Chương 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2. Chuyển gen tạo rễ tơ thông qua vi khuẩn A.rhizogenes ATCC1
Ứng dụng quy trình chuyển gen từ thắ nghiệm với chủng mang gen gus ựể chuyển gen tạo rễ tơ, tuy nhiên trong khảo nghiệm gus chỉ dừng lại sau thời gian ựồng nuôi cấy nên chưa bị tác ựộng của các yếu tố khác trong giai ựoạn cảm ứng tạo rễ tơ như nhiệt ựộ, kháng sinh, khả năng tái sinh của mẫu,... trong ựó sức sống của
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 55
mẫu mô chuyển gen sau thời gian ựồng nuôi cấy ảnh hưởng lớn ựến khả năng ra rễ của mẫu. Nếu chỉ ựánh giá thông qua biểu hiện gen gus thì chỉ ựánh giá ựược hiệu quả nhận gen của mẫu sau thời gian ựồng nuôi cấy, với những mẫu mô có sức sống kém có thể có tỷ lệ biểu hiện gen gus cao nhưng sau ựồng nuôi cấy mẫu bị chết không hình thành ựược rễ tơ nên chưa ựánh giá ựược hiệu quả cảm ứng ra rễ tơ. Chắnh vì vậy cần ựánh giá chắnh xác bằng khả năng hình thành rễ tơ trước khi ựưa ra quy trình thắch hợp.
Sự biểu hiện của gen gusA là tạm thời, không có tắnh bền vững cao trong tế bào thực vật. Do ựó, mẫu có thể dễ dàng biểu hiện gen gusA nhưng khả năng cảm ứng ra rễ có sự khác biệt. đoạn gen rol có thể ựược chuyển vào gennom thực vật nhưng nằm trên vùng dị nhiễm sắc hay ảnh hưởng bởi các trình tự ựiều hoà ở phắa ựầu gen thì cũng không ựược biểu hiện. Do vậy ựể có kết quả chắnh xác cần ựánh giá thông qua cả thắ nghiệm cảm ứng tạo rễ tơ. đồng thời rễ tơ thu ựược sẽ là nguồn vật liệu cho các thắ nghiệm tiếp theo. Khi tiến hành thắ nghiệm với chủng
A. rhizogenes ATCC 15834 không mang gen gus thì tỷ lệ tạo rễ tơ có sự khác biệt với tỷ lệ biểu hiện gen gus.