Nghiên cứu chiết tách và xác định hợp chất wedelolactone từ cây cỏ mực ở đà nẵng

MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài Từ xƣa đến nay, việc sử dụng các cây cỏ làm thuốc quý đóng vai trò hết sức quan trọng trong đời sống con ngƣời. Ngày nay với nền kinh tế phát triển mạnh mẽ, mục tiêu sức khỏe con ngƣời ngày càng đƣợc đề cao nên việc phân lập những hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học từ cây cỏ là một việc rất quan trọng. Nó đƣợc ứng dụng sản thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghệp thực phẩm và mỹ phẩm. Nƣớc ta là nƣớc có khí hậu nhiệt đới gió mùa, đây là điều kiện rất thuận lợi cho sự phát triển của các cây dƣợc liệu quý. Theo các số liệu thống kê mới nhất, thảm thực vật Việt Nam – nguồn tài nguyên sinh học quý giá – có trên 12000 loài, trong số đó có tới hơn 3200 loài đƣợc sử dụng làm thuốc hay thực phẩm chức năng trong y học dân gian. Đây là một lợi thế to lớn đối với ngành công nghiệp hóa dƣợc nƣớc ta. Cây Cỏ mực đƣợc sử dụng nhiều trong các bài thuốc dân gian. Nó là một loài cỏ mọc hoang ở khắp nơi nhƣ Ấn Độ, Pakistan, Việt Nam, Trung Quốc và các quốc gia vùng Nam Á. Cỏ mực là một cây thuốc nam tốt chữa trị xuất huyết nội tạng nhƣ: ho ra máu, xuất huyết ruột, chảy máu răng, nƣớu, lợi, trị sƣng gan, sƣng bàng quang, sƣng đƣờng tiểu, trị mụn nhọt đầu đinh, bó ngoài giúp liền xƣơng. Cỏ mực gồm nhiều thành phần hóa học nhƣ dẫn chất thiophen, terthienyl aldehyd ecliptal, wedelolacton, stigmasterol, sitosterol, glucosid khung olean, tinh dầu, chất đắng, alkaloid (Nicotin, Ecliptin). Trong đó, hợp chất đƣợc biết đến nhiều nhất trong Cỏ mực là Wedelolactone. Theo nghiên cứu của các nhà khoa học ở các nƣớc Châu Á, hợp chất wedelolacton có khả năng trị độc do rắn cắn và kháng khuẩn. Việc nghiên cứu về những mặt tác dụng sinh học của hợp chất wedelolactone nói riêng và cây Cỏ mực nói chung rất phổ biến ở các nƣớc ngoài đặc biệt là Trung Quốc, Ấn Độ, Pakistan, Thái Lan … Nhƣng ở Việt Nam có rất công trình nghiên cứu về loại cây này. Để góp phần nghiên cứu về cây cỏ mực ở Việt Nam cũng nhƣ trên thế giới em đã quyết định chọn đề tài : ― NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH HỢP CHẤT WEDELOLACTONE TỪ CÂY CỎ MỰC Ở ĐÀ NẴNG ‖

1 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA    NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH HỢP CHẤT WEDELOLACTONE TỪ CÂY CỎ MỰC Ở ĐÀ NẴNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Sinh viên thực hiện : Nguyễn Thị Thu Hƣơng Lớp : 08 – CHD Giáo viên hƣớng dẫn : GS.TS Đào Hùng Cƣờng 2 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƢỜNG ĐHSP Độc lập – Tự do – Hạnh phúc KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ và tên sinh viên : NGUYỄN THỊ THU HƢƠNG Lớp : 08CHD 1. Tên đề tài : “ Nghiên cứu chiết tách và xác định hợp chất Wedelolactone từ cây cỏ mực ở Đà Nẵng” 2. Nguyên liệu, dụng cụ, thiết bị Nguyên liệu : Cây cỏ mực Dụng cụ, thiết bị :  Máy đo điểm chảy (melting point) Buchi B450.  Các phổ 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HSQC, HMBC, COSY đƣợc ghi trên máy đo phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (NMR SPECTROMETER) Model DRX500 (tần số 500 MHz) BRUCKER AVANCE.  Hệ thống sắc ký lỏng siêu hiệu năng RSLC Ultimax 3000, Pump Ultimax RS3000 DLP 3600. Autosampler Ultimax RS3000, Ovencolumn Ultimax RS3000, Detector DAD RS3000 , Phần mềm điều khiển hệ thống RSLC Chromelion 7.0  Cột sắc ký phân tích Acclaim ®120 C18, 3μ 4,6x100 mm, hãng Dionex.  Cột sắc ký điều chế pha thuận Inox 25 x 300 mm, cột sắc ký điều chế pha thuận thủy tinh 15 x 450 mm . Hạt nhồi pha thuận silicagel cỡ hạt 0.040 - 0.063 mm Merck .  Bơm sắc ký lỏng hiệu năng cao Shimadzu LC10A, Japan, tốc độ dòng max 10 ml/phút  Sắc ký bản mỏng (TLC): Silicagel GF 60F 254 Merck.  Đèn soi bản mỏng bƣớc sóng 254 nm và 365 nm  Bể lắc siêu âm Elmasonic S 100 H 3  Tủ sấy Binder khoảng nhiệt độ 30-280 o C, lò nung Nabertherm Model b150 khoảng nhiệt độ nung 30-1100 o C. 3. Nội dung nghiên cứu :  Xác định độ ẩm của cây cỏ mực  Xác định hàm lƣợng tro của cây cỏ mực khô  Xác định hàm lƣợng một số kim loại nặng trong cây cỏ mực khô  Khảo sát các điều kiện chiết tối ƣu  Phân lập và tinh chế hợp chất wedelolactone  Đo phổ cộng hƣởng từ hạt nhân để xác định cấu trúc hóa học của hợp chất Wedelolactone trong cây cỏ mực. 4. Giáo viên hƣớng dẫn : Gs.Ts. ĐÀO HÙNG CƢỜNG 5. Ngày giao đề tài : 6. Ngày hoàn thành : Chủ nhiệm khoa Giáo viên hƣơng dẫn PGS. TS. LÊ TỰ HẢI GS.TS. ĐÀO HÙNG CƢỜNG Sinh viên đã hoàn thành và nộp khóa luận cho khoa ngày… tháng … năm … Kết quả điểm đánh giá :……………………. Đà nẵng, ngày… tháng … năm … CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG 4 MỤC LỤC Trang CHƢƠNG 1. TỔNG QUAN 1 1.1. Đại cƣơng về cỏ mực 1 1.1.1. Đặc điểm cây cỏ mực 1 1.1.2. Phân bố và sinh thái 4 1.1.3. Tác dụng dƣợc lý của cỏ mực 4 1.1.3.1. Y học dân gian 4 1.1.3.2. Y học và hóa sinh hiện đại 13 1.2. Một số công trình nghiên cứu về cây cỏ mực 15 1.2.1. Các công trình nghiên cứu tại Việt Nam 15 1.2.2. Các công trình nghiên cứu trên thế giới 16 1.2.2.1. Thành phần hóa học của Cỏ mực 16 1.2.2.2. Các nghiên cứu về hoạt tính sinh học 17 1.2.2.3. Các hợp chất tiêu biểu đã đƣợc cô lập từ Cỏ mực 17 CHƢƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1. Thiết bị và hóa chất 30 2.2. Nguyên liệu 31 2.2.1. Thu hái nguyên liệu 31 2.2.2. Xử lý mẫu nguyên liệu 31 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu 31 2.3.1. Xác định độ ẩm 31 2.3.2 Xác định hàm lƣợng tro của nguyên liệu 32 2.3.3. Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC ) 32 2.3.4. Phƣơng pháp phổ hấp thu nguyên tử (AAS) 33 2.3.5. Phƣơng pháp cộng hƣởng từ hạt nhân (NMR) 34 5 2.3.6. Khảo sát thành phần các chất chiết đƣợc trong một số loại dung môi, điều chế cao thô và phân lập, tinh chế các chất từ cao thô, xác định thành phần và cấu tạo chất tinh chế. 36 2.3.6.1. Khảo sát sơ bộ thành phần các chất chiết đƣợc trong các loại dung môi 36 2.3.6.2. Điều chế cao thô 36 2.3.6.3. Phân lập và tinh chế các chất từ cao EPE 37 2.3.6.4. Xác định thành phần và cấu tạo chất tinh chế 37 CHƢƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 3.1.Sơ đồ nghiên cứu 38 3.1.1. Sơ đồ khảo sát điều kiện chiết xuất 38 3.1.2 Sơ đồ phân lập, tinh chế các chất tinh khiết 39 3.2 Xử lý nguyên liệu 40 3.2.1. Thu hái nguyên liệu 40 3.2.2. Xử lý mẫu nguyên liệu 40 3.3. Xác đỊnh các chỈ tiêu 40 3.3.1. Xác định độ ẩm nguyên liệu 40 3.3.2 Xác định hàm lƣợng tro 41 3.3.3 Xác định hàm lƣợng kim loại nặng 42 3.4 Khảo sát thành phàn các chất chiết đƣợc trong các dung môi 43 3.4.1. Mục tiêu 43 3.4.2. Phƣơng pháp chiết 43 3.4.3. Tiến hành 43 3.4.4. Kết quả 44 3.5 Khảo sát tỷ lệ dung môi và khối lƣợng mẫu chiết 45 3.5.1. Mục tiêu 45 3.5.2. Tiến hành 45 3.5.3. Kết quả 46 3.6 Khảo sát thời gian chiết 47 6 3.6.1 Mục tiêu 47 3.6.2 Tiến hành 48 3.6.3 Kết quả 48 3.7 Chiết xuất, phân lập, tinh chế Wedelolactone 50 3.7.1 Mục tiêu 50 3.7.2 Thiết bị, dụng cụ, máy, hóa chất 50 3.7.3 Chiết xuất cao phân đoạn Ethyl acetat 51 3.7.4 Phân lập, tinh chế wedelolactone trong phân đoạn cao Ethyl Acetat 52 3.7.4.1 Phân lập trên cột sắc kí điều chế pha thuận 52 3.8 Xác định các đặc trƣng vật lý, định danh cấu trúc hóa học các hợp chất phân lập đƣợc. 54 3.8.1 Chất EPE1 54 3.8.1.1 Các đặc tính của EPPE1 54 3.8.1.2 Nhận danh cấu trúc EPE1 56 KẾT LUẬN 60 KIẾN NGHỊ 61 7 MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài Từ xƣa đến nay, việc sử dụng các cây cỏ làm thuốc quý đóng vai trò hết sức quan trọng trong đời sống con ngƣời. Ngày nay với nền kinh tế phát triển mạnh mẽ, mục tiêu sức khỏe con ngƣời ngày càng đƣợc đề cao nên việc phân lập những hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học từ cây cỏ là một việc rất quan trọng. Nó đƣợc ứng dụng sản thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghệp thực phẩm và mỹ phẩm. Nƣớc ta là nƣớc có khí hậu nhiệt đới gió mùa, đây là điều kiện rất thuận lợi cho sự phát triển của các cây dƣợc liệu quý. Theo các số liệu thống kê mới nhất, thảm thực vật Việt Nam – nguồn tài nguyên sinh học quý giá – có trên 12000 loài, trong số đó có tới hơn 3200 loài đƣợc sử dụng làm thuốc hay thực phẩm chức năng trong y học dân gian. Đây là một lợi thế to lớn đối với ngành công nghiệp hóa dƣợc nƣớc ta. Cây Cỏ mực đƣợc sử dụng nhiều trong các bài thuốc dân gian. Nó là một loài cỏ mọc hoang ở khắp nơi nhƣ Ấn Độ, Pakistan, Việt Nam, Trung Quốc và các quốc gia vùng Nam Á. Cỏ mực là một cây thuốc nam tốt chữa trị xuất huyết nội tạng nhƣ: ho ra máu, xuất huyết ruột, chảy máu răng, nƣớu, lợi, trị sƣng gan, sƣng bàng quang, sƣng đƣờng tiểu, trị mụn nhọt đầu đinh, bó ngoài giúp liền xƣơng. Cỏ mực gồm nhiều thành phần hóa học nhƣ dẫn chất thiophen, terthienyl aldehyd ecliptal, wedelolacton, stigmasterol, sitosterol, glucosid khung olean, tinh dầu, chất đắng, alkaloid (Nicotin, Ecliptin). Trong đó, hợp chất đƣợc biết đến nhiều nhất trong Cỏ mực là Wedelolactone. Theo nghiên cứu của các nhà khoa học ở các nƣớc Châu Á, hợp chất wedelolacton có khả năng trị độc do rắn cắn và kháng khuẩn. Việc nghiên cứu về những mặt tác dụng sinh học của hợp chất wedelolactone nói riêng và cây Cỏ mực nói chung rất phổ biến ở các nƣớc ngoài đặc biệt là Trung Quốc, Ấn Độ, Pakistan, Thái Lan … Nhƣng ở Việt Nam có rất công trình nghiên cứu về loại cây này. Để góp phần nghiên cứu về cây cỏ mực ở Việt Nam cũng nhƣ trên thế giới em đã quyết định chọn đề tài : ― NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ 8 XÁC ĐỊNH HỢP CHẤT WEDELOLACTONE TỪ CÂY CỎ MỰC Ở ĐÀ NẴNG ‖ 2. Mục tiêu nghiên cứu - Xây dựng qui trình chiết tách hợp chất wedelolactone. - Xác định cấu trúc của hợp chất wedelolactone. 3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu * Đối tƣợng nghiên cứu Cây Cỏ mực đƣợc thu hái ở Phố Đà nẵng . * Phạm vi nghiên cứu - Phần trên mặt đất của cây cỏ mực - Chiết tách, xác định hợp chất wedelolactone trong cây cỏ mực 4. Phƣơng pháp nghiên cứu - Nghiên cứu lý thuyết: phƣơng pháp tổng quan tài liệu về các tài liệu về đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hóa học, ứng dụng của cây Cỏ mực - Phƣơng pháp thực nghiệm:  Phƣơng pháp lấy mẫu, thu hái và xử lí mẫu.  Phƣơng pháp phân tích trọng lƣợng để xác định độ ẩm trong nguyên liệu tƣơi.  Áp dụng phƣơng pháp phân huỷ mẫu phân tích để khảo sát hàm lƣợng tro.  Phƣơng pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử (AAS) để xác định hàm lƣợng các kim loại nặng trong cây Cỏ mực  Phƣơng pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) để xác định ảnh hƣởng của các yếu tố nhƣ dung môi, tỉ lệ rắn lỏng, thời gian chiết. 9  Phƣơng pháp phổ cộng hƣởng từ hạt nhân để xác định cấu trúc hóa học của hợp chất wedelolactone có trong cây Cỏ mực. 5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 5.1. Ý nghĩa khoa học - Cung cấp những thông tin khoa học về quy trình chiết tách, xác định về thành phần và cấu tạo một số hợp chất trong cây cỏ mực. - Tạo tiền đề cho những nghiên cứu sâu hơn về cây Cỏ mực ở Việt Nam. 5.2. Ý nghĩa thực tiễn - Cung cấp qui trình chiết tách, phân lập tối ƣu hóa nhằm phân lập một số chất trong thành phần cây cỏ mực đạt độ tinh khiết cao . - Sử dụng chất phân lập đƣợc trong đề tài để định tính và định lƣợng hàm lƣợng chất đã biết trong cây cỏ mực, từ đó xây dựng tiêu chuẩn,chuẩn hóa chất lƣợng cho cây cỏ mực 6. BỐ CỤC LUẬN VĂN : Gồm 3 phần PHẦN MỞ ĐẦU 1- Lý do chọn đề tài 2- Mục tiêu nghiên cứu 3- Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu 4- Phƣơng pháp nghiên cứu 5- Nội dung nghiên cứu 6- Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 7- Bố cục luận văn PHẦN NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Chƣơng 1- Tổng quan lý thuyết Chƣơng 2- Thực nghiệm Chƣơng 3 – Kết quả và thảo luận PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 10 Chƣơng 1. TỔNG QUAN 1.1. ĐẠI CƢƠNG VỀ CỎ MỰC 1.1.1. Đặc điểm cây cỏ mực [1], [3], [ 5], [ 10], [ 11] Tên khoa học: Eclipta prostrata (L.) [Eclipta alba (L) Hassk.] Tên khác: Cỏ nhọ nồi, cỏ mực, hạn liên thảo, lệ trƣờng, phong trƣờng, mạy mỏ lắc nà (Tày), nhả cha chát (Thái). Tên nƣớc ngoài: Dyer’s weed, dye-weed, white eclipta (Anh), éclipta driote (Pháp). Họ: Cúc (Asteraceae) Mô tả cây cỏ mực: Cỏ mực, còn gọi là cỏ nhọ nồi, thuộc loại thân thảo hằng niên là một loại cỏ mọc bò, hoặc có khi gần nhƣ thẳng đứng có khi cao gần tới 80 cm. Hình 1.1: Cây cỏ mực Thân hình trụ, có khía dọc, dài khoảng 30-50 cm, đƣờng kính 2-5 cm. Mặt ngoài thân màu tím nâu nhạt và mang lông cứng, trắng. [...]... MỘT SỐ CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY CỎ MỰC 1.2.1 Các công trình nghiên cứu tại Việt Nam Mặc dù Cỏ mực là một dƣợc thảo đƣợc biết đến từ rất lâu tại Việt Nam nhƣng cho đến nay có rất ít công trình nghiên cứu về nó Hiện nay chƣa xác định đƣợc hết các hợp chất có trong cây Cỏ mực Thành phần chính của cây Cỏ mực là các triterpene, saponin, flavonoid và các dẫn xuất của coumestan 24 Hợp chất đƣợc biết đến... Kakali Datta và các cộng sự đã 27 khảo sát dịch chiết Eclipta alba có tiềm năng cho sự thúc đẩy mọc tóc [36] S Dalal và các cộng sự đã nghiên cứu Wedelolactone nhƣ là một chất kháng khuẩn chiết xuất từ Eclipta alba [60] Vanessa A Lenza và các cộng sự đã nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn của dịch chiết Ethanol từ Eclipta alba (L.) [77] Năm 2010, V K Lal và các cộng sự đã nghiên cứu lá và rễ của Eclipta... lần Cỏ mực đƣợc dùng ngoài làm thuốc sát trùng chữa các vết thƣơng và vết loét ở gia súc Các bài thuốc có Cỏ mực: Bảng 1.1 Các bài thuốc có Cỏ mực STT 1 BÀI THUỐC Chữa nhiệt THÀNH PHẦN Cỏ mực, mật ong CÁCH SỬ DỤNG Lấy lá, giã nát, ép lấy miệng mùa nƣớc cốt, hòa với ít mật nắng: ong Dùng bông thấm thuốc bôi vào chỗ sƣng đau, lở loét Ngày bôi 2 3 lần 2 Thổ huyết và Cỏ mực tƣơi chảy máu cam Dùng Cỏ mực. .. trong Cỏ mực là Wedelolactone Các dẫn xuất của Wedelolactone nhƣ Demethylwedelolactone, Isodemethylwedelolactone… đã đƣợc phân lập Một nghiên cứu của nhóm tác giả Đỗ Quỳnh Nhƣ về tác dụng của Cỏ mực đối với bệnh loét niêm mạc miệng cho thấy, Cỏ mực có tác dụng chống viêm Hoạt tính chống viêm của Cỏ mực tƣơng đƣơng với Pyralvex sau 15 phút sử dụng Tuy nhiên, khả năng làm lành vết loét của Cỏ mực không... Desmethylwedelolactone và khảo sát hoạt tính kháng oxi hóa và độc tính tế bào Kết quả cho thấy các chất do nhóm tác giả này phân lập đƣợc đều không có hoạt tính hoặc hoạt tính yếu [12] Võ Thanh Thúy cũng đã cô lập đƣợc một số chất từ cây Cỏ mực [14] Nhóm tác giả Trần Vũ Thiên, Phùng Văn Trung và Nguyễn Ngọc Hạnh đã phân lập đƣợc Wedelolactone, Echinocystic acid, Eclalbasaponin II từ cây Cỏ mực [13] Ngoài ra, trong Cỏ mực. .. lại bao hoa và trục cụm hoa Cây ra hoa từ tháng 7 đến tháng 9 Hình 1.4: Hoa cỏ mực Quả đóng hình trái xoan hơi dẹp, đầu cụt, có màu đen, dài 3 mm, rộng 1-1,5 mm Quả từ tháng 9 đến tháng 10 Hình 1.5: Quả cỏ mực Cây rất đa dạng Thân có thể thắt lại ở mấu và phình ra ở dóng Lá có khi to bản, hình bầu dục hoặc hình trứng 13 1.1.2 Phân bố và sinh thái [3] Chi Eclipta L chỉ có một loài là cây Cỏ mực mọc tập... phẩm siro và viên nén bào chế từ cao Cỏ mực đã đƣợc áp dụng cho 500 bệnh nhân và theo dõi kết quả điều trị tại bệnh viện và nhà hộ sinh cho thấy các tác dụng sau: Cầm máu tốt và trong vài trƣờng hợp cá biệt, tác dụng này của Cỏ mực thể hiện rõ rệt hơn cả tác dụng của vitamin K Nâng cao tổng hợp lƣợng prothrombin trong máu rõ rệt trong trƣờng hợp suy gan Chống viêm nhiễm trong các trƣờng hợp cảm sốt,... mọc chồi gốc và phân cành nhiều, cây dễ dàng phát triển, tạo thành đám bò lan trên mặt đất Ngoài việc thu hái từ nguồn hoang dại, trƣớc đây Cỏ mực chỉ đƣợc trồng lẻ tẻ với quy mô ở các gia đình Gần đây, cây đã bắt đầu đƣợc trồng phổ biến hơn ở một số nơi Cỏ mực đƣợc nhân giống bằng hạt Hạt Cỏ mực rất nhỏ nhƣng tỷ lệ nảy mầm cao Thƣờng áp dụng cách gieo hạt trong vƣờn ƣơm, sau đó đánh cây con đem trồng... cồn và cao nƣớc của Cỏ mực trên đƣờng huyết và đƣa đến kết quả là cao chiết cồn 45 của Cỏ mực có tác dụng làm hạ đƣờng huyết trên mô hình gây quá tải glucose, với thời gian có tác dụng là 90 phút sau khi uống và liều có tác dụng là 0,5g/kg thể trọng [9] Về thành phần hóa học, các tác giả ở Việt Nam nhƣ Nguyễn Thị Việt Thanh, Nguyễn Văn Đậu đã cô lập ba chất là Luteolin, Wedelolactone và Desmethylwedelolactone... lá và rễ của Eclipta alba (L.) trong bảo vệ gan [75] 1.2.2.3 Các hợp chất tiêu biểu đã được cô lập từ Cỏ mực Bảng 1.2 Các hợp chất tiêu biểu đã được cô lập từ Cỏ mực TÊN GỌI STT CTPT CTHH GHI CHÚ Wedelolactone[ 23], C16H10O7,  Chất bột [81] M = 314 màu xám (5,11,12- 1 đvC H3CO O trắng, tinh O Trihydroxy-7OH methoxycoumestan; thể màu vàng xanh OH O 1,8,9-Trihydroxy-3- OH methoxycoumestan) (MeOH)  Mp . TÁCH VÀ 8 XÁC ĐỊNH HỢP CHẤT WEDELOLACTONE TỪ CÂY CỎ MỰC Ở ĐÀ NẴNG ‖ 2. Mục tiêu nghiên cứu - Xây dựng qui trình chiết tách hợp chất wedelolactone. - Xác định cấu trúc của hợp chất wedelolactone. . tƣợng và phạm vi nghiên cứu * Đối tƣợng nghiên cứu Cây Cỏ mực đƣợc thu hái ở Phố Đà nẵng . * Phạm vi nghiên cứu - Phần trên mặt đất của cây cỏ mực - Chiết tách, xác định hợp chất wedelolactone. 08CHD 1. Tên đề tài : “ Nghiên cứu chiết tách và xác định hợp chất Wedelolactone từ cây cỏ mực ở Đà Nẵng 2. Nguyên liệu, dụng cụ, thiết bị Nguyên liệu : Cây cỏ mực Dụng cụ, thiết bị : 