IV. Kết quả nghiên cứu.
a. Đối t−ợng mẫu khảo sát.
4.3.1.10. Xác định các đặc điểm hoá học đặc tr−ng của Nga truật.
a. Mẫu khảo sát.
Tiến hành khảo sát trên các mẫu Nga truật gồm có 3 mẫu d−ợc liệu thu hái, 3 mẫu mua trên thị tr−ờng đ−ợc áp dụng để so sánh.
Địa chỉ mẫu đã đ−ợc ghi ở phụ lục 2.
b. Khảo sát các điều kiện phân tích.
Dựa vào kết quả phân tích sàng lọc theo nhóm chất, tiến hành khảo sát xác định các đặc điểm hoá học đặc tr−ng của d−ợc liệu Nga truật theo h−ớng định tính các thành phần terpenoid, gồm có các b−ớc nh− sau :
Chuẩn bị mẫu chấm sắc ký:
- Dịch chiết methanol: 1g d−ợc liệu đ−ợc đ−ơc tán nhỏ, tiến hành chiết với methanol theo ph−ơng pháp nh− đã ghi ở mục 3.3.2.1.b.
Hình 4.19: Mộc h−ơng. Sắc ký đồ SKLM.
Hoà cắn thu đ−ợc trong 2ml methanol, đ−ợc dùng làm dung dịch chấm sắc ký, l−ợng chấm 10àl.
Hệ dung môi sắc ký và phát hiện:
Tiến hành khảo sát theo h−ớng tách và phát hiện các thành phần terpenoid. Cách iến hành nh− đã ghi ở mục 3.3.2.1.c và 3.3.2.1.d . Kết quả đã lựa chọn đ−ợc hệ dung môi và phát hiện áp dụng cho định tính Nga truật nh− đã ghi ở phần c.
c. Kết quả.
Kết quả xác định các đặc điểm hoá học đặc tr−ng của d−ợc liệu Nga truật đ−ợc thể hiện trên các hình ảnh sắc ký đồ ở
Hình 4.21 và Hình 4.22 ( tr. 70 ). Điều kiện phân tích nh− sau :
Mẫu chấm sắc ký :
Mẫu nghiên cứu: C2.1, C2.2, C 2.3
Mẫu mua trên thị tr−ờng: S 3.1, S3.2, S3.3
Hệ dung môi :
- Hình 4.21: Toluen: ethyl acetate ( 95 : 5). - Hình 4.22 : Giống Hình 4.21.
Phát hiện :
- Hình 4.21. A.TT1 : p.Dimethylamino bensaldehyd– acid sulfuric(không sấy) B. TT2 : Anisaldehyd – acid sulpfuric ( không sấy).
- Hình 4.22 : Nh− Hình 4.21, quan sát d−ới UV366nm.
d. Đánh giá kết quả và nhận xét.
- Kết quả hình ảnh sắc ký đồ ở Hình 4.21 và Hình 4.22 thể hiên phép thử định tính terpenoid, đ−ợc tách với hệ của tinh dầu và cho màu đặc tr−ng với thuốc thử của terpenoid.
Sắc ký đồ cho các vết có màu sắc khác nhau với hai loại thuốc thử khác nhau, cụ thể với thuốc thử DMAB / H2SO4 sắc ký đồ gồm các vết màu đỏ đặc tr−ng xuất hiện ngay sau khi phun thuốc thử (Hình 4.21A), với thuốc thử anisaldehyd – acid sulfuric tiến hành trong điều kiện t−ơng tự, sắc ký đồ gồm các vết màu xanh đặc tr−ng (Hình 4.21B). Các hình ảnh sắc ký đồ trên cũng cho các vết có phát quang màu đặc tr−ng khi quan sát d−ới UV366nm (Hình 4.22.A)(Hình 4.22.B ). Tỷ lệ mật độ của các vết có thay đổi trên các mẫu khác nhau.
- Kết quả hình ảnh các sắc ký đồ trên đều thể hiện đặc tr−ng cho các mẫu d−ợc liệu Nga truật đã khảo sát.