SỬ DỤNG DMP TRONG ĐIỀU TRỊ MTC VÀ NNTP

Mụn trứng cá là một tình trạng bệnh mãn tính ở đơn vị nang lông tuyến bã của da, gây nhiều loại tổn thương khác nhau. Sau khi lành có thể để lại sẹo xấu, ảnh hưởng nhiều tới thẩm mỹ. Việc điều trị đã gặp không ít khó khăn mà sự tái phát lại dễ dàng, đây là một vấn đề rất được nhiều người trong giới chuyên môn quan tâm 1. Nguyên nhân rất phức tạp. Có 2 yếu tố tạo nên các sẫn mụn mũ trứng cá, đó là sự tăng tiết chất bã (da dầu) và nhiễm khuẩn. Da dầu do nhiều nguyên nhân sinh lý và bệnh lý, do nội tiết tố hoạt động quá mức hoặc do hoạt động bất thường của đơn vị nang lông tuyến bã. Nhiễm khuẩn do các tế bào biểu bì nang lông bị bong tróc rất nhiều tạo nên sự “ùn tắc” tại vùng nang lông – tuyến bã khiến chất bã nhờn không được bài xuất tạo điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn phát triển gây viêm và mưng mủ nang lông 2. Để giải quyết vấn đề da dầu và nhiễm khuẩn, các Bác sĩ da liễu và chuyên gia thẩm mỹ đã dùng kết hợp giữa việc điều trị thuốc uống và một số biện pháp điều trị tại chỗ như thuốc bôi, mặt nạ làm sạch da … Hiện nay ở nước ta, các thẩm mỹ viện đã dùng một số DMP của các hãng nước ngoài để điều trị MTC cho kết quả rất khả quan, đáp ứng được nhu cầu điều trị và an toàn cho da, tuy nhiên giá thành lại rất đắt. Thực tế ngành DMP ở nước ta chưa được quan tâm nghiên cứu nhiều. Với mong muốn góp phần bước đầu nghiên cứu các DMP làm sạch và chăm sóc da nhằm hỗ trợ cho việc điều trị MTC và ngăn ngừa tái phát, hy vọng giá thành sẽ rẻ hơn. Trong khuôn khổ một luận văn tốt nghiệp Dược Sĩ Đại Học chúng tôi tiến hành đề tài “Bước đầu nghiên cứu một dạng DMP hỗ trợ trong điều trị MTC”, với mục tiêu điều chế chế phẩm đạt yêu cầu về: · Các chỉ tiêu lý hóa của dạng thuốc mỡ. · Tính sinh khả dụng cao. · Không kích ứng da. Để đạt mục tiêu trên, chúng tôi tiến hành thực hiện những nội dung sau: · Kiểm tra xây dựng tiêu chuẩn các nguyên liệu. · Bào chế các công thức thuốc mỡ thăm dò. · Đánh giá thuốc mỡ theo chỉ tiêu lý hóa: về thể chất, khả năng giải phóng hoạt chất... · Thiết kế và tối ưu hóa công thức bằng phầm mềm thông minh. · Bào chế công thức thuốc mỡ theo mô hình thiết kế · Kiểm tra chất lượng TM. · Khảo sát độ ổn định thuốc mỡ.

1 - ĐẶT VẤN ĐỀ Mụn trứng cá tình trạng bệnh mãn tính đơn vò nang lông tuyến bã da, gây nhiều loại tổn thương khác Sau lành để lại sẹo xấu, ảnh hưởng nhiều tới thẩm mỹ Việc điều trò gặp không khó khăn mà tái phát lại dễ dàng, vấn đề nhiều người giới chuyên môn quan tâm [1] Nguyên nhân phức tạp Có yếu tố tạo nên sẫn mụn mũ trứng cá, tăng tiết chất bã (da dầu) nhiễm khuẩn Da dầu nhiều nguyên nhân sinh lý bệnh lý, nội tiết tố hoạt động mức hoạt động bất thường đơn vò nang lông tuyến bã Nhiễm khuẩn tế bào biểu bì nang lông bò bong tróc nhiều tạo nên “ùn tắc” vùng nang lông – tuyến bã khiến chất bã nhờn không xuất tạo điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn phát triển gây viêm mưng mủ nang lông [2] Để giải vấn đề da dầu nhiễm khuẩn, Bác só da liễu chuyên gia thẩm mỹ dùng kết hợp việc điều trò thuốc uống số biện pháp điều trò chỗ thuốc bôi, mặt nạ làm da … Hiện nước ta, thẩm mỹ viện dùng số DMP hãng nước để điều trò MTC cho kết khả quan, đáp ứng nhu cầu điều trò an toàn cho da, nhiên giá thành lại đắt Thực tế ngành DMP nước ta chưa quan tâm nghiên cứu nhiều Với mong muốn góp phần bước đầu nghiên cứu DMP làm chăm sóc da nhằm hỗ trợ cho việc điều trò MTC ngăn ngừa tái phát, hy vọng giá thành rẻ Trong khuôn khổ luận văn tốt nghiệp Dược Só Đại Học tiến hành đề tài “Bước đầu nghiên cứu dạng DMP hỗ trợ điều trò MTC”, với mục tiêu điều chế chế phẩm đạt yêu cầu về: • Các tiêu lý hóa dạng thuốc mỡ • Tính sinh khả dụng cao • Không kích ứng da Để đạt mục tiêu trên, tiến hành thực nội dung sau: • Kiểm tra xây dựng tiêu chuẩn nguyên liệu • Bào chế công thức thuốc mỡ thăm dò • Đánh giá thuốc mỡ theo tiêu lý hóa: thể chất, khả giải phóng hoạt chất • Thiết kế tối ưu hóa công thức phầm mềm thông minh • Bào chế công thức thuốc mỡ theo mô hình thiết kế • Kiểm tra chất lượng TM • Khảo sát độ ổn đònh thuốc mỡ – TỔNG QUAN 2.1 – TỔNG QUAN VỀ DMP [3] 2.1.1 – Đònh nghóa DMP gồm sản phẩm làm da chăm sóc da Trong số trường hợp, ranh giới DMP thuốc da liễu khó phân biệt Tùy theo luật nước mà người ta xếp sản phẩm DMP hay thuốc da liễu Việc sử dụng sản phẩm thường đònh hướng dẫn Bác só Dược só 2.1.2 – Các tác dụng DMP - Làm mềm da, DMP có khả làm tăng lượng nước da giữ lại sừng giúp da trở nên mềm mại - Làm da - Làm bong vảy sừng: tẩy bỏ tế bào chết lớp sừng giúp da trở nên mòn hơn, sáng - Làm se da - Làm dòu da chống viêm - Chống gốc tự do: chống lại trình lão hóa da 2.1.3 – Hoạt chất sử dụng DMP Hoạt chất DMP phải có khả bảo vệ, chăm sóc, điều chỉnh cân sinh lý da phần phụ da Nguồn gốc hoạt chất: - Nguồn góc chiết xuất thiên nhiên: chiếm đa số người tiêu dùng ưa chuộng có tác dụng phụ, an toàn cho da - Hoạt chất tổng hợp: hoạt chất có đặc tính lý hóa riêng, phụ thuộc vào cấu trúc phân tử Đặc tính ứng dụng việc bào chế DMP - Hoạt chất có nguồn gốc từ công nghệ sinh học: DMP-MP có nhiều sản phẩm dành cho da tóc có chứa Collagene, có tác dụng làm ẩm da tạo màng bảo vệ cho da 2.2 – NGHIÊN CỨU THỊ TRƯỜNG VỀ CÁCH SỬ DỤNG DMP TRONG ĐIỀU TRỊ MTC VÀ NNTP Qua nghiên cứu thò trường TPHCM, xin nêu số DMP thẩm mỹ viện dùng để điều trò mụn cho bệnh nhân xem có kết tốt Sản phẩm hãng chọn giới thiệu hãng DMP Pháp Proffesionnels, hãng DMP Pháp Mahler 2.2.1 – Sản phẩm hãng DMP Pháp Proffessionnels - Pelling vegetal enzumematique + Thành phần: Burdock extract (Arctium minuz) lemon extract (citrus lemon), Hopsextract (Humulus liepullis), Hypericum extract (Hypericum perforatum), safe extract (salraia officinalis), Saponaria extract (Sapo naria officinalis), … + Công dụng: làm thoáng lỗ chân lông lột nhẹ lớp da cùng, lấy độc tố chất bã nhờn + Giá thành: chai 250ml 41,4USD - Les soins visage Aux Allgues + Thành phần: trầm tích biển, mineraux oligo elements marins + Công dụng: làm lỗ chân lông tẩy sâu vào da làm biến MTC + Giá thành: chai 30ml 9,4USD - Masque au campture + Thành phần: kaolin, camphora, bentonite + Công dụng: sát trùng, sáng mụn trẻ + Giá thành: chai 250ml 39,3USD - Masque purifiant mặt nạ tẩy + Thành phần: Citron, Malicarie, Acides amine’s + Công dụng: Nạ tẩy thật sâu, làm biến chất bẩn làm bít lổ chân lông, làm trương lực da làm se da Mặt nạ dùng hút tất chất nhờn chất bẩn da + Giá thành: chai 50ml 17,1USD + Green clay cream mask da bò bẩn mẫn cảm + Thành phần: Green clay, Frace Elements, Magnesium, oligo elements, mineraux + Công dụng: Green Clay sản phẩm tẩy cặn tự nhiên, hấp thụ tất sản phẩm da mà không làm khô da Green Clay làm dòu mẫn cảm cho da khô da dò ứng, làm sáng da nhờn làm mờ vết nhăn + Giá thành: chai 250ml 39,4 USD - Strawberry mask + Thành phần: strawberry juice, zineoxide, Fragrance + Công dụng: dùng cho da trẻ, cho da có khuynh hướng nhờn có mụn Tinh chất dâu làm se lổ chân lông, tẩy làm thư giãn da Nó làm quân bình tuyến bã nhờn ngăn chặn hình thành mụn đầu đen + Giá thành: chai 250ml 39,3USD 2.2.2 Sản phẩm hãng DMP Pháp Mahler - Masque no9 acidifiant acidifying mask exjolil + Thành phần: kaolin, faex, lactic yeast, arctium lappa (Burdock extract) + Công dụng: trò mụn dành cho da dày bò thâm + Giá thành: hộp 142g 496.000đ - Masque no9 acidifiant acidifying mask special + Thành phần: Faex, lacic yeast, kaolin + Công dụng: mask trò mụn dành cho da nhờn mụn + Giá thành: hộp 142g 496.000đ 2.2.2 Sản phẩm hãng DMP Mỹ … − Acne program anti Espinillas:Bao gồm bước: + Bước 1: Ance wash(sửa rữa mặt) + Bước 2: Ance mask(mặt nạ) + Bước 3: Ance Cream(Kem) − Thành phần Ance mask: Deionized water, kaolin, Bentonite, SPA-40, zine Oxide, Triclosan, Peppermint oil − Công dụng:Mặt nạ chống mụn làm khe khít lỗ ch6n lông làm da, làm kín lỗ chân lông, giúp da mêm bóng, ngăn ngừa mụn tái phát − Giá thành:350.000/ 2.3 – TỔNG QUAN VỀ DƯC CHẤT VÀ TÁ DƯC KHẢO SÁT 2.3.1 – Dược chất - Dầu nghệ - Kẽm oxyd - Đất sét - Kaolin 2.3.1.1 – Nghệ [4] [5] - Tên khoa học: Curcuma Longa L.Zingiberaceae - Bộ phận dùng: thân rễ - Thành phần hóa học: - Các chất curcuminoid có chất màu curcumin chiếm từ 0,3%-1,5% Curcumin có đồng phân curcumin I, II, III curcumin I chiếm 60% - Tinh dầu chiếm 1% - 5% màu vàng nhạt, mùi thơm đặc trưng Nghệ Trong tinh dầu có chứa 25% carbur terpenic, 65% ceton sesquiterpene Công thức: R2 R1 OH HO CH=CH-C-CH2-C-CH=CH O Curcumin I O R1 = OCH3 R2 = OCH3 Curcumin II R1 = OCH3 R2 = H Curcumin III R1 = H - R2 = H Tính chất lý hóa:Curcumin dạng tinh thể màu đỏ ánh tím hay vàng cam, không tan nước, tan acid, kiềm, acid acetic băng, tan rượu, ether, chlorofom, chất béo tạo dung dòch có huỳnh quang màu xanh lục - Đònh tính [6]  Phản ứng hóa học: + Phản ứng acid cho màu đỏ tươi + Phản ứng kiềm cho màu đỏ cam + Phản ứng acid boric / môi trương acid: cho màu đỏ, hơ với amoniac cho màu xanh đen  Bằng SKLM - Đònh lượng:trong tài liệu ISO 5566 đònh lượng curcumin toàn phần nghệ phương pháp đo quang với bước sóng cực đại curcumin - Tác dụng dược lý:Curcumin có tác dụng tiêu mủ, lên da non, tác dụng thông mạt, tăng tiết mật tế bào gan Ở nồng độ cao, curcumin có tác dụng kháng khuẩn gram dương gram âm [19] Tinh dầu nghệ có tác dụng diệt nấm da kháng khuẩn giống curcumin - Công dụng: dùng việc chữa bệnh đau dày, vàng da, phụ nữ sinh xong đau bụng, bôi lên mụn nhọn khỏi đỡ lành sẹo chống thâm Dân gian thường dùng nghệ tươi vắt nước để bôi ung nhọt viêm tấy lỡ loét da - Phương pháp chiết xuất curcumin toàn phần nghệ: có nghiên cứu theo tài liệu số qui trình chiết xuất nghệ, xin nêu quy trình của: + Đỗ Thúy Phượng: chiết xuất curcumin toàn phần phương pháp nghấm kiệt với dung môi cồn 96o[6] + Cơ sỡ Thorakao: chiết xuất curcumin toàn phần phương pháp lôi kéo với dung môi cồn 90 • Theo qui trình chiết xuất chiết xuất curcumin toàn phần nghệ phương pháp ngấm kiệt với dung môi cồn 96o[6] Bột nghệ xử lý độ mòn Chiết ngấm kiệt cồn 90o Dòch chiết cồn Thu hồi cồn, cô cách thủy Cao mềm Rửa ether dầu hỏa hòa tan lại cồn 96 Dòch chiết nghệ Để lạnh 24h lọc Curcumin toàn phần thô Sơ đồ1 Qui trình Kết tinh lại trồng cồn 96o Curcumin toàn phần tinh thể chiết xuất curcumin toàn phần + Theo quy trình chiết xuất sở Thorakao chiết xuất curcumin toàn phần pp cất lôi kéo dung môi cồn 90o Nghệ tươi rửa Đem hấp Đem phơi khô Đem nghiền thành bột Ngâm với cồn 90o Đem cất theo pp lôi kéo Sơ đồ2 Qui Tách lấy dầu nghệ trình chiết xuất curcumin toàn phần 2.3.1.2 – Kẽm Oxyd [8] - Công thức hóa học: ZnO, PTL: 81,4 - Tính chất: Bột vô đònh hình màu trắng ngà Để không khí dễ hút ẩm khí carbodioxyt Thực tế không tan nước ethanol 90 o, tan acid loãng, kiềm - Đính tính: dung dòch kẽm oxyd / HCl loãng cho phản ứng đặc trưng kẽm theo phụ lực 7.1 DĐVNII - Đònh lượng: dùng pp đònh lượng kẽm theo chuẩn độ thể tích pp complexon phụ lục 6.1DĐVNIII T (CT) chuẩn độ dung dòch dinatri-dihydro ethylen diamin tetra acetat 0,05M 1ml dung dòch dinatri dihydlro ethylendiamin tetra-acetat 0,05M tương đương với 4,069 mg ZnO ♦ Theo PP AOAC[20]:PP quang phổ hấp thu nguyên tử(Atomic Asborption Spectrophotometry) 3.5.6 Phương pháp nghiên cứu hấp thu thuốc qua da Có nhiều yếu tố ảnh hưởng đến trình hấp thu thuốc qua da: Yếu tố sinh lý tình trạng da, điều kiện bôi thuốc, yếu tố dược học Ngoài tính chất dược chất đặc tính tá dược có ảnh hưởng lớn mức độ tốc độ phóng thích dược chất khỏi tá dược Vì để đánh giá hấp thu thuốc qua da trước hết ta cần khảo sát GPHC khỏi tá dược Trong điều kiện phòng thí nghiệm (trên invitro) thu kết có tính chất thông báo Vì màng để dược chất thấm qua không hoàn toàn giống với da, da lành da bò tổn thương cho ta thấy khác GPHC từ tá dược khác phương pháp khác Có phương pháp khảo sát GPHC invitro: - Phương pháp khuếch tán qua gel - Phương pháp khuếch tán qua màng bán thấm 3.5.6.1 – Phương pháp khuếch tán qua gel - Nguyên tắc: Cho hoạt chất giải phóng từ TM khuếch tán qua lớp gel, sau đo đường kính vùng khuếch tán Từ kết đo ta rút kết luận khả GPHC khỏi tá dược - Điều kiện: Phải nhìn rõ vùng khuếch tán, muốn phải dùng chất thử khác nhau, điều chế TM với chất màu tan nước cho huỳnh quang hay chất kháng khuẩn có khả phản ứng màu - Tiến hành: Điều chế gel thạch theo công thức: Thạch trắng 3g Dung dòch NaOH 10% Nước cất 3ml 200ml Ngâm thạch trương nở nước Đun nóng cách thủy tan hoàn toàn, thêm 3ml dung dòch NaOH 10% Đỗ vào hộp petri lớp thạch dày 5mm Để tủ lạnh cho đông lại Lấy đia thạch đông khoét lỗ có đường kính 10mm (để tránh TM xuyên phía lớp thạch phải nhỏ 1-2 giọt thạch lỏng vào lỗ thạch trước cho TM vào Cho TM vào gạt miệng) Sau 15 phút đo đường kính vòng khuếch tán Giá trò trung bình đường kính vòng khuếch tán tính theo công thức: X= εD − nd 2n 3.5.6.2 – Phương pháp khuếch tán qua màng thẩm tích - Nguyên tắc: Cho hoạt chất khuếch tán qua màng thẩm tích, đònh lượng chất giải phóng khoảng thời gian phương pháp đo quang bước sóng cực đại curcumin - Tiến hành: Cân xác 1,5g TM cho vào màng, đặt úp vào miếng ống nghiệm có sẵn 2-3ml dung môi cồn 96 o Bòt kín miệng ống nghiệm lại Đặt ngược ống nghiệm vào cốc thủy tinh đựng sẵn 25ml dung môi cồn 96o Sau khoảng thời gian (15 phút, 30 phút, 60 phút) hút xác 10ml dung dòch hoạt chất khuếch tán đem đònh lượng phương pháp đo quang bước sóng cực đại curcumin Bổ sung xác 10ml dung môi cồn 96o vào 3.5.7 Phương pháp thử tác dụng kháng khuẩn [12]:  Phương pháp thử: phương pháp pha loãng sử dụng để xác đònh MIC chất kháng khuẩn, sở để đánh giá mức độ hoạt tính kháng khuẩn  Môi trường: + Môi trường hoạt hóa vi khuẩn: Tryptic Soy Broth (TSB) + Môi trường thử nghiệm: Thạch Mueller – Hinton (MHA)  Chuẩn độ đục:sử dụng thang độ đục McFarland 0,5 • Thang chuẩn độ đục McFarland 0,5: Mẫu cấy phải điều chỉnh độ đục cho với McFarland 0,5 cách pha loãng với nước muối sinh lý canh thang Mueller – Hinton TSB Độ đục tương đương với mật độ vi khuẩn 1-2.10 CFU/ml  Chuẩn bò vi khuẩn thử nghiệm:Thực theo phương pháp tăng sinh, MRSA dùng pp lấy khóm trực tiếp để tạo huyền dòch có độ đục cần thiết • Phương pháp tăng sinh: Vi khuẩn thử nghiệm cấy vào ống nghiệm chứa 4-5ml môi trường TSB, ủ 35oC có độ đục vượt MeFarland 0,5 Đối với phương pháp pha loãng thạch, huyền trọc vi khuẩn pha loãng tiếp 10 lần để có mật độ vi khuẩn khoảng 107 CFU/ml Khi ta chấm vết khoảng 1-2ml có số lượng vi khuẩn 10 4CFU/vết.Vi khuẩn sau điều chỉnh phải sử dụng vòng 15 phút • Chủng vi khuẩn sử dụng: Streptococus faccalis Staphylococus aureus E coli Pseudomonas auruginosa MRSA (Staphylocoais aureus kháng Methicilin)  Chuẩn bò giải nồng độ chất thử:Chất thử nghiệm cân xác pha thành dung dòch me dung môi thích hợp, sử dụng pha loãng môi trường thử nghiệm cho tạo thành giai nồng độ môi trường thử nghiệm (có nồng độ sau ½ nồng độ trước) Khoảng nồng độ cần pha tùy thuộc vào MIC dự đoán chất thử.Chất thử nghiệm trộn vào môi trường thạch nấu chảy để nguội 48-50oC, lắc đều, đổ vào hộp petri thạch đông lại  Tiến hành cấy vi khuẩn:Dùng dụng cụ thích hợp (đầu cấy micropipet) cấy 1-2pul huyền trọc vi khuẩn điều chỉnh lên bề mặt môi trường thạch có chứa nồng độ chất thử Bắt đầu cấy từ nồng độ thấp Song song tiến hành hộp chứng không chứa chất thử Để yên khoảng 15 phút để vết chấm khô Lật ngược hộp thạch cấy ủ tủ ấm 35-37 oC 16-18 Đối với MRSA phải ủ vòng 24h  Đọc kết quả:Kết có giá trò vi khuẩn mẫu chứng mọc bình thường.Đặt hộp thạch bề mặt sẫm màu, không phản xạ ánh sáng, quan sát tạo thành khóm vi khuẩn thử nghiệm Tìm hộp có nồng độ thấp ức chế hoàn toàn tạo khóm, nồng độ hộp làm MIC chất thử vi khuẩn thử nghiệm 3.5.8 Phương pháp kiểm nghiệm tiêu an toàn 3.5.8.1 Phương pháp thử giới hạn nhiễm khuẩn [] Thử giới hạn nhiễm khuẩn nhằm đánh giá số lượng vi khuẩn hiếu khí, nấm mốc có khả sống lại phát vi khuẩn điểm y tế có thuốc Thí nghiệm tiến hành điều kiện vô khuẩn Trong làm thí nghiệm ý không đưa chất khử khuẩn vào mẫu thử Theo Tiêu chuẩn giới hạn vi khuẩn, nấm mốc Mỹ phẩm ban hành kèm theo Quyết đònh số 3113/1999 Bộ Y Tế,thử giới hạn nhiễm khuẩn cho chế phẩm dùng chổ kem bôi da, nước thơm… thực sau: − Pha chế mẫu thử: pha loãng sản phẩm thành nồng độ đem thử nghiệm thích hợp 10 -1 , 10-2 , 10-3 1/2, 1/5, 1/20,1/40…sao cho đếm khuẩ lạc đóa petri có đường kính 90 – 100 mm, số lượng khuẩn lạc không vượt qúa 300 đóa − Thử nghiệm sơ bộ:Tìm chất ức chế có thuốc: chế phẩm sau pha loãng nộng độ thích hợp cho vào môi trường chọn lọc cho Escherichia Coli, Samonella, Staphylococcus, Pseudomonas aeuruginosa − Thử nghiệm tìm vi khuẩn: Giới hạn vi khuẩn nấm mốc:  Trong Mỹ Phẩm không dược có vi khuẩn:  Pseudomonas aeuruginosa  Staphylococcus aureus  Candida albicans  Tổng số vi khuẩn hiếu khí sống lại không lớ 100/1g 1ml sản phẩm  Tổng số nấm mốc sống lại không lớ 100/1g 1ml sản phẩm  Số lượng Enterrobacteria vi khuẩn gram âm khác không lớn 10/ 1g 1ml sản phẩm 3.5.8.2 Phương pháp thử giới hạn kim lọai nặng( chì, arsen ) Theo phương pháp AOAC:Quang phổ hấp thu nguyên tử (Atomic Asborption Spectrophotometry) 3.5.8.3 Phương pháp khảo sát tác động kích ứng da [10] Thỏ thử nghiệm: lô thỏ gồm trắng mắt đỏ, thỏ khỏe mạnh thai, thân nhiệt 37,5 – 38,5 oC có trọng lượng 2kg – 2,5kg Cạo lông vùng bụng khoảng 10cm x 10cm trước 24 Cân thỏ Tiến hành: • Cố đònh thỏ • Vẽ ô vuông (1cm x 1cm), cách 6cm ôa: bôi dung dòch choloroform 0,4ml 20 giây ôb: bôi TM nghiên cứu ôc: bôi thuốc mỡ acne mask ôd: bôi chế phẩm strawbery mask ♦ Sau 10 phút tiêm tónh mạch vành tai 1ml/kg thỏ phẩm xanh lam Evans dạng dung dòch 0,25% ♦ Quan sát khoảng thời gian 15 phút đến xuất màu xanh lam Evansvà cho điểm theo thang điểm trình bày bảng ♦ Để đánh giá tác động kích ứng dược phẩm người ta dựa vào trò số trung bình tính theo thang điểm thu qua nhiều lần thử nghiệm trình bày bảng Bảng Thang điểm quy đònh lựa cường độ màu diện nơi tiếp xúc với chế phẩm Cường độ màu Không màu Thang điểm Màu xanh lam nhạt Xanh lam Xanh lam đậm Có điểm tụ máu màu đỏ 16 bao quanh vòng xanh lam đậm Bảng Đánh giá tác động kích ứng da dựa điểm Thang điểm Tác động kích ứng Không kích ứng 1-3 Kích yếu 4-7 Kích ứng trung >8 bình Kích ứng mạnh 3.6 PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH THUỐC MỢ[ ] Một yêu cầu quan trọng thuố mỡ phải bền vững trongqúa trình bảo quản Do nghiên cứu thuốc mỡ phải nghiên cứu độ bền vững Nghiên cứu độ bền vững thuốc mỡ chia làm hai giai đoạn: Giai đoạn nghiên cứu sơ độ bền vững thuốc mỡ bào chế Giai đoạn nghiên cứu độ bền vững thuốc mỡ trình bảo quản lâu dài điều kiện khác Sở dó chia làm giai đoạn nghiên cứu đầy đủ độ bền Có tiêu chuẩn phải đánh giá trình bảo quản, phải loại sơ mẫu không bền vững dể số lượng mẫu thuốc mỡ đưa vào giai đoạn nghiên cứu tốt Phng pháp nghiên cứu sơ độ bền vững thuốc mỡ: - Phương pháp thử: Đặt thuốc mỡ nghiên cứu nhiệt độ: + 40 c 24h,ngưng 6h + 500 c 24h tiếp ngưng 6h Tiếp tục làm đủ vòng - Phương pháp đánh giá: Trong giai đoạn số nhất: thay đổi hình thức bên tách lớp thuốc mỡ tác động lên thuốc mỡ yếu tố mạnh(nhiệt độ cao nhiệt độ thấp ) 3.7 PHƯƠNG PHÁP ĐO ĐỘ BỀN Cân 1g thuốc mỡ cho vào cốc có mỏ 50 ml Thêm 15ml nước cất khuấy kỹ.Chọn Các ống nghiệm có đường kính Chuyển toàn lượng cốc vừ khuấy kỹ vào ống nghiệm Đặt ống nghiệm nhiệt độ 600 c Ghi thời gian thuốc mỡ lắng 0.5 cm Họ tên :Nguyễn Thu Thảo TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯC TP HCM Lớp Cao học 2002 PROTOCOL NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN NÉN PARACETAMOL 100MG, 325MG, 500MG I Mục đích Độ ổn đònh thuốc khả thuốc đảm bảo tiêu chất lượng Dược điển hay tiêu chuẩn chất lượng thuốc đăng ký, bảo quản bao gói chuyên dụng điều kiện bình thường khoảng thời gian đònh Mục tiêu nghiên cứu độ ổn đònh thuốc xác đònh: - Độ ổn đònh thuốc chất lượng thuốc (kiểm tra giới hạn sản phẩm phân hủy) - Tuổi thọ – hạn dùng thuốc điều kiện bảo quản - Các điều kiện bảo quản tốt cho sản phẩm II Nội Dung : Thông tin sản phẩm: Tên chế phẩm: Viên nén Paracetamol 100mg, 325mg, 500mg Qui cách đóng gói: viên nén, tròn, màu trắng, đóng chai nhựa PS màu trắng đục, vó nhựa 10 viên Điều kiện bảo quản: Khảo sát dài hạn 27oC ± oC độ ẩm tương đối (RH) 70% ± 5% phòng điều chỉnh nhiệt độ độ ẩm tương đối Khảo sát tăng tốc điều kiện sau: - Nhiệt độ 60oC ± oC với độ ẩm tương đối 70% ± 5% - Nhiệt độ 40oC ± 20C với độ ẩm tương đối 70% ± 5% Trong tủ vi khí hậu trì nhiệt độ bảo quản, độ ẩm cần thiết ngăn ngừa ảnh hưởng ánh sáng Số lô khảo nghiệm Chọn lô phân tích: Lấy mẫu ngẫu nhiên thành phẩm 03 lô sản xuất Số lô xát hạt: G1, G2 , G3 Ngày sản xuất: Dập viên: 100mg, 325mg, 500mg Nhóm mẫu thử: T1, T2, T3 Bao gói: P1, P2, P3 (P.500mg vó 10 viên; P 325mg chai 80 viên; P.100mg chai 100 viên) Việc thử nghiệm tiến hành 0; 3; 6; 9; 12; 18; 24; 36 tháng 3.1/ Ma trận mẫu thử nghiệm Nhóm bao gói Hàm Lô xát hạt lượng(mg) T1 T2 T3 G1 100 P1 P2 P3 325 P2 P3 P1 500 100 G2 325 500 100 G3 325 500 3.2/ Ma trận dự kiến P3 P3 P1 P2 P2 P3 P1 P1 P1 P2 P3 P3 P1 P2 P2 P2 P3 P1 P1 P2 P3 Nhóm Thời gian thử (tháng) thử T1 12 36 T2 18 36 T3 24 36 Tổng số mẫu thử nghiệm 108 mẫu Phương pháp thử nghiệm 4-1/Khảo sát độ ổn đònh mẫu thuốc lưu điều kiện bình thường: Nhiệt độ 27oC ± oC độ ẩm tương đối 70% ± 5% Kiểm tra ghi lại kết qủa mẫu ban đầu theo tiêu chuẩn DĐVN III tiêu sau: - Cảm quan: viên màu trắng, không mùi - Đònh tính: phổ hồng ngoại, đo điểm chảy - Thời gian rã: không 15 phút - Độ hòa tan: không 75% hàm lượng Paracetamol so với hàm lượng ghi nhãn hòa tan 45 phút (DĐVN III) - Sản phẩm phân hủy: phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao - Tạp chất liên quan: phương pháp sắc ký lớp mỏng - Đònh lượng: phương pháp đo quang/môi trường kiềm λ =257nm Đối với viên nén 100mg hàm lượng từ 90% - 110% so với hàm lượng ghi nhãn Đối với viên nén 325mg 500mg hàm lượng từ 95%-105% so với lượng ghi nhãn Tất mẫu thử nghiệm phải đạt tiêu chuẩn - Cho thuốc vào tủ lưu mẫu.Đònh kỳ kiểm tra mẫu lưu ghi lại kết + Khảo sát ngắn hạn (0, 01, 02, 03, 04, 06) tháng + Khảo sát dài hạn (0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36) tháng 4-1-1/ Tính tuổi thọ thuốc từ đường biểu diễn phụ thuộc hàm lượng hoạt chất( %) theo thời gian (ngày.) - Lập bảng tương quan giửa hàm lượng hoạt chất (%) thời gian (ngày) - Vẽ đường biểu diễn phụ thuộc hàm lượng hoạt chất (%) theo thời gian - Tính t 90 từ đường biểu diễn 4-1-2/ Tính tuổi thọ thuốc từ số liệu thực nghiệm: Sử dụng biểu thức : T90 =0,1053/ K Trong K xác đònh biểu thức: K= -2,303xlog(D/Do)/t Do : Hàm lượng ban đầu D : Hàm lượng lại 4-2/Khảo sát độ ổn đònh thuốc phương pháp già hóa cấp tốc : Song song với việc nghiên cứu độ ổn đònh thuốc mẫu lưu điều kiện bình thường việc xác đònh độ ổn đònh thuốc già hóa cấp tốc Phương pháp có tính chất hỗ trợ cho công việc nghiên cứu, bao gồm bước sau: - Lập quy trình đánh gía thời gian nhiệt độ Điều kiện bình thường Việt Nam 27 0C; độ ẩm tương đối 70% - Chọn điều kiện bảo quản + 400C ± 20C độ ẩm tương đối 70%± 5% + 600C ± 20C độ ẩm tương đối 70% ± 5% Chu kỳ đánh giá: 01; 03 ; 06 tháng cho nhiệt độ - Cho thuốc vào tủ vi khí hậu - Đặt nhiệt độ - Kiểm tra mẫu theo đònh kỳ Tiến hành phân tích mối tương quan hàm lượng mẫu khảo sát thời gian bảo quản thực nghiệm xây dựng phương trình hồi qui tuyến tính Y = aX + b Trong : Y hàm lượng lại mẫu khảo sát X thời gian bảo quản thực nghiệm Từ gia ùtrò thu thí nghiệm ta tính giá trò K nhiệt độ khác (K 40 log K40, K60 log K60) Để có giá trò K ta cần phải áp dụng phương pháp toán học bình phương tối thiểu Lập bảng tương quan logK 1/T Xây dựng đường biễu diễn logK=f(1/T) ( T: tính theo độ K ) Từ đường biểu diễn ta suy giá trò logK tương ứng với t=27 0C Suy ra: t90 =0,1053/ K (270C nhiệt độ trung bình điều kiện khí hậu ) Hay tính K dựa theo phương trình Arhenius suy t 90 - Xử lý kết quả: + Giá trò tuổi thọ thuốc kết tính trung bình lô khảo sát Trong giá trò thu nếu: + Giá trò tuổi thọ chênh lệch vượt 180ngày ta loại bỏ giá trò tuổi thọ nhiệt độ cao + Tuổi thọ lô lệch ≤ 60 ngày tính tuổi thọ trung bình theo cách thông thường + Tuổi thọ lô chênh lệch ≥ 60ngày lấy giá trò nhỏ làm kết tính toán - Nếu thời gian mẫu thuốc để từ ngày sản xuất đến ngày thực nghiệm già hoá 30 ngày, ta cần cộng thêm vào kết số ngày tuổi thọ bảo quản nhiệt độ bình thøng - Nhận xét : + Kết khảo sát điều kiện thường có giá trò tin cậy việc theo dõi độ ổn đònh phải tiếp tục thực triển khai sản xuất + Khi có thay đổi công thức hay qui trình phải tiến hành trở lại bước ban đầu - Ta tính nhiệt độ thích hợp bảo quản cho phép đảm bảo tuổi thọ mong muốn 5.Kết luận: Dựa kết liệu nghiên cứu, xác đònh điều kiện bảo quản tuổi thọ sản phẩm 6.Tên chức danh người chòu trách nhiệm III Trang thiết bò sử dụng phương pháp kiểm nghiệm : Tủ lưu mẫu điều kiện bình thường tủ vi khí hậu Phương pháp kiểm : nghiệm theo tiêu chuẩn DĐVN III IV Kết nghiên cứu : Kết ghi “ Báo cáo độ ổn đònh chất lượng sản phẩm “ Họ tên : Phạm Hoàng Lâm Lớp Cao học 2002 DƯC TP HCM KHOA DƯC TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y PROTOCOL NGHIÊN CỨU ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN NÉN PARACETAMOL 100MG, 325MG, 500MG 1- Mục tiêu: Mục tiêu nghiên cứu độ ổn đònh thuốc xác đònh : - Độ ổn đònh thuốc chất lượng thuốc (kiểm tra giới hạn sản phẩm phân hủy) - Tuổi thọ, hạn dùng thuốc điều kiện bảo quản - Các điều kiện bảo quản tốt cho sản phẩm 2- Nội dung: 2.1- Thông tin sản phẩm: - Tên chế phẩm : Viên nén Paracetamol 100mg, 325mg, 500mg - Qui cách đóng gói : viên nén, tròn, màu trắng, đóng chai nhựa PS màu trắng đục, đóng vỉ nhựa 10 viên 2.2- Điều kiện bảo quản: - Khảo sát dài hạn 27 oC ± oC độ ẩm tương đối (RH) 60% ± 5% phòng điều chỉnh nhiệt độ độ ẩm tương đối - Khảo sát tăng tốc điều kiện sau: + Nhiệt độ 60oC ± oC với độ ẩm tương đối 70% ± 5% + Nhiệt độ 40oC ± 20C với độ ẩm tương đối 70% ± 5% Trong tủ vi khí hậu trì nhiệt độ bảo quản, độ ẩm cần thiết ngăn ngừa ảnh hưởng ánh sáng 2.3- Số lô khảo nghiệm: - Chọn lô phân tích : Lấy mẫu ngẫu nhiên thành phẩm 03 lô sản xuất - Số lô xát hạt : A1, A2 , A3 - Dập viên : 100mg, 325mg, 500mg - Nhóm mẫu thử : T1, T2, T3 - Bao gói: P1, P2, P3 (Para.500mg vó 10 viên; Para 325mg chai 80 viên; Para.100mg chai 100 viên) - Thử nghiệm tiến hành 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 tháng 2.3.1- Ma trận mẫu thử nghiệm: Lô xát hạt A1 A2 A3 Hàm lượng(mg) 100 325 500 100 325 500 100 325 500 T1 P1 P2 P3 P3 P1 P2 P2 P3 P1 Nhóm bao gói T2 P2 P3 P1 P1 P2 P3 P3 P1 P2 T3 P3 P1 P2 P2 P3 P1 P1 P2 P3 2.3.2- Ma trận dự kiến: Nhóm Thời gian thử (tháng) thử T1 12 36 T2 18 36 T3 24 36 Tổng số mẫu thử nghiệm 108 (mẫu) 2.4-Phương pháp thử nghiệm: 2.4.1- Khảo sát độ ổn đònh mẫu thuốc lưu điều kiện bình thường: Nhiệt độ 27oC ± oC độ ẩm tương đối 60% ± 5% 2.4.1.1- Kiểm tra ghi lại kết mẫu ban đầu theo tiêu chuẩn DĐVN III tiêu - Cảm quan : viên màu trắng, không mùi - Đònh tính : phổ hồng ngoại, đo điểm chảy - Thời gian rã : không 15 phút - Độ hòa tan : không 75% hàm lượng Paracetamol so với hàm lượng ghi nhãn hòa tan 45 phút (DĐVN III) - Sản phẩm phân hủy : phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) - Tạp chất liên quan : phương pháp sắc ký lớp mỏng - Đònh lượng : phương pháp đo quang môi trường kiềm ởλ =257nm + Đối với viên nén 100mg hàm lượng từ 90% - 110% so với hàm lượng ghi nhãn + Đối với viên nén 325mg 500mg hàm lượng từ 95% -105% so với hàm lượng ghi nhãn Tất mẫu thử nghiệm phải đạt tiêu chuẩn 2.4.1.2- Cho thuốc vào tủ lưu mẫu, đònh kỳ kiểm tra mẫu lưu ghi lại kết - Khảo sát ngắn hạn (0, 1, 2, 3, 4, 6) tháng - Khảo sát dài hạn (0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36) tháng 2.4.1.3- Tính tuổi thọ thuốc từ đường biểu diễn phụ thuộc hàm lượng hoạt chất ( %) theo thời gian (ngày) - Lập bảng tương quan hàm lượng hoạt chất (%) thời gian (ngày) - Vẽ đường biểu diễn phụ thuộc hàm lượng hoạt chất (%) theo thời gian - Tính t 90 từ đường biểu diễn 2.4.1.4- Tính tuổi thọ thuốc từ số liệu thực nghiệm: p dụng công thức : T90 =0,1053/ K Trong K xác đònh công thức: K= -2,303 x log(D/Do)/t Do : Hàm lượng ban đầu D : Hàm lượng lại 2.4.2- Khảo sát độ ổn đònh thuốc phương pháp già hóa cấp tốc: Song song với việc nghiên cứu độ ổn đònh thuốc mẫu lưu điều kiện bình thường việc xác đònh độ ổn đònh thuốc già hóa cấp tốc Phương pháp có tính chất hỗ trợ cho công việc nghiên cứu, bao gồm bước sau: - Lập quy trình đánh giá thời gian nhiệt độ + Điều kiện bình thường Việt Nam 27 0C, độ ẩm tương đối 70% + Chọn điều kiện bảo quản: * 400C ± 20C độ ẩm tương đối 70%± 5% * 600C ± 20C độ ẩm tương đối 70% ± 5% Chu kỳ đánh giá: 01, 03, 06 tháng cho nhiệt độ - Cho thuốc vào tủ vi khí hậu - Đặt nhiệt độ - Kiểm tra mẫu theo đònh kỳ Tiến hành phân tích mối tương quan hàm lượng mẫu khảo sát thời gian bảo quản thực nghiệm xây dựng phương trình hồi qui tuyến tính Y = aX + b Trong : Y hàm lượng lại mẫu khảo sát X thời gian bảo quản thực nghiệm Từ giá trò thu thí nghiệm ta tính giá trò K nhiệt độ khác (K 40 log K40, K60 log K60) Để có giá trò K ta cần phải áp dụng phương pháp toán học bình phương tối thiểu Lập bảng tương quan logK 1/T Xây dựng đường biễu diễn logK=f(1/T) ( T: tính theo độ K) Từ đường biểu diễn ta suy giá trò logK tương ứng với t =27 C Suy ra: t90 =0,1053/ K (270C nhiệt độ trung bình điều kiện khí hậu ) Hay tính K dựa theo phương trình Arhenius suy t90 - Xử lý kết quả: Giá trò tuổi thọ thuốc kết tính trung bình lô khảo sát Trong giá trò thu nếu: + Giá trò tuổi thọ chênh lệch vượt 180 ngày ta loại bỏ giá trò tuổi thọ nhiệt độ cao + Tuổi thọ lô lệch ≤ 60 ngày tính tuổi thọ trung bình theo cách thông thường + Tuổi thọ lô chênh lệch ≥ 60 ngày lấy giá trò nhỏ làm kết tính toán + Nếu thời gian mẫu thuốc để từ ngày sản xuất đến ngày thực nghiệm già hoá 30 ngày, ta cần cộng thêm vào kết số ngày tuổi thọ bảo quản nhiệt độ bình thøng - Nhận xét : + Kết khảo sát điều kiện thường có giá trò tin cậy việc theo dõi độ ổn đònh phải tiếp tục thực triển khai sản xuất + Khi có thay đổi công thức hay qui trình phải tiến hành trở lại bước ban đầu + Ta tính nhiệt độ thích hợp bảo quản cho phép đảm bảo tuổi thọ mong muốn 2.5- Kết luận: Dựa kết liệu nghiên cứu, xác đònh điều kiện bảo quản tuổi thọ sản phẩm 2.6- Tên chức danh người chòu trách nhiệm: 3- Trang thiết bò sử dụng phương pháp kiểm nghiệm: - Tủ lưu mẫu điều kiện bình thường tủ vi khí hậu - Phương pháp kiểm nghiệm: theo tiêu chuẩn DĐVN III 4- Kết nghiên cứu : Kết ghi “ Báo cáo độ ổn đònh chất lượng sản phẩm “ ... sinh học: DMP- MP có nhiều sản phẩm dành cho da tóc có chứa Collagene, có tác dụng làm ẩm da tạo màng bảo vệ cho da 2.2 – NGHIÊN CỨU THỊ TRƯỜNG VỀ CÁCH SỬ DỤNG DMP TRONG ĐIỀU TRỊ MTC VÀ NNTP Qua... : 1/4350 12oC - Tác dụng: có tác dụng kháng khuẩn giống paraben khác - Ứng dụng: Propyl paraben sử dụng rộng rãi chất bảo quản mỹ phẩm, thực phẩm, dược phẩm - Nồng độ sử dụng: Propylparaben... Tác dụng: tạo lớp áo, tá dược dính, tác nhân tăng độ nhớt, chất gây thấm - Ứng dụng sử dụng nhiều ngành dược, thuốc nhỏ mặt, tá dược bao phim cho viên nén Dùng nhiều mỹ phẩm - Nồng độ sử dụng: