nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết lá cây muống biển

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA ---  --- NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT LÁ CÂY MUỐNG BIỂN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA H

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM

KHOA HÓA -   -

NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH

VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT LÁ CÂY MUỐNG BIỂN

KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC

GVHD : ThS Võ Kim Thành SVTH : Ngô Thị Thu Hiền LỚP : 08CHD

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM Độc lập – Tự do – Hạnh phúc

NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP

1 Tên đề tài: Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết lá cây muống biển

2 Nguyên liệu, dụng cụ và thiết bị:

- Nguyên liệu: Lá cây muống biển

- Dụng cụ: Bộ chiết soxhlet, phễu lọc, bình định mức, cốc thủy tinh, bình tam giác…

- Thiết bị: Tủ sấy, lò nung, máy sắc ký khí ghép khối khối phổ GC-MS, máy quang phổ hấp thụ phân tử UV-VIS…

3 Nội dung nghiên cứu:

- Xác định một số chỉ số hóa lý của nguyên liệu lá cây muống biển như độ ẩm, hàm lượng tro và hàm lượng kim loại nặng

- Nghiên cứu quy trình chiết tách lá muống biển bằng phương pháp chiết ngấm kiệt và chiết soxhlet

- Khảo sát các điều kiện chiết tách: lựa chọn dung môi chiết, thời gian chiết, tỉ

lệ rắn - lỏng

- Định danh một số thành phần hóa học chính trong dịch chiết lá cây muống biển

- Thử nghiệm hoạt tính sinh học của dịch chiết lá cây muống biển

4 Giáo viên hướng dẫn: ThS Võ Kim Thành

5 Ngày giao đề tài: 10/2011

6 Ngày hoàn thành: 05/2012

Sinh viên đã hoàn thành và nộp báo cáo về cho Khoa ngày tháng năm 2012

Ngày … tháng … năm 2012

CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG

(Ký & ghi rõ họ tên)

LỜI CẢM ƠN

Trước tiên, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc nhất đến thầy giáo Th.S Võ Kim Thành – người đã tận tình hướng dẫn em trong suốt quá trình thực hiện khóa luận tốt nghiệp

Em xin bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc đến quý thầy cô giáo Khoa Hóa – Trường Đại học Sư phạm Đà Nẵng đã giảng dạy em trong bốn năm qua, những kiến thức bổ ích trên giảng đường đại học sẽ là hành trang giúp em vững bước trong tương lai

Em xin chân thành cảm ơn cha mẹ, bạn bè đã luôn động viên và giúp đỡ em trong quá trình học tập và thực hiện khóa luận tốt nghiệp này

Cuối cùng, em xin gửi đến mọi người lời chúc sức khỏe, hạnh phúc và thành đạt

Đà Nẵng, ngày … tháng … năm 2012

Ngô Thị Thu Hiền

PHỤ LỤC

TÀI LIỆU THAM KHẢO

1 Bộ môn Dược liệu trường Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh, Bài

giảng Dược liệu I, 1998

2 Bộ Y tế, Dược điển Việt Nam II (tập 3), NXB Hà Nội, 2008

3 Đái Duy Ban, Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phòng chống

một số bệnh cho người và động vật, NXB KHTN và CN, Hà Nội, 2008

4 Đỗ Tất Lợi, Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội,

8 PGS.TS Nguyễn Thị Ngọc Ẩn, GS.TS Nguyễn Kim Phi Phụng, Vương Trần

Thái, Lâm Vương Thảo; Nghiên cứu thành phần hóa học của Rau Muống biển

(Ipomoea pes- caprae (L.) Sweet) và tính sát khuẩn của Rau Muống Biển; Khoa

12 Võ Văn Chi, Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, 1999

13 Viện Dược liệu, Kỹ thuật chiết xuất dược liệu, NXB Khoa học và kỹ thuật,

Hà Nội, 2008

14 TS Võ Văn Chi, Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, 1999

15 Abeysinghe, PD 2010; Antibacterial activity of some medicinal mangroves

against resistant pathogenic bacteria Indian Journa; Pharmaceutical Sciences

72(2):167-172

16 Ashish Manigaunha, Morning glory: A new thirst in-search of de-novo

therapeutic approach, International Journal of Phytomedicine 2, 2010

17 Krogh R., Berti C., Madeira AO, Souza MM, Cechinel V., Delle-Monache F

& Yunes, RA 1999; Isolation and identification of compounds with antinociceptive

action from Ipomoea pes-caprae L R.; Pharmazie 54(6): 464-466

18 Pongprayoon U., Bohlin L., Soonthornsaratune P & Wasuwat S 1991

Anti-inflammatory activity of Ipomoea-pes-caprae L.; Phytotherapy Research 5(2):

63-66

19 Pongprayoon, U., Baeckstrom, P., Jacobsson, U., Lindstorm, M & Bohlin,

L 1991; Compounds inhibiting prostaglandin synthesis isolated from

Ipomoea-pes-caprae; Planta Medica 57

20 Pongprayoon U., Bohlin L., Sandberg F., Wasuwat S., Inhibitory effect of

extract of Ipomoea pes-caprae on guinea-pig ileal smooth muscle; Acta Pharm

Nord, 1 (1) :41-44 năm 1989

21 Pongprayoon U., Baeckström P.; Antispasmodic activity of

beta-damascenone and E-phytol isolated from Ipomoea pes-caprae; Planta Med 58, Feb,

1992

22 Souza MM, Madeira AO, Berti C., Krogh R., Yunes RA, Cechinel-Filho V.;

Antinociceptive properties of the methanolic extract obtained from Ipomoea caprae (L.) R Br; Ethnopharmacol J, 69:85-90, 2000

pes-23 Teramachi F, Koyano T, Kowithayakorn T, Hayashi M, Komiyama K,

Ishibashi M; Collagenase inhibitory quinic acid esters from Ipomoea pes-caprae;

Graduate School of Pharmaceutical Sciences; Chiba University, 1-33 Yayoi-cho,

Inage-ku, Chiba 263-8522, Japan

24 http://en.wikipedia.org/wiki/Ipomoea pes-caprae

25 bien-tri-di-ung-do-con-sua.html

http://www.khoahocphothong.com.vn/newspaper/detail/10485/rau-muong-26 dap

http://www.thuocvuonnha.com/c/muong-bien-than-duoc-giai-doc-sua/hoi-27 http://www.sms.si.edu / irlspec / Ipomoea_pesCap.htm

28 http://www.uphcm.edu.vn/caythuoc/index.php?q=node/228

29 xoang.35CF28DB.html

http://yume.vn/cherrynguyentran/article/rau-muong-bien-co-the-chua-viem-MỞ ĐẦU

1 Lý do chọn đề tài

Cây muống biển có tên hoa học là Ipomoea pes-caprae (L.), thuộc họ hoai lang Convolvulaceae Cây này giống rau muống nhưng mọc ngoài biển và hông ăn

được nên được gọi là muống biển hay bìm chân dê thay vì rau muống biển

Cây muống biển phân bố ở các nước nhiệt đới như Ấn Độ, Thái Lan, Brazil, Indonesia, Malaysia, Philippines, Trung Quốc Ở Việt Nam cây mọc hoang ở các

bờ biển rất nhiều và có thể trồng cây bằng cách dâm cành Ngoài công dụng cố định cát biển, cây muống biển c n được d ng làm thuốc trong y học Cây có tác dụng như tr tê thấp, tiêu viêm, chống dị ứng, chống co thắt, lợi tiêu hóa, lợi tiểu, nhuận tràng, trị chảy máu, trị bỏng, trị ngộ độc sứa biển, trị rắn cắn Bộ phận sử dụng là

lá, rễ hoặc toàn cây

Trên thế giới, một số nước đã có những nghiên cứu tổng quan về cây muống biển Tuy nhiên ở Việt Nam việc nghiên cứu chỉ bước đầu định danh, phân tích đặc điểm sinh thái chứ chưa đi sâu vào nghiên cứu thành phần và khả năng chữa bệnh của loài cây này Để góp phần vào nguồn tài liệu về cây muống biển phục vụ nghiên

cứu khoa học, chúng tôi chọn đề tài: “Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết lá cây muống biển”

3 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu

- Đối tượng: Cây muống biển mọc ở bờ biển phường Hòa Khánh Nam, quận Liên Chiểu, thành phố Đà Nẵng

- Phạm vi: Lá cây muống biển

4 Phương pháp nghiên cứu

4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết

- Thu thập, phân tích, tổng hợp các tài liệu trong và ngoài nước có liên quan đến đề tài

- Học hỏi, trao đổi kinh nghiệm với chuyên gia, giảng viên và đồng nghiệp

4.2 Phương pháp thực nghiệm

- Phương pháp phân tích trọng lượng

- Phương pháp chiết tách hợp chất thiên nhiên

- Phương pháp phân tích vật lý

+ Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS

+ Phương pháp quang phổ hấp thụ phân tử UV - VIS

+ Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ GC – MS

- Phương pháp thử nghiệm hoạt tính sinh học

5 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN 1.1 Cây muống biển

1.1.1 Thực vật học

a Tên gọi

- Tên Khoa học: Ipomoea pes-caprae (L.) Sweet

- Tên Tiếng Việt: Cây muống biển, bìm chân dê, mã an đằng, nhị diệp hồng thự…

- Tên thường gặp ở các nơi hác: Adambu (Ấn Độ), Bayhops (Anh), Gubai morning face (Nhật Bản), Katang katang (Indonesia), Phakbung-thalae (Thái Lan), Tapak kuda (Malaysia), Beach Morning Glory, Goat's Foot…

b Phân loại khoa học

- Ngành: Ngọc Lan Magnoliophyta

- Lớp: Ngọc Lan Magnoliopsida

- Phân Lớp: Hoa Môi Lamiidae

- Bộ: Khoai lang Convolvulales

- Họ: Khoai lang Convolvulaceae

lá dài 4-6cm, rộng 5-7cm, hai mặt đều nhẵn Lá non có 2 mảnh cụp vào nhau Khi

ngắt lá có nhựa đục trắng chảy ra giống như nhựa khoai lang Dây mọc bò lan trên mặt đất; b đến đâu, rễ mọc đến đấy Hoa nở vào mùa hè và thu Hoa lớn, màu hồng tím, giống như hoa rau muống, mọc thành xim ít hoa ở kẻ lá, cuống chung dài 2-4cm, 5 nhị màu trắng đính vào cuối tràng hoa, bao phấn chia 2 ngăn nứt theo chiều dọc, tua nhị phình to phía dưới, có lông, bầu thượng Quả nang hình cầu, đường kính 2cm Hạt 4 đường ính 7mm, đẹp, màu hung

e Bộ phận dùng

Cây muống biển mọc ở bãi cát ven biển có tác dụng cố định cát biển vì rễ ăn vào

l ng đất, thân bò khắp nơi, thân b đến đâu rễ mọc đến đó Trong y học, bộ phận sử dụng chủ yếu là rễ, thân, lá hoặc toàn cây Đặc điểm bột dược liệu: Lá hái cành non, phơi hô, dạng bột màu xanh đậm; thân dạng bột màu nâu xám… Có thể d ng tươi, hoặc phơi, sấy khô dùng dần

Lá: Actinidol, ergomitrin, ergotamine, isoquercitrin, eugenol, iso-adenostylon, acid malic (acid fumaric, mellein), acid citric, acid tartaric, acid succinic…

cảm mạo, sốt, sốt rét, tê thấp, chân tay đau nhức, mỏi, thông tiểu tiện, chữa thuỷ thũng, đau bụng, viêm xoang Khi dùng ngoài, lá muống biển tươi giã nát d ng đắp lên các vết loét, mụn nhọt đang mưng mủ và cũng d ng trị rắn cắn, có thể phơi hô tán nhỏ rắc lên những nơi bị bỏng[4]

Ở Trung Quốc, người ta dùng toàn cây muống biển trị: Phong thấp, đau nhức khớp xương, đau ngang thắt lưng; mụn nhọt và viêm mủ da, trĩ xuất huyết, dùng trị rắn cắn, sứa biển chích Hạt trị đau bao tử Thân lá giúp phụ nữ bớt căng thẳng và mệt song có thể làm lạc thai

Ở Thái Lan, toàn cây muống biển dùng chữa các chỗ viêm mọc nhiều nơi trên thân hình do phong độc, bệnh ngoài da, viêm do dị ứng với sứa biển; hạt dùng chữa

cơ thể mệt mỏi; lá dùng khi bị ngứa do sứa biển chích bằng cách giả nát lá đắp lên chỗ bị dị ứng để trị chất độc của thịt sứa

Ở Ấn Độ, lá được d ng đắp ngoài trị tê thấp và đau bụng, dịch lá dùng trị bệnh

ph và đồng thời d ng lá giã nát đắp vào những phần bị phù

Ở Campuchia, dùng lá giã nhỏ, trộn với lá dây đau xương, củ sả và vỏ d a đốt lấy khói xông lên chỗ trĩ ở hậu môn

Và một số nước khác: Ở Úc dùng cây muống biển để trị nhức đầu, ở Pháp dùng cây làm thuốc lợi tiểu, ở Nigeria dùng cây trị viêm khớp…

b Kết quả nghiên cứu dược lý hiện đại

Các kết quả nghiên cứu hiện đại về cây muống biển thể hiện các tác dụng dược

lý như sau:

b 1 Tính kháng histamine

Cơ chế chống histamin: ức chế sự tổng hợp prostaglandin nên chống viêm, chống dị ứng, nhất là vì sứa chích và trấn luyến súc

Các nghiên cứu thử nghiệm cho thấy rằng:

- Cao nước toàn cây khô có tính chống dị ứng trên ruột non chuột lang

- Khi bị dị ứng do độc tố của sứa biển gây ra, có thể dùng:

+ Cao lá muống biển thoa lên chỗ dị ứng, triệu chứng dị ứng sẽ biến mất ở ngày thứ hai nếu thoa ngay sau khi tiếp xúc với độc tố

+ Trích tinh ether của tinh dầu cây muống biển cho tác dụng tương tự + Trường hợp vết thương lâu ngày, cần khoản 2 tuần để vết thương hô lại

và lành hẳn trong vòng một tháng

b 2 Tính chống co thắt

Các chiết xuất của Ipomoea pes caprae có hoạt động chống co thắt được chứng minh bằng khả năng ức chế cơn co thắt bởi spasmogen – histamine, acetylcholine, brady inin và bari clorua Cao nước trích t lá với liều 0.06mg/ml cho thấy tính chống co thắt trên ruột non của chuột lang Hai hợp chất trong loài cây này có tác động trực tiếp lên hồi tràng động vật là β-damascenone và E-phytol[21]

b 3 Tính diệt khuẩn

Các chiết xuất của Ipomoea pes- caprae chống lại vi khuẩn Bacillus subtilis, B pumilus, Micrococcus pumilus, Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus,

Pseudomonas aeruginoa, Klebsiella pneumoniae và Escherichia coli

Cao lá muống biển d ng các dung môi nước, ether, ether dầu hỏa, cồn 95% đều không có tác dụng với vi trùng Saphylpcoccus aureus khi thử trên ống nghiệm

b 4 Tính kháng viêm

Dùng ether trích phần bay hơi của lá và đắp lên chỗ chân bị phù do carageenin cũng như chỗ phù trên tai chuột do ethylphenylpropiolate hay acit arachidonic Tính chống viêm của cao ether tương đương với aspirin nhưng hông mạnh bằng indomethacin

Trong chiết xuất dầu thô của Ipomoea pes caprae có bốn hợp chất được xác định

là có tác dụng ức chế tổng hợp prostaglandin trong ống nghiệm Bốn hợp chất hydroxy-4,4,7-trimethyl-1(4H) naphthalenone, (-)-mellein, eugenol và 4-vinyl-guaiacol là hoạt đông chống viêm mạnh nhất Ngoài ra, còn rất nhiều hoạt chất khác như hydroalcoholic, axit betulinic, α và β-amyrinacetate, isoquercitrin… cũng có tác dụng mạnh không kém

2-b 5 Tính chống oxy hóa

Ipomoea pes-caprae là một trong những cây r ng ngập mặn được lựa chọn ở Ấn

Độ nghiên cứu về chất chống oxy hóa polyphenol

b 6 Chống tập kết tiểu cầu

Trong một nghiên cứu, Ipomoea pescaprae có các hoạt chất có thể làm tác nhân

ức chế tiểu cầu của con người ADP Tiêu biểu trong số đó phải kể đến [14C] hydroxytryptamine có hoạt động quan trọng trong tập kết tiểu cầu Các nghiên cứu này rất có ý nghĩa cho việc hướng phát triển các thuốc điều trị chống đông máu

c Một số bài thuốc cụ thể

Sau đây là một số bài thuốc chữa bệnh đơn giản được dùng trong dân gian:

- Tê thấp, ph thũng, khớp xương đau nhức: Dùng rễ và dây liều khoảng 45g, sắc nửa nước nửa rượu; chia 2-4 lần uống trong ngày

- Thấp khớp tạng khớp: Muống biển 30 - 45g, sắc nước uống

- Mụn nhọt và viêm mủ da: Muống biển 30-60g, sắc và thêm đường đỏ uống Bên ngoài d ng cây tươi giã nát đắp vào chỗ đau

- Trị chảy máu: Muống biển 30g, nấu với lòng lợn 300-350g chia 2 lần ăn như thức ăn trong ngày, liên tục 10 ngày (1 liệu trình), nếu chữa khỏi nghỉ 3-5 ngày lại tiếp tục 1 liệu trình khác

- Chữa trĩ xuất huyết: Hái lá non (mềm) nấu cháo Khi nấu cháo không cho mắm muối vào (vì lá này rất mặn); cháo gần chín, lá rau muống xắt nhỏ cho vào, khấy đều rồi nêm gia vị cho v a ăn Thấy lá chín thì tắt lửa Ăn vài lần là khỏi

- Chữa viêm xoang: Hái lá muống biển, rửa sạch cắt sợi nhỏ phơi thật khô Dùng giấy hút thuốc se rau muống biển thành điếu thuốc Đốt hút, hít khói của điếu thuốc rau muống này ngày 3 lần, làm khoảng 15 - 30 ngày các bệnh viêm xoang biến mất

- Chữa dị ứng bởi sứa biển: Hái lá muống biển tươi, giã nhuyễn, chế thêm chút nước, trộn đều, rồi vắt lấy nước cốt D ng nước cốt trên bôi khắp toàn thân sau khi tắm sạch sẽ

1.1.4 Tình hình nghiên cứu đề tài trên thế giới và trong nước

1.1.4.1 Trên thế giới

Ngày nay thế giới có xu hướng sử dụng nguồn nguyên liệu thiên nhiên để sản xuất và ứng dụng vào đời sống, chúng ta thấy thực vật được đặc biệt chú ý nghiên cứu vì đặc tính tự nhiên, ít gây tác dụng phụ của chúng Cây muống biển Ipomoea pes-caprae (L.) Sweet ngoài công dụng cố định cát biển c n được sử dụng để làm thuốc trong dân gian t lâu Cây mọc và phát triển trên đất cát, chịu được độ mặn của nước biển; có thể dễ dàng tìm thấy trên cát bờ biển của vùng nhiệt đới Đại Tây Dương, Thái Bình Dương và Ấn Độ Dương

Cây muống biển được phân loại trong thực vật học bởi Robert Brown – một nhà thực vật học người Scotland vào năm 1818 Bắt đầu các công trình khảo sát, điều tra sự phân bố; đánh giá về giá trị sử dụng của loài cây này được công bố rộng rãi[17], [21] Các nhà khoa học ở các nước Trung Quốc, Nhật Bản, Brazil, Thái Lan,

Ấn Độ…, đặc biệt là Pongprayoon U và các đồng nghiệp đã có rất nhiều công trình nghiên cứu về chiết tách, phân lập các hợp chất thiên nhiên trong cây muống biển[18],[20],[22] Theo sau đó là các đề tài thử nghiệm hoạt tính sinh học cây muống biển nhằm tìm ra hoạt chất có giá trị cao trong chữa bệnh[15],[16],[19] Các công trình nghiên cứu đi theo nhiều hướng hác nhau nhưng đều hướng đến mục đích phát huy hết công năng chữa bệnh của cây muống biển, ứng dụng đề tài vào thực tế và tạo tiền đề phát triển về sau

Quý”, lương y Huyên Thảo “Thuốc vườn nhà”… và DS Lê Văn Nhân một người

việt đang sinh sống ở California, Hoa Kỳ đã có những nghiên cứu về cây muống biển dựa trên nền y học cổ truyền Nhưng đây chỉ là một trong số ít các nghiên cứu

đi sâu vào hoạt động dược lý của các hoạt chất trong loài cây này C n đa phần các tài liệu nêu trên chỉ mới bước đầu định danh, phân tích đặc điểm sinh thái chứ chưa

đi sâu vào nghiên cứu thành phần và khả năng chữa bệnh của loài cây này[4],[7],[8],[11],[14]

1.1.5 Hiện trạng và tiềm n ng của cây muống biển

Việt Nam nằm trong v ng hí hậu nhiệt đới, lại có bờ biển dài suốt t Bắc vào Nam Điều iện thuận lợi này đem đến cho nước ta nguồn dược liệu muống biển dồi dào, có tác dụng tốt, dễ tìm Nhưng thực trạng hiện nay, việc xây dựng các hu nghỉ mát ven biển với quy mô lớn đã một phần nào đó tàn phá đi của quý mà thiên nhiên ban tặng, một loài cây có tác dụng giữ cát biển chống ăn m n lại là vị thuốc quý chữa bệnh Hơn thế nữa, iến thức người dân về những công dụng nó mang lại cho con người c n quá hạn hẹp Việc nghiên cứu chỉ d ng lại ở hảo sát, việc tuyên truyền bảo vệ nguồn dược liệu của các cấp có thẩm quyền lại ém Việc tận dụng những nguồn tài nguyên sẵn có đem lại lợi ích cho quốc gia là điều cấp thiết nhất Nếu con người nắm rõ tiềm năng đáng quý của loài cây này nói riêng và các dược liệu hác nói chung thì việc tạo nguồn nguyên liệu thuốc đảm bảo an ninh thuốc quốc gia sẽ hông phải nan giải như hiện tại

CHƯƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu

Lá cây muống biển Ipomoea pes-caprae (L.) được thu hái ở bờ biển phường Hòa

Khánh Nam, quận Liên Chiểu, TP Đà Nẵng

Hình 2.1 Bãi cây muống biển Hình 2.2 Lá muống biển tươi

Hình 2.3 Lá muống biển khô Hình 2.4 Bột lá muống biển khô

2.2 Hóa chất, dụng cụ và thiết bị thí nghiệm

- Thiết bị: Tủ sấy, lò nung, máy cất quay chân không, máy sắc ký khí ghép khối khối phổ GC-MS, máy quang phổ hấp thụ phân tử UV-VIS, máy quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS…

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.3.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết

- Thu thập, phân tích, tổng hợp các tài liệu trong và ngoài nước có liên quan đến đề tài

- Học hỏi, trao đổi kinh nghiệm với chuyên gia, giảng viên và đồng nghiệp

w 100

m

m(g): Khối lượng chung của nguyên liệu ban đầu

m0(g): Khối lượng của chất khô tuyệt đối

ω(%): Độ ẩm của nguyên liệu ẩm

sau: % 100

m

m

H  tro

Trong đó: m (g): Khối lượng nguyên liệu ban đầu

mtro(g): Khối lượng tro H(%): Hàm lượng tro của nguyên liệu

2.3.2.2 Phương pháp chiết tách hợp chất thiên nhiên

Để chọn một phương pháp chiết tách cho một nhóm hợp chất thiên nhiên có các vấn đề như sau:

- Ng ên i :

+ Thực vật học (mô tả, phân loại)

+ Thu hái phụ thuộc nhiều yếu tố: nhiệt độ, thời tiết, thời gian thu hái

+ Xử lý, bảo quản

- Dung môi:

+ Các loại dung môi:

 Dung môi phân cực: H2O, MeOH, EtOH…

 Dung môi hông phân cực: Ete, ete dầu hỏa, benzene, toluene, hexan…

 Hỗn hợp dung môi: Có những hợp chất tan trong dung môi này, không tan trong dung môi ia nhưng có những hợp chất tan được trong dung môi có tính phân cực trung bình Ví dụ: Ete: EtOH = 1:2, CHCl3: MeOH = 2:1…

+ Khảo sát sơ bộ dung môi: Sắp xếp dung môi theo sự tăng dần của tính phân cực, nhận xét dung môi nào h a tan được nhiều nhất Độ tan của dung môi biến thiên như sau: Ete dầu hỏa< Ete< CHCl3< EtOH< H2O

+ Yêu cầu dung môi: Dung môi phải có tính h a tan chọn lọc (h a tan cấu

tử cần tách, hông h a tan hoặc h a tan rất ít cấu tử cẩn tách), hông độc, rẻ, dễ tìm

và dễ thu hồi, hông làm thay đổi cấu trúc chất cần tách, hông tương tác với chất cần tách làm thay đổi tính chất hóa học, t y loại hợp chất mà chọn dung môi thích hợp

- ựa chọn thiết ị: Bền với nhiệt, hông bị ăn m n hóa học…

- ựa chọn phương pháp: Có nhiều phương pháp như chiết hồi lưu, chưng

cất lôi éo hơi nước, châm ninh, ngâm chiết (ngấm iệt, phân đoạn)… Trong đề tài này chủ yếu khảo sát hai phương pháp sau:

+ Phương pháp chiết ngấm kiệt

+ Phương pháp chiết soxhlet

Cả hai phương pháp trên đều thuộc phương pháp trích ly rắn - lỏng nhằm mục đích tách các cấu tử quý trong nguyên liệu; thu được dung dịch có các cấu tử cần tách, rồi t đó sẽ d ng các phương pháp hác để tách cấu tử ra khỏi dung môi; là một trong những phương pháp chủ yếu để phân tách một hỗn hợp đồng nhất thành các cấu tử thành phần