Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học các hợp chất trong lá cà phê chè ở huyện krông păk, tỉnh đăk lăk

GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân MỞ ĐẦU 1. Tính cấp thiết của đề tài Cây cà phê chè có nguồn gốc từ Ethiopia, được trồng đầu tiên ở vùng châu Phi và Ả Rập. Sau đó cà phê chè được người Hà Lan đem trồng trên các miền đất thuộc địa của họ. Năm 1718, người Hà Lan mang cà phê chè tới Surinam, năm 1725 người Pháp mang tới Cayenne... Cuối thế kỷ 18 cà phê chè được trồng ở khắp các xứ sở nhiệt đới, chủ yếu do sự bành trướng thuộc địa của các đế quốc châu Âu. Cà phê chè sinh trưởng tốt nhất ở nơi có độ cao từ 500 – 2000m trên mực nước biển, nhiệt độ trung bình năm là 22 0 C, lượng mưa khoảng trên 1000mm. Cà phê chè thuộc giới Plantae, bộ Gentianales, họ Rubiaceae, chi Coffea, loài C. arabica. Ở Việt Nam cà phê chè được trồng chủ yếu ở các tỉnh miền núi phía Bắc như Tuyên Quang, Hà Giang, vùng Phủ Quỳ, Nghệ An và một phần nhỏ ở Đà Lạt, Lâm Đồng, Đăk Lăk. Hiện nay, nước ta đang khuyến khích phát triển cà phê chè ở Tây 3 SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Nghiên cứu cho thấy lá cà phê chè có chứa một số hợp chất có hoạt tính sinh học như 3ßhydroxilup12(13)en28oic, axit ursolic, cafein... Các chất này có tác dụng điều trị sỏi thận rất tốt đồng thời đây cũng là những hoạt chất có khả năng chống lại hai căn bệnh thế kỷ là ung thư và HIV. Ngoài ra, các thành phần trong lá cà phê chè còn được sử dụng để điều trị hen xuyễn, nhiễm độc atropin, cúm, đau đầu, nhiễm độc thuốc phiện. Tại Việt Nam cũng đã có công trình nghiên cứu như “Nghiên cứu về thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của lá cà phê chè” (Nguyễn Quyết Tiến, Phạm Thị Hồng Minh, Nguyễn Quốc Nam Hải), Báo cáo khoa học hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc 2009, Thái Nguyên 112009; “ Nghiên cứu thành phần hoá học lá cà phê chè” (Nguyễn Quốc Nam Hải, 112009). Nhận thấy tính ứng dụng cao của một số thành phần hoá học trong lá cà phê chè nên tôi thực hiện đề tài “ Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học các hợp chất trong lá cà phê chè (Coffea arabica L.) ở huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk”. 2. Mục tiêu nghiên cứu Xây dựng qui trình chiết tách các hợp chất hóa học trong lá cà phê chè Xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hóa học trong lá cà phê chè 3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu Lá của cây cà phê chè ở huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk Phạm vi nghiên cứu Lá cà phê chè Chiết tách, xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hoá học trong lá cà phê chè 4. Phƣơng pháp nghiên cứu 4 SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Nghiên cứu lý thuyết: phương pháp nghiên cứu các hợp chất tự nhiên, tổng quan các tài liệu về đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hoá học, ứng dụng của cây cà phê chè. Phương pháp thực nghiệm: + Phương pháp lấy mẫu: lá được thu hái, rửa thật sạch bằng nước sau đó phơi khô, xay thành bột mịn. + Phương pháp trọng lượng để xác định độ ẩm, hàm lượng tro của lá cà phê chè. + Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS để xác định hàm lượng kim loại nặng trong lá cà phê chè. + Phương pháp quang phổ hấp thụ UV – VIS để xác định mật độ quang của các dịch chiết. + Phương pháp chiết soxhlet để chiết các hợp chất có trong thành phần của lá cà phê chè. + Định tính một số nhóm chất (sterol, ankaloid, flavonoid, saponin). + Phương pháp GC – MS để định danh, xác định hàm lượng các hợp chất hoá học trong lá cà phê chè. 5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài Ý nghĩa thực tiễn: Giải thích một cách khoa học các kinh nghiệm dân gian, thuận tiện cho việc ứng dụng. Ý nghĩa khoa học: Cung cấp thêm thông tin về lá cà phê chè như một số chỉ tiêu hóa lý, khảo sát thành phần hóa học và cấu tạo của một số hợp chất có trong lá cà phê chè. 6. Bố cục đề tài Đề tài gồm 38 trang trong đó có 10 bảng và 15 hình. Phần mở đầu (3 trang), kết luận và kiến nghị (1 trang), tài liệu tham khảo (1 trang) và phần phụ lục. Nội dung của đề tài chia làm 3 chương:

- 1 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KHOA HÓA    Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hoá học các hợp chất trong lá cà phê chè (Coffea Arabica L.) tại huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk. KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Ngƣời thực hiện: Nguyễn Thị Lê Phƣơng Lớp: 08CHD Khoa: Hoá học Ngƣời hƣớng dẫn: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân - 2 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân MỞ ĐẦU 1. Tính cấp thiết của đề tài Cây cà phê chè có nguồn gốc từ Ethiopia, được trồng đầu tiên ở vùng châu Phi và Ả Rập. Sau đó cà phê chè được người Hà Lan đem trồng trên các miền đất thuộc địa của họ. Năm 1718, người Hà Lan mang cà phê chè tới Surinam, năm 1725 người Pháp mang tới Cayenne Cuối thế kỷ 18 cà phê chè được trồng ở khắp các xứ sở nhiệt đới, chủ yếu do sự bành trướng thuộc địa của các đế quốc châu Âu. Cà phê chè sinh trưởng tốt nhất ở nơi có độ cao từ 500 – 2000m trên mực nước biển, nhiệt độ trung bình năm là 22 0 C, lượng mưa khoảng trên 1000mm. Cà phê chè thuộc giới Plantae, bộ Gentianales, họ Rubiaceae, chi Coffea, loài C. arabica. Ở Việt Nam cà phê chè được trồng chủ yếu ở các tỉnh miền núi phía Bắc như Tuyên Quang, Hà Giang, vùng Phủ Quỳ, Nghệ An và một phần nhỏ ở Đà Lạt, Lâm Đồng, Đăk Lăk. Hiện nay, nước ta đang khuyến khích phát triển cà phê chè ở Tây Nguyên và Đông Nam Bộ. - 3 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Nghiên cứu cho thấy lá cà phê chè có chứa một số hợp chất có hoạt tính sinh học như 3ß-hydroxilup-12(13)-en-28-oic, axit ursolic, cafein Các chất này có tác dụng điều trị sỏi thận rất tốt đồng thời đây cũng là những hoạt chất có khả năng chống lại hai căn bệnh thế kỷ là ung thư và HIV. Ngoài ra, các thành phần trong lá cà phê chè còn được sử dụng để điều trị hen xuyễn, nhiễm độc atropin, cúm, đau đầu, nhiễm độc thuốc phiện. Tại Việt Nam cũng đã có công trình nghiên cứu như “Nghiên cứu về thành phần hoá học và hoạt tính sinh học của lá cà phê chè” (Nguyễn Quyết Tiến, Phạm Thị Hồng Minh, Nguyễn Quốc Nam Hải), Báo cáo khoa học hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc 2009, Thái Nguyên 11/2009; “ Nghiên cứu thành phần hoá học lá cà phê chè” (Nguyễn Quốc Nam Hải, 11/2009). Nhận thấy tính ứng dụng cao của một số thành phần hoá học trong lá cà phê chè nên tôi thực hiện đề tài “ Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hóa học các hợp chất trong lá cà phê chè (Coffea arabica L.) ở huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk”. 2. Mục tiêu nghiên cứu - Xây dựng qui trình chiết tách các hợp chất hóa học trong lá cà phê chè - Xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hóa học trong lá cà phê chè 3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu * Đối tượng nghiên cứu Lá của cây cà phê chè ở huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk * Phạm vi nghiên cứu - Lá cà phê chè - Chiết tách, xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hoá học trong lá cà phê chè 4. Phƣơng pháp nghiên cứu - 4 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân - Nghiên cứu lý thuyết: phương pháp nghiên cứu các hợp chất tự nhiên, tổng quan các tài liệu về đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hoá học, ứng dụng của cây cà phê chè. - Phương pháp thực nghiệm: + Phương pháp lấy mẫu: lá được thu hái, rửa thật sạch bằng nước sau đó phơi khô, xay thành bột mịn. + Phương pháp trọng lượng để xác định độ ẩm, hàm lượng tro của lá cà phê chè. + Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS để xác định hàm lượng kim loại nặng trong lá cà phê chè. + Phương pháp quang phổ hấp thụ UV – VIS để xác định mật độ quang của các dịch chiết. + Phương pháp chiết soxhlet để chiết các hợp chất có trong thành phần của lá cà phê chè. + Định tính một số nhóm chất (sterol, ankaloid, flavonoid, saponin). + Phương pháp GC – MS để định danh, xác định hàm lượng các hợp chất hoá học trong lá cà phê chè. 5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài - Ý nghĩa thực tiễn: Giải thích một cách khoa học các kinh nghiệm dân gian, thuận tiện cho việc ứng dụng. - Ý nghĩa khoa học: Cung cấp thêm thông tin về lá cà phê chè như một số chỉ tiêu hóa lý, khảo sát thành phần hóa học và cấu tạo của một số hợp chất có trong lá cà phê chè. 6. Bố cục đề tài Đề tài gồm 38 trang trong đó có 10 bảng và 15 hình. Phần mở đầu (3 trang), kết luận và kiến nghị (1 trang), tài liệu tham khảo (1 trang) và phần phụ lục. Nội dung của đề tài chia làm 3 chương: - 5 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Chương 1- Tổng quan (10 trang) Chương 2- Những nghiên cứu thực nghiệm (10 trang) Chương 3- Kết quả và bàn luận (12 trang) CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN 1.1. Cây cà phê chè [7],[8] Cà phê là tên một chi thuộc họ Thiên thảo (Rubiaceae). Họ này bao gồm khoảng 500 chi khác nhau với trên 6000 loài cây nhiệt đới. Cây cà phê chè thuộc họ Rubiaceae, bộ Gentianales, loài C. Arabica. Cà phê arabica còn được gọi là Brazilian Milds nếu nó đến từ Brazil, gọi là Colombian Milds nếu nó đến từ Colombia, và gọi là Other Milds nếu đến từ các nước khác. Hiện nay, Brazil và Colombia là hai nước xuất khẩu chính loại cà phê này. Bên cạnh đó còn một số quốc gia khác cũng xuất khẩu như Ethiopia, Mexico, Guatemala, Hondurus, Peru, Ấn Độ, 1.1.1. Nguồn gốc Cà phê chè có nguồn gốc từ cao nguyên nhiệt đới Ethiopia đông châu Phi. Sau đó cà phê chè được người Hà Lan đem trồng trên các miền đất thuộc địa của họ. Năm 1718, người Hà Lan mang cà phê chè tới Surinam, năm 1725 người Pháp mang tới - 6 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Cayenne Cuối thế kỷ 18 cà phê chè được trồng ở khắp các xứ sở nhiệt đới, chủ yếu do sự bành trướng thuộc địa của các đế quốc châu Âu. Cà phê lần đầu tiên được đưa vào Việt Nam vào năm 1875, giống Arabica được người Pháp mang từ đảo Bourton sang trồng ở phía Bắc sau đó lan ra các tỉnh miền Trung như Quảng Trị, Quảng Bình, … Sau thu hoạch chế biến dưới thương hiệu “Arabica du Tonkin”, cà phê được nhập khẩu về Pháp. Sau khi chiếm nước ta thực dân Pháp thành lập các đồn điền cà phê như Chinê, Xuân Mai, Sơn Tây. Chúng canh tác theo phương thức du canh du cư nên năng suất thấp, những năm đầu giảm từ 400 – 500 kg/ha, những năm sau giảm xuống còn 100 – 150 kg/ha. Để cải thiện tình hình, Pháp du nhập vào nước ta hai giống mới là cà phê vối (C. robusta) và cà phê mít (C. mitcharichia) vào năm 1908 để thay thế, các đồn điền mới lại mọc lên ở phía Bắc như ở Hà Tĩnh (1910), Yên Mỹ (1911, Thanh Hoá), Nghĩa Đàn (1915, Nghệ An). Thời điểm lớn nhất (1946 – 1966) đạt 13.000 ha. Năm 1925, lần đầu tiên được trồng ở Tây Nguyên, sau giải phóng diện tích cà phê cả nước khoảng 20.000 ha, nhờ sự hỗ trợ vốn từ quốc tế, cây cà phê dần được chú trọng, đến năm 1980 diện tích đạt 23.000 ha, xuất khẩu trên 6.000 tấn. Bản kế hoạch ban đầu được xây dựng năm 1980 đặt mục tiêu cho ngành cà phê Việt Nam có khoảng 180.000 ha với sản lượng 200.000 tấn. Sau đó, bản kế hoạch này đã nhiều lần sửa đổi. Các con số cao nhất dừng lại ở mức 350.000 ha với sản lượng 450.000 tấn (Theo hiệp hội cà phê – ca cao Việt Nam, 2002). 1.1.2. Sự phân bố và đặc điểm sinh thái Cà phê là cây nhiệt đới nên đòi hỏi nhiệt độ, ánh sáng, lượng mưa khá cao. Cà phê chè ưa mát, nhiệt độ tối ưu 20 0 C – 22 0 C, ánh sáng tán xạ nên được trồng ở vùng núi cao từ 600 – 2500m, lượng mưa cần thiết từ 1300 – 1600 mm/năm, có khả năng chịu được biên độ nhiệt độ lớn. Tuy nhiên, ở nhiệt 0 o C trở xuống thì lá cây bị rụng, chồi bị chết, cành bị khô, nhiệt độ trên 30 o C kéo dài thì cũng dẫn đến hiện tượng lá héo rồi cháy khô và rụng. Do đó cây cà phê chè thích hợp trồng ở khu vực khí hậu á nhiệt đới và vùng cao nguyên ở các nước nhiệt đới. Ở Việt Nam, cà phê chè được trồng chủ yếu ở Tuyên Quang, Hà Giang, Gia Lai, Kon Tum ngoài ra còn được trồng rải rác ở khu vực miền Trung như Quảng Trị,Thanh Hoá - 7 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Cà phê chè sau khi trồng khoảng 3 – 4 năm thì có thể bắt đầu thu hoạch. Thường cà phê 25 tuổi được coi là già mặc dù nó có thể sống đến 70 năm. Hiện nay, cà phê chè đang được Nhà nước khuyến khích phát triển ở Đông Nam Bộ, song do cà phê chè chín sớm, giai đoạn chín lại rơi vào mùa mưa nên rất khó khăn cho việc thu hoạch, phơi sấy và bảo quản. Thời gian mang quả trên cây từ lúc bắt đầu đến khi chín là 7 – 8 tháng. 1.1.3. Đặc điểm hình dáng Cây cà phê chè có dạng bụi lớn, thẳng đứng, cao khoảng 2 – 3m. Cây mọc dại có thể cao đến 15m (hình 1.1). Hình 1.1. Cây cà phê chè + Cành thon, dài, đối xứng. + Lá mọc đối xứng, cuống lá ngắn từ 0.4 – 1.2cm. Lá có hình oval, nhọn ở hai đầu, rìa lá quăn, mềm và rủ xuống. Chiều dài của lá từ 7 – 20cm, rộng 4 – 6cm. Mặt lá nhẵn, mặt trên lá có màu xanh thẫm, mặt dưới xanh nhạt hơn. + Vỏ cây mỏng, có màu xám nhạt và trở nên sần sùi, nứt nẻ khi già. + Gỗ cây có màu nhạt, cứng, nặng và chắc. - 8 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân + Hoa có năm cánh, màu trắng, có hương thơm. Hoa mọc thành từng cụm hoa gồm 2 – 9 cái (hình 1.2). Hình 1.2. Hoa cà phê chè + Trái hình oval, trái xanh khi chín có màu đỏ tươi sau đó chuyển dần sang màu xanh đen. Trái dài 1.0 – 1.8cm và rộng 0.8 – 1.2cm. Trái chứa hai hạt hơi dẹt và thon, có màu xanh lá (hình 1.3). Hình 1.3. Quả cà phê chè 1.2. Một số nghiên cứu về thành phần hoá học của cây cà phê chè [11] 1.2.1. Thành phần dinh dưỡng Thành phần dinh dưỡng trong 100g nhân cà phê được thể hiện trong bảng 1.1. Bảng 1.1. Thành phần dinh dưỡng của quả cà phê chè - 9 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân Thành phần Hàm lượng (%) Nước 8 -12 Caffein 0.8 - 2 Chất béo 4 - 8 Protein 9 - 16 Đạm 1.8 – 2.5 Tanin 2 Axit caffeic 8 - 9 Pantoxan 5 Tinh bột 5 - 23 Dextrin 0.85 Đường 5 - 10 Cellulose 10 - 20 Hemicellulose 20 Lignin 4 1.2.2. Thành phần hoá học Thành phần hoá học thay đổi tuỳ theo từng bộ phận: - Vỏ quả: có màu đỏ do có chất antoxian và các vết ankaloid, trong vỏ chứa 21,5 – 30% chất khô (tanin, caffein, ). - 10 - SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS. Đỗ Thị Thuý Vân - Vỏ trấu: chứa chủ yếu là cellulose và khoảng 0,4% caffein. - Nhân: nước chiếm 10 – 12%, protein chiếm 9 – 11%, lipid chiếm 10 – 13%, các loại đường chiếm 5 – 10%, tinh bột chiếm 3 – 5% - Lá: có chứa 1-hexatriacontanol, ß–sitosterol, stigmast–5(6),22(23)–dien- 3ß–yl 1-O–ß –D-glucopyranosid và caffein, 3ß-hydroxilup-12(13)-en-28-oic, axit ursolic. 1.3. Giá trị sử dụng của lá cà phê chè 1.3.1. Dược tính của lá cà phê chè Một số kết quả nghiên cứu cho thấy lá cà phê chè có tác dụng chữa bệnh sỏi thận rất tốt. Bằng chứng là một số bệnh nhân tình nguyện chữa bệnh bằng phương pháp Đông y, sau đó được kiểm tra bằng phương pháp siêu âm thì ghi nhận được chỉ số của bệnh nhân có sỏi thận kích cỡ nhỏ hơn 10mm đều hết sỏi, số bệnh nhân có sỏi lớn hơn 10mm thì kích cỡ sỏi giảm hơn một nửa so với kích thước ban đầu. Ngoài ra, thành phần lá cà phê chè còn được dùng để chống lại 2 căn bệnh thế kỷ là ung thư và HIV. Tuy nhiên, nó còn đang được nghiên cứu và tìm hiểu chưa đưa vào ứng dụng thực tiễn. 1.3.2. Một số bài thuốc chữa bệnh sỏi thận trong Y học cổ truyền Cho đến nay, Y học dân gian Việt Nam đã sử dụng khá nhiều bài thuốc, dược liệu để điều trị bệnh sỏi thận. Dưới đây là một số bài thuốc và dược liệu để điều trị sỏi thận. * Giáng Thạch Thang: Cam thảo tiêu 30g, Đông quỳ tử 10g, Giáng hương 3g, Hải kim sa 10g, Hoạt thạch 10g, Kê nội kim 10g, Kim tiền thảo 30g, Ngư não thạch 10g, Xuyên ngư đằng 10g. Sắc uống. Tác dụng: thanh nhiệt, sỏi đường tiết niệu. [...]... Hình ảnh kết quả định tính các nhóm chất trong lá cà phê chè theo thứ tự trong bảng 3.8 Nhƣ vậy: Từ kết quả định tính trên, ta thấy trong thành phần lá cà phê chè có chứa sterol, ankaloid và saponin 3.5 Định danh thành phần hóa học dịch chiết bột lá cà phê chè bằng phƣơng pháp GC – MS Tiến hành chiết soxhlet 10g bột lá cà phê chè với 200ml n-hexan ở nhiệt độ 800C trong thời gian 8h Dịch chiết thu được... 18 Lá cà phê chè Phơi khô, xay nhuyễn Xác định: độ ẩm, hàm lượng tro Bột lá cà phê chè Xác định hàm lượng kim loại nặng Khảo sát thời gian chiết Chiết bằng phương pháp chiết soxhlet Khảo sát tỉ lệ rắn – lỏng Khảo sát các yếu tố ảnh hưởng (nhiệt độ, pH) Dịch chiết Định tính một số nhóm chất Nghiên cứu xác định thành phần hoá học các hợp chất trong dịch chiết (Đo GC – MS) 2.4 Các phƣơng pháp xác định. .. tan trong axit Trong môi trường bazơ bị phân làm 2 lớp, lớp dưới hơi đục hơn chứng tỏ dịch thu được tan một phần trong bazơ Điều này được giải thích là do trong dịch chiết có chứa các hợp chất sterol ở dạng este nên tan được trong NaOH Tại vị trí phân lớp xuất hiện váng chứng tỏ trong dịch chiết có thể có tinh dầu 3.4 Kết quả định tính các nhóm chất trong lá cà phê chè Tiến hành định tính các nhóm chất. .. lường chất lượng II, số 2 Ngô Quyền, Đà Nẵng Kết quả định danh các cấu tử trong cắn lá cà phê chè bằng GC-MS được thể hiện ở sắc kí đồ hình 3.6 và hình 3.7 SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 34 - Hình 3.6 Phổ GC-MS của lá cà phê chè SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 35 - Hình 3.7 Kết quả các thành phần hoá học trong lá cà phê chè Qua phân tích phổ GC-MS ở hình... Khảo sát các yếu tố ảnh hƣởng đến dịch chiết từ lá cà phê chè Lấy các mẫu dịch chiết bằng dung môi n-hexan bảo quản trong các điều kiện khác nhau là để ở nhiệt độ phòng, để ở nhiệt độ 800C, để trong tủ lạnh, sau 4h lấy ra quan sát Lấy các mẫu dịch chiết bằng dung môi n-hexan cho vào 3 ống nghiệm: 1 ống để đối chứng, 1 ống cho HCl, 1 ống cho NaOH vào và quan sát 2.8 Khảo sát định tính các dịch chiết 2.8.1... phút theo chiều dọc, quan sát sự xuất hiện và mức độ bền vững của bọt Nếu bọt cao quá 3 – 4 cm và bền trên 15 phút là phản ứng dương tính 2.9 Xác định thành phần hoá học các hợp chất từ lá cà phê chè bằng phƣơng pháp GC-MS [4] Dịch chiết từ lá cà phê chè thu được tiến hành cất quay chân không thu được cặn chiết Gửi mẫu chất rắn này tới trung tâm kỹ thuật đo lường chất lượng II, số 2 Ngô Quyền, Đà Nẵng... quang vào thời gian chiết Qua kết quả thu được ở bảng 3.5 và hình 3.2 ta thấy khi nhiệt độ càng tăng thì lượng chất tách ra càng nhiều, đến 8h thì lượng chất thu được là lớn nhất Nếu tiếp tục tăng thời gian thì lượng chất giảm và không đổi Như vậy thời gian chiết tối ưu là 8h 3.3 Kết quả khảo sát các yếu tố ảnh hƣởng đến dịch chiết lá cà phê chè 3.3.1 Ảnh hưởng của nhiệt độ Lấy các mẫu dịch chiết bằng... CHƢƠNG 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu 2.1.1 Thu gom nguyên liệu Lá cà phê chè được thu hái ở huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk Tên khoa học: Coffea arabica L., thuộc họ Rubiaceae 2.1.2 Xử lý nguyên liệu Lá cà phê chè sau khi được thu hái về thì đem xử lý sơ bộ như sau: - Loại những lá úa - Rửa thật sạch bề mặt bên ngoài (hình 2.1) - Phơi khô (hình 2.2) - Xay thành bột (hình 2.3)... thích hợp nhất trong ngày từ 9-12 giờ sáng, lá thu hái là là các lá bánh tẻ hoặc già hơn + Sơ chế và bảo quản thuốc: Sau khi thu hái, lá cà phê được hong khô hoắc sấy ở nhiệt độ 600C, tránh ánh nắng càng tốt Khi lá đủ khô được đem đi thái hoặc nghiền nhỏ (giống như chè cám) và bảo quản nơi khô ráo, thoáng mát + Cách sử dụng: lấy 10-20g lá cà phê chè đã sấy khô nghiền nhỏ cho vào 750ml nước sôi chiết. .. (%) 1 (2.2) n Trong đó: m1: Khối lượng chén sứ (g) m2: Khối lượng bột lá cà phê chè (g) m3: Khối lượng chén sứ và mẫu sau khi sấy (g) n: Số lần xác định W(%) 2.4.2 Xác định hàm lượng tro bằng phương pháp tro hóa mẫu Để xác định hàm lượng tro và các nguyên tố vô cơ trong cơ thể động vật, thực vật người ta dùng các phương pháp tro hóa mẫu Trong đề tài này, chúng tôi sử dụng phương pháp tro hóa mẫu bằng . lá cà phê chè - Xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hóa học trong lá cà phê chè 3. Đối tƣợng và phạm vi nghiên cứu * Đối tượng nghiên cứu Lá của cây cà phê chè ở huyện Krông Păk,. định thành phần hóa học các hợp chất trong lá cà phê chè (Coffea arabica L.) ở huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk . 2. Mục tiêu nghiên cứu - Xây dựng qui trình chiết tách các hợp chất hóa học trong. Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk * Phạm vi nghiên cứu - Lá cà phê chè - Chiết tách, xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hoá học trong lá cà phê chè 4. Phƣơng pháp nghiên cứu - 4 - SVTH: