Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học trong dịch chiết etyl acetate của hạt muồng hoàng yến tại đà nẵng

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA HỌC BÙI TẤN MẾN NGHIÊN CỨU CHIẾT TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC TRONG DỊCH CHIẾT ETYL ACETATE CỦA HẠT MUỒNG HỒNG YẾN TẠI ĐÀ NẴNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC Đà Nẵng- Năm 2018 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA HỌC NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE TÁCH TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA HẠT MUỒNG HỒNG YẾN TẠI ĐÀ NẴNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC Sinh viên thực : Bùi Tấn Mến Lớp : 14CHD Giáo viên hướng dẫn : TS Trần Mạnh Lục Đà Nẵng-Năm 2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu kết nêu khóa luận tốt nghiệp trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả khóa luận tốt nghiệp Bùi Tấn Mến ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐHSP KHOA HÓA NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: Bùi Tấn Mến Lớp : 14CHD Tên đề tài: Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học dịch chiết etyl acetate hạt Muồng hoàng yến Đà Nẵng Nguyên liệu, dụng cụ thiết bị - Nguyên liệu: Qủa muồng hoàng yến thu hái Đà Nẵng - Dụng cụ, thiết bị: chiết chưng ninh, bình lắc, cột sắc kí, phễu chiết, ống đong, cốc, cân phân tích, bếp cách thủy, tủ sấy,… Nội dung nghiên cứu - Chiết mẫu phương pháp chưng ninh với Ethanol - Chiết phân bố dung môi Ethyl acetate - Xác định sơ thành phần hóa học dịch chiết phương pháp định tính - Xác định thành phần hóa học dịch chiết phương pháp GC – MS Giáo viên hướng dẫn: TS Trần Mạnh Lục Ngày giao đề tài: 06/06/2016 Ngày hoàn thành: 21/04/2018 Chủ nhiệm khoa PGS.TS Lê Tự Hải Giáo viên hướng dẫn TS Trần Mạnh Lục Sinh viên hoàn thành nộp báo cáo cho Khoa ngày 24 tháng 04 năm 2018 Kết điểm đánh giá:…… Đà Nẵng, ngày … tháng … năm 2018 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AAS : Atomic Absorption Spectrophotometric GC : Gas Chromatography MS : Mass Spectrometry STT : Số thứ tự TCCS : Tiêu chuẩn sở TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Tên hóa chất sử dụng 20 Bảng 2.2 Một số dung mơi chạy sắc kí mỏng 32 Bảng 3.1 Khối lượng cao chiết cao nước 44 Bảng 3.2 Thành phần hóa học phân đoạn cao etanol 45 Bảng 3.3 Thành phần nhóm chức cao chiết etyl acetate 47 Bảng 3.4 Tổng hợp kết định tính thành phần hóa học hạt Osaka 51 Bảng 3.5 Kết GCMS cao etyl acetate 52 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cassia grandis L Fl Cochinch [33] Hình 1.2 Cassa javanica L Holdridge & Poveda [35] Hình 1.3 Cassia fistulosa L K Larsen (Liên Chiểu, Đà Nẵng 6/2016) 10 Hình 1.4 Hexadecanoic acid; physcion; kaempferol 12 Hình 1.5 (-) epiafzelechin; (-) epicatechin; procyanidin B2 12 Hình 1.6 Rhamnetin-3-O-gentiobioside 13 Hình 1.7 3-formyl-1-hydroxy-8-methoxy-anthraquinone 13 Hình 1.8 1-hexacosanol; 1-octacosanol; Isovanillic acid 15 Hình 1.9 Một số hợp chất phân lập từ Muồng hoàng yến 16 Hình 1.10 Hai hợp chất phân lập từ dịch chiết EtOAc trái ô mai 17 Hình 1.11 Cơng thức cấu tạo hai hợp chất Kaempferol, Liquiritigenin 17 Hình 2.1 Cây Muồng hoàng yến Liên Chiểu, Đà Nẵng (6/2016) 19 Hình 2.2 Ngun liệu hạt Muồng hồng yến tươi 20 Hình 2.3 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm 22 Hình 2.4 Dịch chiết ethanol hạt Muồng hoàng yến sau lần chiết 23 Hình 2.5 Dịch chiết etyl acetate cao chiết tương ứng 24 Hình 2.6 Bản mỏng silicagel 32 Hình 2.7 Bình triển khai dạng hình khối trụ có nắp đậy 33 Hình 2.8 Kết chạy sắc kí mỏng với dung môi hexane; chloroform, dichlomethane, ethyl acetate (từ trái sang phải) 34 Hình 2.9 Kết chạy sắc kí mỏng với hệ dung hexan: ethyl acetate = 3:7, 4:6,5:5;6:4;7:3;8:2 (từ trái sang phải) 34 Hình 2.10 Cột sắc kí cao etyl acetate 37 Hình 2.11 Sơ đồ phân lập phân đoạn từ cao chiết etyl acetate 38 Hình 2.12 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHYC.EI1 với dung môi (benzene, hexan, etyl acetate, diclo metane, chloroform) 39 Hình 2.13 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHY.EI1 với hệ dung môi chloroform: benzene 40 Hình 2.14 Sắc kí cột phân đoạn MHY.EI1 40 Hình 2.15 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHYC.EI12 với dung môi ( hexan,benzene, etyl acetate, diclo metane, chloroform) 41 Hình 2.16 Sắc kí cột phân đoạn MHY.EI12 41 Hình 2.17 Kết sắc kí mỏng phân đoạn MHYC.EII11 với dung môi ( hexan,benzene, etyl acetate, diclo metane, chloroform) 42 Hình 2.18 Sắc kí cột phân đoạn MHY.EIII1 43 Hình 2.19 Sắc kí lớp mỏng với sáu dung môi đơn (hexane:benzene:diclometan:chloroform:etyl acetate:acetone) 43 Hình 3.1 Chiết lỏng–lỏng với dung mơi etyl acetate qua ba lần chiết 44 Hình 3.2 Sắc ký đồ GC phân đoạn cao etanol 45 H nh 3.3 ết chạ sắc ký ản mỏng với hệ dung môi he an eth l acetate 3:7, 4:6 , 5:5 ,6:4, 7:3, 8:2 (từ trái qua phải ước s ng nm .55 Hình 3.4 Các vết chất mỏng lọ LI.11 đến lọ LI.32 ( phân đoạn I) 55 Hình 3.5 Các vết chất mỏng lọ LI.33 đến LI.57( phân đoạn II ) 56 Hình 3.6 Các vết chất mỏng lọ LI.185 đến lọ LI.200(trong phân đoạn III) 56 Hình 3.7 Các vết chất mỏng phân đoạn EI1(LI.1-LI.32), EI2(LI.2LI.146), E3(LI.147-LI.200), EI4 57 Hình 3.8 Cột sắc ký (d=1.5 cm, h=45 cm) 57 Hình 3.9 Các vết chất mỏng lọ phân đoạn .58 Hình 3.10 Kết chấm mỏng phân đoạn 58 Hình 3.11 Các vết chất mỏng lọ LIII.1 đến LIII.151 thể vài phân đoạn 59 Hình 3.12 Chấm phân đoạn EIII1,EIII2,EIII3 59 Hình 3.13 thử dung mơi đơn c tính phân cực tang dần từ hexane, benzene, diclometane, chloroform, etyl acetate 60 Hình 3.14 Hình thể phân đoạn lọ từ LIV.1 đến LIV.91 60 Hình 3.15 Sắc kí mỏng phân đoạn EIV1 với hệ dung môi khác theo thứ tự(benzene, diclometan, hexane:etyl acetate = 4:6) 61 61 Hình 3.16 Sắc kí mỏng phân đoạn EIV1 với hệ dung môi khác theo thứ tự(benzene, diclometan, hexane:etyl acetate = 4:6) * Nhận xét: Kết hình 3.26 cho thấy phân đoạn EIV1 tinh khiết có chất khơng bị kéo vệt , chấm tròn,sang 3.5 Kết định danh thành phần hóa học chất phân đoạn EIV1 Sắc kí đồ GC phân đoạn EIV1 thể hình 3.17 Hình 3.17 Sắc ký đồ GC phân đoạn cao EIV1 Thành phần hóa học phân đoạn cao EIV1 định danh trình bày bảng 3.6 62 Bảng 3.6 Thành phần hóa học phân đoạn cao EIV1 Stt Thời gian lưu (phút) 6.391 8.465 10.688 12.781 Từ kết bảng 3.6 cho thấy phương pháp GC-MS định danh cấu tử cao EIV1 Các cấu tử có hàm lượng cao > 20% Dodecane (20.67%), tetradecane (23.57%) 63 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Qua trình nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học hạt Muồng hoàng yến thu hái Liên Chiểu-Đà Nẵng, đề tài thu kết sau: Tìm số lần chiết tối ưu cho trình chiết tách số hợp chất từ hạt Muồng hoàng yến phương pháp chiết kiệt với loại dung môi sau: Ethanol ( lần thứ 3), etyl acetate (lần thứ 3) Bằng phương pháp sắc ký khí kết hợp khối phổ xác định số thành phần hóa học dịch chiết từ hạt Muồng hoàng yến Từ dịch chiết: etyl acetate định danh tổng số 10 cấu tử, bao gồm acid hữu cơ, ester, steroid, dẫn xuất phenol, flavonoid Trong dịch chiết có chung số cấu tử hàm lượng cao gồm β-sitosterol; n-Hexadecanoic acid; Hexadecanoic acid, ethyl ester chúng có hoạt tính sinh học cao Phân lập số phân đoạn phương pháp sắc kí cột silicagel Kiến nghị - Tiếp tục nghiên cứu chiết tách, xác định thành phần hóa học hạt Muồng hồng yến dung môi khác thổ nhưỡng khác - Xác định hết thành phần chưa định danh phương pháp khác - Tiếp tục nghiên cứu chiết tách chất tinh khiết chất có hoạt tính sinh học cao có cơm Muồng hoàng yên để ứng dụng vào chăm sóc sức khỏe 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y tế (1998), Quyết định số 867/1998/QĐ-BYT việc ban hành Danh mục Tiêu chuẩn vệ sinh lương thực, thực phẩm, Hà Nội [2] Đái Duy Ban, Nguyễn Tiến Bân, Đoàn Cảnh, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Lân Dung, Đặng Huy Huỳnh, Nguyễn Đăng Khôi, Nguyễn Thị Lê, Phân Kế Lộc, Nguyễn Tài Lương, Lê Thị Muội, Phân Cự Nhân, Hoàng Đức Nhuận, Nguyễn Hữu Phụng, Ngô Kế Sương, Đặng Ngọc Thanh, Lê Xuân T , Nguyễn Văn Uyển (12-1997),“Các chi Cassia L., Chamaecrista moench Senna mill (Caesalpinioideae-Leguminosae) hệ thực vật Việt Nam”, Tạp chí Sinh học, 19 (4), tr 8-9 [3] Ngơ Quốc Ln, Lê Đỗ Huy, Đỗ Hồng Linh, Ngơ Khắc Không Minh Nguyễn Ngọc Hạnh (2013), “Phân lập nhận danh hai hợp chất từ dịch chiết etyl axetatcủa trái mơi ( Cassia grandis L.F)”, Tạp chí khoa học, Đại học Cần Thơ, 26(4), tr 30-34 [4] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Các phương pháp cô lập hợp chất tự nhiên, NXB Đại học Quốc gia TP HCM, tr – 73; 151 – 206; 323 [5] Phạm Thị Nhật Trinh , Lê Tiến Nhung, Đặng Thị Cẩm Nhung (2014), “Thành phần hóa học từ dịch chiết etyl axetat Muồng hồng yến”, Tạp chí Khoa học công nghệ, Đại học Cần Thơ, 4(31) [6] Viện dược liệu (2004), “Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam”, tập I, II, Nhà xuất khoa hoc kỹ thuật [7] Võ Thị Mai Hương (2009), “Thành phần hóa sinh khả kháng khuẩn dịch chiết Muồng trâu (Cassia alata L.)”, Tạp chí khoa học, Đại học Huế, (52) [8] Võ Thị Cham Pa (2014), “Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết Muồng hoàng yến ĐàNẵng”, luận văn 65 Thạc sĩ khoa học, Đại học Đà Nẵng [9] Anonymous (2007), The Wealth of India, First Supplement Series (Raw Materials), National Institute of Science Communication and Information Resources, CSIR, (1), pp 223-224 [10] Anonymous (2007), The Wealth of India, First Supplement Series (Raw Materials), National Institute of Science Communication and Information Resources, CSIR, (1), pp 158 [11] Lee Ching-Kuo, Lee Ping Hung, Yueh Kuo Hsiung (2001), Journal of the Chinese Chemical Society, 48(6A), pp 1053-1058 [12] M A Ali, M A Sayeed, Nurul (2004), Journal of the Chinese Chemical Society, 51(3), pp 647-654 [13] M A Sayeed, M A Ali, G R Khan, M S Rahman (1999), Bangladesh Journal of Scientific and Industrial Research, 34(1), pp 144-148 [14] Meena Rani, SB Kalidhar (1998), Indian Journal of Chemistry Section B, Organic including Medicinal, 37 (12), pp 1314-1315 [15] N.N Barthakur, NP Arnold, I Alli (1995), Plant Foods for Human Nutrition, 47 (1), pp 55-62 [16] O Tzakou, A Loukis, A Said (2007), Journal of Essential Oil Research, 19(4), pp 360-361 [17] P Sartorelli, C S Carvalho, J Q Reimao, M J P Ferreira, A G Tempone (2009), Parasitology Research, 104(2), pp 311-314 [18] RK Gupta (2010), Medicinal & Aromatic plants CBS publishers & distributors, 1st edition, pp 116-117 [19] RN Yadava, Vikash Verma (2003 ), Journal of Asian Natural Products Research, 5(1), pp 57-61 [20] T N Misra, R.S Singh, H S Pandey, B K Singh (1997), Fitoterapia, 68 (4), pp 375-376 66 [21] T N Misra, R S Singh, HS Pandey, Pandey R P (1996), Fitoterapia, 67 (2), ap 173-174 [22] V.k Mahesh, Rashmi Sharma, R.S Singh (1984), Journal of Natural Products, 47 (4), pp 733-751 [23] Yueh-Hsiung Kuo, Ping-Hung Lee, Yung-Shun Wein (2002), J Nat Prod, 65, ap 1165-1167 [24] Ramalakshmi S and Muthuchelian K (2009), International Journal of ChemTech 3(3), pp 1054-1059 [25] RN Chopra, SL Nayar, IC Chpora (2006), Glossary of Indian Medicinal Plants, National Institute of Science Communication and Information Rsource, pp 54 [26] The Ayurvedic Pharmacopoeia of India (2001), New Delhi, Government of India Publication, pp 8-9.Internet [27] http://en.wikipedia.org/wiki/Fabaceae (truy cập ngày 20 tháng năm 2016) [28] http://en.wikipedia.org/wiki/Phytosterol (truy cập ngày 20 tháng năm 2016) [29] http://en.wikipedia.org/wiki/Stigmasterol (truy cập ngày 20 tháng năm 2016) [30] http://vi.wikipedia.org/wiki/Muồng hoàng yến (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [31] http://vi.wikipedia.org/wiki/Muồng_hoa_đào (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [32] http://vi.wikipedia.org/wiki/Ơ_mơi (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [33] http://webbook.nist.gov/cgi/cbook.cgi?ID=57-10-3 (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [34] http://i.ebayimg.com/images/g/6LoAAOSwBLlVXP7G/s-l300.jpg (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) 67 [35]https://vi.wikipedia.org/wiki/Mu%E1%BB%93ng_hoa_%C4%91%C3%A0o#/ media/File:Muonghoadao1.JPG (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [36] http://thanhnien.vn/thoi-su/cay-gi-cung-ngam-ruou-gi-cung-uong-449700.html (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [37] http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma(truy cập ngày 21 tháng năm 2016) [38] http://www.vuonhoalan.net/default.asp?tab=detailnews&tin=434&title=kieu- lan-lan-bau-ruou-calanthe-va duoc-tinh (truy cập ngày 21 tháng năm 2016) PHỤ LỤC Khối phổ thành phần hóa học 2(3h)-furanone,5 methyl- N-nitrosoazacyclononane 2-n-propylphenol 2-amino-9-(3,4-dihydroxy-5-hydroxymethyl-tetrahydrofuran-2-yl)-3,9- dihydro-puri Mome inositol Hexadecanoic acid 9-octadecenoic acid 1,8-Dihydroxy-3-methylanthraquinone Cholest-5-en-3-ol(3b)-, (9Z)-9-octadecenoate (9CI) 10 Cholic acid 11 2-heptenal (z)- 12 trans-2-decenal 13 ,4-decadienal 14 Coumarin 15 cinnamyl acetate 16 n-docosane 17 1-chlorooctadecane 18 1-tetradecanol 19 n-nonadecane 20 heptacosane ...ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA HỌC NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE TÁCH TỪ TỔNG CAO ETHANOL CỦA HẠT MUỒNG HỒNG YẾN TẠI ĐÀ NẴNG KHĨA LUẬN TỐT... Trƣờng Đại học Sư phạm - Đại Học Đà Nẵng nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học số dịch chiết 18 Muồng hoàng yến Đà Nẵng qua hai phương pháp chiết song song chiết với dung môi: Petroleum... - Xác định thành phần hóa học dịch chiết etyl acetate từ hạt Muồng hoàng yến Nội dung nghiên cứu 3.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết - Tham khảo cơng trình nghiên cứu giới loài nghiên cứu -