh, Poon). Mặt khỏc, sự nhiễm bẩn mẫu ở phũng xột nghiệm cú thể dẫn đến kết quả dương tớnh giả. Vỡ vậy WHO đó đưa ra những hướng dẫn nghiờm ngặt về kiểm soỏt chất lượng phũng xột nghiệm và làm xột nghiệm khẳng định (http://www.who.int/csr/sars/labmethods/en/) .
Một kết quả PCR dương tớnh chắc chắn chỉ điểm rằng cú vật chất di truyền (RNA) của SARS-CoV trong mẫu. Tuy nhiờn nú khụng cú nghĩa
rằng virus hiện diện gõy nhiễm bệnh, hoặc rằng nú hiện diện với số lượng
đủ lớn để gõy nhiễm cho người khỏc.
Kết quả PCR õm tớnh khụng loại trừ được SARS. Bờn cạnh khả năng cú
được kết quả xột nghiệm õm tớnh giả, khụng chớnh xỏc (như do thiếu độ
nhạy), cú thể bệnh phẩm thu thập khụng đỳng vào lỳc virus hoặc vật chất di truyền của nú cú mặt.
Hiện nay, người ta đang nỗ lực cải thiện độ nhạy của cỏc thử nghiệm PCR nhằm tăng ý nghĩa lõm sàng. Một cỏch tiếp cận là làm khuếch đại một gen khỏc của SARS-CoV hơn là dựng gen polymerase như hiện nay; do cỏch thức sao mó đơn nhất của cỏc coronavirus, PCR nhằm vào nucleoprotein cú thể cú độ nhạy cao hơn (Lai). Trong khi phương phỏp PCR này đang được đỏnh giỏ, cỏch tiến hành hiện đó sẵn cú ở Viện Berhard Nocht.
Phõn lập virus