Sàng lọc trên mô hình in vivo chuột tăng đường huyết cấp tính
Tạo mô hình chuột tiểu đường type
Thử nghiệm hoạt tính cao chiết trên mô hình in vivo chuột tiểu
đường type 20 mẫu thực vật
Bột thô
Rửa sạch, sấy ở t0 ≤ 00C, xay
3 lần
Định lượng polyphenol tổng số
Sàng lọc trên mô hình qu t gốc tự do PPH
ác mẫu cao chiết c hoạt tính chống oxy h a tốt
Sàng lọc trên mô chống oxy h a R P
Định lượng flavonoid tổng số Cao chiết ethanol
Tách chiết với ethanol 70%
Bã Cô quay chân không ở 500C
Thử nghiệm độc tính cấp diễn
Theo dõi và ghi nhận kết quả vào các ngày thứ
2.3.1. Phƣơng pháp xử lý mẫu, tách chiết và thu nhận cao chiết
Mục đích: Tách chiết các hợp chất có hoạt tính sinh học từ thực vật nhằm phục vụ cho các nghiên cứu về sau.
Nguyên tắc: Sử dụng dung môi thích hợp để tách chiết các hợp chất có trong các mẫu thực vật nhờ lực liên kết hóa học từ đ ta c thể lôi kéo các chất cần thiết ra khỏi mẫu.
Xử lý mẫu: Các mẫu sau khi thu hái được rửa sạch sau đ sấy khô cẩn thận trong tủ sấy ở nhiệt độ không cao hơn 0° đến khi khối lượng không đổi và tiến hành xay thành bột thô. Bột được bảo quản trong túi polyethylen ở nơi khô ráo
Bột sẽ được ngâm để trích ly hợp chất với dung môi ethanol 70 % (tỉ lệ 1:20 w/v) trong 24 giờ và lặp lại 3 lần. Dịch chiết sẽ được loại bỏ dung môi để thu nhận cao chiết bằng cách cô quay chân không. Cao chiết thu được sẽ được bảo quản ở nhiệt độ 4oC.
2.3.2. Phƣơng pháp đánh giá khả năng chống oxy hóa 2.3.2.1. Mô hình quét gốc tự do DPPH 2.3.2.1. Mô hình quét gốc tự do DPPH
Nguyên tắc: DPPH là một gốc tự do c ước sóng cực đại hấp thu tại nm và c màu tím ác chất c khả năng chống oxy hóa sẽ trung hòa gốc DPPH bằng cách cho hydrogen, làm giảm độ hấp thu tại ước sóng cực đại và màu của dung dịch phản ứng sẽ nhạt dần chuyển từ tím sang vàng nhạt.