1 giờ sau sinh 2 giờ sau sinh 3 giờ sau sinh
3.2.2. Nhân gen SRY sau khi phân lập tế bào phôi thai trong máu ngoại vi của mẹ
Sau khi phân lập tế bào phôi thai trong máu ngoại vi của mẹ chúng tôi tiến hành khuếch đại cả bộ gen của các tế bào phân lập đƣợc, sau đấy chúng tôi tiến hành nhân gen SRY để chứng minh sự tồn tại của tế bào phôi thai trong máu ngoại vi của mẹ.
Quy trình khuếch đại bộ gen từ các tế bào bằng bộ kít Repli-G của Qiagen đƣợc miêu tả chi tiết trong phần phƣơng pháp nghiên cứu và quy trình nhân gen của các locus trên NST X và NST Y đƣợc thực hiện bằng bộ kít Aneufast cho kết quả dƣới đây:
Hình 3.22. Ảnh điện di mao quản của sản phẩm QF-PCR của mẫu nghiên cứu 964 với các locus trên NST giới tính X, Y
Hàng đầu là các locus : AMXY, HPRT, SRY; Hàng 2 là các locus: DXS6803, SBMA, DXS6809; Hàng 3 là các locus DXYS156, DXS8377; hàng 4 là locus TAF9L.
Hình ảnh kết quả trên chúng tôi nhận thấy có xuất hiện Alen của NST Y ở locus Amel và locus SRY và locus DXYS156 điều này chứng tỏ mẫu nghiên cứu này có xuất hiện nhiễm sắc thể Y ở tế bào phôi trong bộ nhiễm sắc thể của nó.
Từ hình ảnh kết quả trên cho chúng tôi thấy sau khi nhân gen các locus trên NST giới tính X và Y các alen xuất hiện với tín hiệu là các Peak cao và rõ nét. Trong kết quả này có xuất hiện Alen của NST Y ở locus Amel, locus SRY và locus DXYS156 điều này chứng minh đƣợc rằng mẫu tế bào phôi này chúng tôi tách đƣợc là
của tế bào phôi thai tự do, đây là tế bào phôi thai mang nhiễm sắc thể giới tính Y. Các locus khác trên NST giới tính X và Y này xuất hiện với các tín hiệu tỷ lệ bình thƣờng.
Theo tác giả Bianchi và cộng sự, (1990) đã tách thành cơng tế bào hồng cầu có nhân của tế bào phơi thai lƣu hành tự do trong máu của mẹ và tác giả đã nhuộm tế bào này bằng thuốc nhuộm huỳnh quang đặc hiệu cho NST Y, ông cũng chứng minh bằng kết quả nhân gen SRY [28] .
Từ kết quả nhuộm huỳnh quang NST của tế bào phôi thai tự do lƣu hành trong