Nghiên cứu chiết tách và xác định thành phần hoá học các hợp chất trong lá cà phê chè (coffea arabica l ) tại huyện krông păk, tỉnh đăk lăk

-1- ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA HÓA -   - Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hoá học hợp chất cà phê chè (Coffea Arabica L.) huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN KHOA HỌC Người thực hiện: Nguyễn Thị Lê Phương Lớp: 08CHD Khoa: Hoá học Người hướng dẫn: ThS Đỗ Thị Thuý Vân SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -2- MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Cây cà phê chè có nguồn gốc từ Ethiopia, trồng vùng châu Phi Ả Rập Sau cà phê chè người Hà Lan đem trồng miền đất thuộc địa họ Năm 1718, người Hà Lan mang cà phê chè tới Surinam, năm 1725 người Pháp mang tới Cayenne Cuối kỷ 18 cà phê chè trồng khắp xứ sở nhiệt đới, chủ yếu bành trướng thuộc địa đế quốc châu Âu Cà phê chè sinh trưởng tốt nơi có độ cao từ 500 – 2000m mực nước biển, nhiệt độ trung bình năm 220C, lượng mưa khoảng 1000mm Cà phê chè thuộc giới Plantae, Gentianales, họ Rubiaceae, chi Coffea, loài C arabica Ở Việt Nam cà phê chè trồng chủ yếu tỉnh miền núi phía Bắc Tuyên Quang, Hà Giang, vùng Phủ Quỳ, Nghệ An phần nhỏ Đà Lạt, Lâm Đồng, Đăk Lăk Hiện nay, nước ta khuyến khích phát triển cà phê chè Tây Nguyên Đông Nam Bộ SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -3- Nghiên cứu cho thấy cà phê chè có chứa số hợp chất có hoạt tính sinh học 3ß-hydroxilup-12(13)-en-28-oic, axit ursolic, cafein Các chất có tác dụng điều trị sỏi thận tốt đồng thời hoạt chất có khả chống lại hai bệnh kỷ ung thư HIV Ngoài ra, thành phần cà phê chè sử dụng để điều trị hen xuyễn, nhiễm độc atropin, cúm, đau đầu, nhiễm độc thuốc phiện Tại Việt Nam có cơng trình nghiên cứu “Nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học cà phê chè” (Nguyễn Quyết Tiến, Phạm Thị Hồng Minh, Nguyễn Quốc Nam Hải), Báo cáo khoa học hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc 2009, Thái Nguyên 11/2009; “ Nghiên cứu thành phần hoá học cà phê chè” (Nguyễn Quốc Nam Hải, 11/2009) Nhận thấy tính ứng dụng cao số thành phần hoá học cà phê chè nên thực đề tài “ Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học hợp chất cà phê chè (Coffea arabica L.) huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk” Mục tiêu nghiên cứu - Xây dựng qui trình chiết tách hợp chất hóa học cà phê chè - Xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hóa học cà phê chè Đối tượng phạm vi nghiên cứu * Đối tượng nghiên cứu Lá cà phê chè huyện Krông Păk, tỉnh Đăk Lăk * Phạm vi nghiên cứu - Lá cà phê chè - Chiết tách, xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hoá học cà phê chè Phương pháp nghiên cứu SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -4- - Nghiên cứu lý thuyết: phương pháp nghiên cứu hợp chất tự nhiên, tổng quan tài liệu đặc điểm hình thái thực vật, thành phần hố học, ứng dụng cà phê chè - Phương pháp thực nghiệm: + Phương pháp lấy mẫu: thu hái, rửa thật nước sau phơi khơ, xay thành bột mịn + Phương pháp trọng lượng để xác định độ ẩm, hàm lượng tro cà phê chè + Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS để xác định hàm lượng kim loại nặng cà phê chè + Phương pháp quang phổ hấp thụ UV – VIS để xác định mật độ quang dịch chiết + Phương pháp chiết soxhlet để chiết hợp chất có thành phần cà phê chè + Định tính số nhóm chất (sterol, ankaloid, flavonoid, saponin) + Phương pháp GC – MS để định danh, xác định hàm lượng hợp chất hoá học cà phê chè Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài - Ý nghĩa thực tiễn: Giải thích cách khoa học kinh nghiệm dân gian, thuận tiện cho việc ứng dụng - Ý nghĩa khoa học: Cung cấp thêm thông tin cà phê chè số tiêu hóa lý, khảo sát thành phần hóa học cấu tạo số hợp chất có cà phê chè Bố cục đề tài Đề tài gồm 38 trang có 10 bảng 15 hình Phần mở đầu (3 trang), kết luận kiến nghị (1 trang), tài liệu tham khảo (1 trang) phần phụ lục Nội dung đề tài chia làm chương: SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -5- Chương 1- Tổng quan (10 trang) Chương 2- Những nghiên cứu thực nghiệm (10 trang) Chương 3- Kết bàn luận (12 trang) CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Cây cà phê chè [7],[8] Cà phê tên chi thuộc họ Thiên thảo (Rubiaceae) Họ bao gồm khoảng 500 chi khác với 6000 loài nhiệt đới Cây cà phê chè thuộc họ Rubiaceae, Gentianales, loài C Arabica Cà phê arabica cịn gọi Brazilian Milds đến từ Brazil, gọi Colombian Milds đến từ Colombia, gọi Other Milds đến từ nước khác Hiện nay, Brazil Colombia hai nước xuất loại cà phê Bên cạnh cịn số quốc gia khác xuất Ethiopia, Mexico, Guatemala, Hondurus, Peru, Ấn Độ, 1.1.1 Nguồn gốc Cà phê chè có nguồn gốc từ cao nguyên nhiệt đới Ethiopia đơng châu Phi Sau cà phê chè người Hà Lan đem trồng miền đất thuộc địa họ Năm 1718, người Hà Lan mang cà phê chè tới Surinam, năm 1725 người Pháp mang tới SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -6- Cayenne Cuối kỷ 18 cà phê chè trồng khắp xứ sở nhiệt đới, chủ yếu bành trướng thuộc địa đế quốc châu Âu Cà phê lần đưa vào Việt Nam vào năm 1875, giống Arabica người Pháp mang từ đảo Bourton sang trồng phía Bắc sau lan tỉnh miền Trung Quảng Trị, Quảng Bình, … Sau thu hoạch chế biến thương hiệu “Arabica du Tonkin”, cà phê nhập Pháp Sau chiếm nước ta thực dân Pháp thành lập đồn điền cà phê Chinê, Xuân Mai, Sơn Tây Chúng canh tác theo phương thức du canh du cư nên suất thấp, năm đầu giảm từ 400 – 500 kg/ha, năm sau giảm xuống 100 – 150 kg/ha Để cải thiện tình hình, Pháp du nhập vào nước ta hai giống cà phê vối (C robusta) cà phê mít (C mitcharichia) vào năm 1908 để thay thế, đồn điền lại mọc lên phía Bắc Hà Tĩnh (1910), Yên Mỹ (1911, Thanh Hoá), Nghĩa Đàn (1915, Nghệ An) Thời điểm lớn (1946 – 1966) đạt 13.000 Năm 1925, lần trồng Tây Ngun, sau giải phóng diện tích cà phê nước khoảng 20.000 ha, nhờ hỗ trợ vốn từ quốc tế, cà phê dần trọng, đến năm 1980 diện tích đạt 23.000 ha, xuất 6.000 Bản kế hoạch ban đầu xây dựng năm 1980 đặt mục tiêu cho ngành cà phê Việt Nam có khoảng 180.000 với sản lượng 200.000 Sau đó, kế hoạch nhiều lần sửa đổi Các số cao dừng lại mức 350.000 với sản lượng 450.000 (Theo hiệp hội cà phê – ca cao Việt Nam, 2002) 1.1.2 Sự phân bố đặc điểm sinh thái Cà phê nhiệt đới nên đòi hỏi nhiệt độ, ánh sáng, lượng mưa cao Cà phê chè ưa mát, nhiệt độ tối ưu 200C – 220C, ánh sáng tán xạ nên trồng vùng núi cao từ 600 – 2500m, lượng mưa cần thiết từ 1300 – 1600 mm/năm, có khả chịu biên độ nhiệt độ lớn Tuy nhiên, nhiệt 0oC trở xuống bị rụng, chồi bị chết, cành bị khơ, nhiệt độ 30oC kéo dài dẫn đến tượng héo cháy khô rụng Do cà phê chè thích hợp trồng khu vực khí hậu nhiệt đới vùng cao nguyên nước nhiệt đới Ở Việt Nam, cà phê chè trồng chủ yếu Tuyên Quang, Hà Giang, Gia Lai, Kon Tum ngồi cịn trồng rải rác khu vực miền Trung Quảng Trị,Thanh Hoá SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -7- Cà phê chè sau trồng khoảng – năm bắt đầu thu hoạch Thường cà phê 25 tuổi coi già sống đến 70 năm Hiện nay, cà phê chè Nhà nước khuyến khích phát triển Đơng Nam Bộ, song cà phê chè chín sớm, giai đoạn chín lại rơi vào mùa mưa nên khó khăn cho việc thu hoạch, phơi sấy bảo quản Thời gian mang từ lúc bắt đầu đến chín – tháng 1.1.3 Đặc điểm hình dáng Cây cà phê chè có dạng bụi lớn, thẳng đứng, cao khoảng – 3m Cây mọc dại cao đến 15m (hình 1.1) Hình 1.1 Cây cà phê chè + Cành thon, dài, đối xứng + Lá mọc đối xứng, cuống ngắn từ 0.4 – 1.2cm Lá có hình oval, nhọn hai đầu, rìa quăn, mềm rủ xuống Chiều dài từ – 20cm, rộng – 6cm Mặt nhẵn, mặt có màu xanh thẫm, mặt xanh nhạt + Vỏ mỏng, có màu xám nhạt trở nên sần sùi, nứt nẻ già + Gỗ có màu nhạt, cứng, nặng SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -8- + Hoa có năm cánh, màu trắng, có hương thơm Hoa mọc thành cụm hoa gồm – (hình 1.2) Hình 1.2 Hoa cà phê chè + Trái hình oval, trái xanh chín có màu đỏ tươi sau chuyển dần sang màu xanh đen Trái dài 1.0 – 1.8cm rộng 0.8 – 1.2cm Trái chứa hai hạt dẹt thon, có màu xanh (hình 1.3) Hình 1.3 Quả cà phê chè 1.2 Một số nghiên cứu thành phần hoá học cà phê chè [11] 1.2.1 Thành phần dinh dưỡng Thành phần dinh dưỡng 100g nhân cà phê thể bảng 1.1 Bảng 1.1 Thành phần dinh dưỡng cà phê chè SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân -9- Thành phần Hàm lượng (%) Nước -12 Caffein 0.8 - Chất béo 4-8 Protein - 16 Đạm 1.8 – 2.5 Tanin Axit caffeic 8-9 Pantoxan Tinh bột - 23 Dextrin 0.85 Đường - 10 Cellulose 10 - 20 Hemicellulose 20 Lignin 1.2.2 Thành phần hoá học Thành phần hoá học thay đổi tuỳ theo phận: - Vỏ quả: có màu đỏ có chất antoxian vết ankaloid, vỏ chứa 21,5 – 30% chất khô (tanin, caffein, ) SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 10 - - Vỏ trấu: chứa chủ yếu cellulose khoảng 0,4% caffein - Nhân: nước chiếm 10 – 12%, protein chiếm – 11%, lipid chiếm 10 – 13%, loại đường chiếm – 10%, tinh bột chiếm – 5% - Lá: có chứa 1-hexatriacontanol, ß–sitosterol, stigmast–5(6),22(23)–dien3ß–yl 1-O–ß –D-glucopyranosid caffein, 3ß-hydroxilup-12(13)-en-28-oic, axit ursolic 1.3 Giá trị sử dụng cà phê chè 1.3.1 Dược tính cà phê chè Một số kết nghiên cứu cho thấy cà phê chè có tác dụng chữa bệnh sỏi thận tốt Bằng chứng số bệnh nhân tình nguyện chữa bệnh phương pháp Đơng y, sau kiểm tra phương pháp siêu âm ghi nhận số bệnh nhân có sỏi thận kích cỡ nhỏ 10mm hết sỏi, số bệnh nhân có sỏi lớn 10mm kích cỡ sỏi giảm nửa so với kích thước ban đầu Ngồi ra, thành phần cà phê chè dùng để chống lại bệnh kỷ ung thư HIV Tuy nhiên, cịn nghiên cứu tìm hiểu chưa đưa vào ứng dụng thực tiễn 1.3.2 Một số thuốc chữa bệnh sỏi thận Y học cổ truyền Cho đến nay, Y học dân gian Việt Nam sử dụng nhiều thuốc, dược liệu để điều trị bệnh sỏi thận Dưới số thuốc dược liệu để điều trị sỏi thận * Giáng Thạch Thang: Cam thảo tiêu 30g, Đông quỳ tử 10g, Giáng hương 3g, Hải kim sa 10g, Hoạt thạch 10g, Kê nội kim 10g, Kim tiền thảo 30g, Ngư não thạch 10g, Xuyên ngư đằng 10g Sắc uống Tác dụng: nhiệt, sỏi đường tiết niệu SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 26 - 108.825 5.012 113.019 16.320 103.921 4.980 108.062 16.840 100.147 4.987 104.313 16.460 16.510 Từ bảng 3.1 cho thấy độ ẩm trung bình cà phê chè 16.510% Độ ẩm tương đối lớn nên cần ý trình bảo quản (tránh bị ẩm mốc) 3.1.2 Hàm lượng tro Lấy mẫu cà phê chè xác định độ ẩm trên, nung lò nung nhiệt độ 500 - 6000C để xác định hàm lượng tro Hàm lượng tro lấy trung bình từ mẫu Kết xác định hàm lượng tro trung bình trình bày bảng 3.2 Bảng 3.2 Kết khảo sát hàm lượng tro STT m1(g) m2(g) m4(g) HL tro (%) 104.087 4.987 104.533 8.943 105.300 4.981 105.823 10.500 108.825 5.012 109.468 12.829 103.921 4.980 104.705 15.743 100.147 4.987 100.937 15.841 HL trotb (%) 12.771 Vậy hàm lượng tro trung bình bột cà phê chè là: 12.771% 3.1.3 Hàm lượng số kim loại nặng SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 27 - Tro thu sau nung mẫu mang hịa tan axit HNO3 lỗng định mức nước cất bình định mức 50ml, sau xác định hàm lượng kim loại nặng máy quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS Trung tâm khí tượng thuỷ văn quốc gia – Đài khí tượng thuỷ văn khu vực Trung Trung Bộ, 660 Trưng Nữ Vương, Đà Nẵng Kết phân tích trình bày bảng 3.3 Bảng 3.3 Bảng hàm lượng số kim loại nặng cà phê chè Kim loại Hàm lượng kim loại QCVN 8-2:2011/BYT (Số (mg/kg) 02/2011/TT-BYT) Pb2+ 0.7150 2.0 Cu2+ 4.1767 20 Zn2+ 5.4180 20 Căn vào thông tư y tế số 02/2011/TT-BYT ngày 25 tháng 10 năm 2011 quy định giới hạn kim loại nặng tối đa cho phép thực phẩm Pb: 2mg/kg, Zn: 20mg/kg, Cu: 20mg/kg hàm lượng kim loại nặng cà phê chè khơng ảnh hưởng đến sức khoẻ người hàm lượng kim loại nặng cà phê chè Pb: 0.7150mg/kg, Zn: 5.418mg/kg, Cu: 4.1767mg/kg 3.2 Kết khảo sát điều kiện chiết từ cà phê chè 3.2.1 Khảo sát tỷ lệ rắn-lỏng Kết khảo sát tỷ lệ rắn – lỏng thể bảng 3.4 biểu đồ hình 3.1 Bảng 3.4 Bảng kết khảo sát tỷ lệ rắn – lỏng Ký hiệu mẫu Thời gian (h) Khối lượng mẫu (g) SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương Thể tích dung mơi Bước sóng  (nm) Độ hấp thụ D n-hexan (ml) GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 28 - 1-1 4h 10.004 150 669.00 1.7994 1-2 4h 9.998 200 669.00 1.8486 1-3 4h 10.016 250 668.50 2.3887 1-4 4h 10.008 300 669.00 1.7084 1-5 4h 10.005 350 669.00 1.7058 3.0000 2.5000 2.3887 2.0000 1.7994 1.8486 1.7084 1.7058 1.5000 1.0000 0.5000 0.0000 150 200 250 300 350 Hình 3.1 Biểu đồ biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào tỷ lệ dung môi n – hexan Qua kết thu bảng 3.4 hình 3.1 ta thấy tăng thể tích dung mơi nhexan độ hấp thụ dịch chiết tăng theo thể tích dung mơi 250ml độ hấp thụ lớn Nếu tiếp tục tăng thể tích dung mơi độ hấp thụ giảm không đổi, nguyên nhân thể tích dung mơi tăng khả xâm nhập dung môi vào tế bào cà phê chè lớn nên khả chiết tăng làm độ hấp thụ tăng, đến SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 29 - lúc lượng chất cà phê chè tách gần hoàn toàn, nên tiếp tục tăng thể tích dung mơi khơng chiết thêm mà tốn dung môi nên tỉ lệ rắn - lỏng tối ưu 10g bột cà phê chè – 250ml dung môi n-hexan 3.2.2 Khảo sát thời gian chiết Kết khảo sát thời gian chiết thể bảng 3.5 biểu đồ hình 3.2 Bảng 3.5 Bảng kết khảo sát thời gian chiết Ký Thời gian Khối lượng Thể tích Bước sóng Độ hấp thụ hiệu (h) mẫu (g) dung môi  (nm) D mẫu n-hexan 2-1 4h 10.041 250 669.50 1.1599 2-2 6h 9.998 250 668.00 2.4982 2-3 8h 10.012 250 669.00 2.9138 2-4 10h 10.008 250 665.50 2.7661 2-5 12h 10.005 250 665.50 2.7660 SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 30 3.5 2.9138 2.5 2.7661 2.766 2.4982 1.5 1.1599 0.5 4h 6h 8h 10h 12h Hình 3.2 Biểu đồ biểu diễn phụ thuộc mật độ quang vào thời gian chiết Qua kết thu bảng 3.5 hình 3.2 ta thấy nhiệt độ tăng lượng chất tách nhiều, đến 8h lượng chất thu lớn Nếu tiếp tục tăng thời gian lượng chất giảm khơng đổi Như thời gian chiết tối ưu 8h 3.3 Kết khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến dịch chiết cà phê chè 3.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ Lấy mẫu dịch chiết dung môi n-hexan bảo quản điều kiện khác nhiệt độ phòng, tủ lạnh 800C, sau 4h lấy quan sát màu sắc dịch chiết Kết thể bảng 3.6 hình 3.3 Bảng 3.6 Bảng kết màu sắc dịch chiết nhiệt độ bảo quản khác STT Điều kiện bảo quản Kết Để nhiệt độ phòng Màu xanh, Để nhiệt độ 800C Nhạt màu SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 31 - Để tủ lạnh Phân làm lớp ít, lớp trong, lớp nhạt màu Hình 3.3 Màu sắc dịch chiết điều kiện nhiệt độ khác (theo thứ tự từ phải sang trái bảng 3.6) Qua kết thu bảng 3.6 hình 3.3, ta thấy nhiệt độ có phần ảnh hưởng đến dịch chiết Khi nhiệt độ tăng hay giảm màu nhạt nhiên ảnh hưởng không nhiều 3.3.2 Ảnh hưởng môi trường Lấy mẫu dịch chiết dung môi n-hexan cho vào ống nghiệm: ống để đối chứng, ống cho HCl, ống cho NaOH vào Màu sắc dịch chiết thay đổi trình bày bảng 3.7 hình 3.4 Bảng 3.7 Bảng kết màu sắc dịch chiết môi trường khác STT Môi trường Kết Trung tính Màu xanh, SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 32 - Axit Phân làm lớp, lớp hơn, vị trí phân lớp xuất váng tinh dầu Bazơ Phân làm lớp, lớp đục Hình 3.4 Màu sắc dịch chiết môi trường khác (theo thứ tự từ trái sang phải bảng 3.7) Qua kết thu bảng 3.7 hình 3.4, ta thấy mơi trường ảnh hưởng đến dịch chiết cà phê chè Trong môi trường axit bị phân chia làm lớp, lớp chứng tỏ dịch thu không tan axit Trong môi trường bazơ bị phân làm lớp, lớp đục chứng tỏ dịch thu tan phần bazơ Điều giải thích dịch chiết có chứa hợp chất sterol dạng este nên tan NaOH Tại vị trí phân lớp xuất váng chứng tỏ dịch chiết có tinh dầu 3.4 Kết định tính nhóm chất cà phê chè Tiến hành định tính nhóm chất (sterol, ankaloid, flavonoid, saponin) thuốc thử đặc trưng ta thu kết bảng 3.8 hình 3.5 Bảng 3.8 Bảng kết định tính nhóm chất dịch chiết cà phê chè SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 33 - STT Nhóm chất Thuốc thử Hiện tượng Sterol Lieberman– Bourchardt Màu xanh Ankaloid Mayer Kết tủa trắng Flavonoid Mg + HCl Không tượng Saponin Phản ứng tạo bọt Bọt bền NaOH Hình 3.5 Hình ảnh kết định tính nhóm chất cà phê chè theo thứ tự bảng 3.8 Như vậy: Từ kết định tính trên, ta thấy thành phần cà phê chè có chứa sterol, ankaloid saponin 3.5 Định danh thành phần hóa học dịch chiết bột cà phê chè phương pháp GC – MS Tiến hành chiết soxhlet 10g bột cà phê chè với 200ml n-hexan nhiệt độ 800C thời gian 8h Dịch chiết thu cô đuổi dung mơi thu cắn Gửi cắn phân tích máy sắc kí khí ghép khối phổ (GC-MS) Trung tâm Kỹ thuật đo lường chất lượng II, số Ngô Quyền, Đà Nẵng Kết định danh cấu tử cắn cà phê chè GC-MS thể sắc kí đồ hình 3.6 hình 3.7 SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 34 - Hình 3.6 Phổ GC-MS cà phê chè SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 35 - Hình 3.7 Kết thành phần hoá học cà phê chè Qua phân tích phổ GC-MS hình (hình 3.6 hình 3.7), đối chiếu với liệu thư viện phổ chuẩn, định danh hợp chất dịch chiết cà phê chè với dung môi n-hexan thu 12 chất chất có hàm lượng cao 2,6,10,14,18,22-tetracosahexaene-2,6,10,15,19,23-hexamethyl-(all-E) SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 36 - chiếm 9,75%, 2-cyclohexene-1-carboxaldehyde, 2,6-dimethyl-6-(4-methyl-3-pentenyl) chiếm 9,61% 9,19-cyclolanost-24-en-3-ol chiếm 8,27% Trong 12 chất định danh có chất có hoạt tính sinh học cao campesterol chiếm 1,84%, stigmasterol chiếm 1,15%, gamma-sitosterol chiếm 4,21%, 9,19-cyclolanost-24-en-3ol chiếm 8,27% có tác dụng chống ung thư tuyến tiền liệt, ung thư vú phòng chống bệnh tim mạch [5],[6],[9] ,[10] Từ nguồn tài liệu thu thập được, xin đưa bảng tổng hợp chất có hoạt tính sinh học dịch chiết cà phê chè sau: Tên CTPT CTCT Thuộc Cơng dụng nhóm chất Phytol C20H40O Terpenoid Làm ngun liệu sản xuất, tổng hợp vitamin E K Hexanedioic C22H42O4 Este Là chất dẻo acid, bis(2- sử dụng etylhexyl) este số sản (DEHA) phẩm chăm sóc cá nhân, vật liệu đóng gói thực phẩm Tetraconsane C24H50 SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương ankan GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 37 - Hentriacontane C31H64 ankan Làm nguyên liệu để điều chế thuốc điều trị ung thư Vitamin E Chống Vitamin oxi hố, vitamin E góp phần quan trọng hình thành nên tế bào máu đỏ, giúp thể sử dụng vitamin K cách tốt nhất, chống ung thư Campesterol C28H48O Chống viêm Sterol đặc biệt viêm xương khớp, ức chế ung thư phổi, dày, tuyến tiền liệt Bảng 3.9 Bảng kết hoạt tính sinh học số hợp chất quan trọng cà phê chè KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ I KẾT LUẬN Qua trình nghiên cứu đề tài, thu số kết sau: SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 38 - - Đã xác định độ ẩm = 16.510%, hàm lượng tro = 12.771%, hàm lượng số kim loại nặng không ảnh hưởng đến sức khỏe người - Đã xác định điều kiện thích hợp để chiết tách, xác định thành phần hóa học cà phê chè n-hexan: Tỷ lệ rắn - lỏng tối ưu 10g bột cà phê chè – 250ml dung môi n-hexan, thời gian chiết tối ưu 8h - Nhiệt độ ảnh hưởng không nhiều đến dịch chiết - Môi trường ảnh hưởng đến dịch chiết: Trong môi trường axit dịch chiết phân chia làm lớp, lớp chứng tỏ dịch thu không tan axit Trong môi trường bazơ bị phân làm lớp, lớp đục chứng tỏ dịch thu tan phần bazơ Điều giải thích dịch chiết có chứa hợp chất sterol dạng este nên tan NaOH Tại vị trí phân lớp xuất váng chứng tỏ dịch chiết có tinh dầu - Định tính nhóm chất: sterol, ankaloid, saponin - Đã định danh thành phần dịch chiết có 12 cấu tử, cấu tử có hàm lượng cao 2,6,10,14,18,22-tetracosahexaene-2,6,10,15,19,23hexamethyl-(all-E) chiếm 9,75%, 2-cyclohexene-1-carboxaldehyde, 2,6-dimethyl-6(4-methyl-3-pentenyl) chiếm 9,61% 9,19-cyclolanost-24-en-3-ol chiếm 8,27% Trong 12 cấu tử định danh có cấu tử có hoạt tính sinh học cao campesterol chiếm 1,84%, stigmasterol chiếm 1,15%, gamma-sitosterol chiếm 4,21%, 9,19cyclolanost-24-en-3-ol chiếm 8,27% có tác dụng chống ung thư tuyến tiền liệt, ung thư vú phòng chống bệnh tim mạch II KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu chạy sắc kí cột để tách tiếp cấu tử tinh khiết từ cà phê chè tìm hiểu hoạt tính sinh học nghiên cứu phản ứng chuyển hóa chúng PHỤ LỤC SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 39 - Kết hàm lượng kim loại nặng cà phê chè TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Đái Duy Ban (2008), Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phịng chống số bệnh cho người vật nuôi, NXB Khoa học tự nhiên & công nghệ, Hà Nội SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân - 40 - [2] Nguyễn Văn Đàn (1997), Các phương pháp nghiên cứu thuốc, NXB Y-Dược, Tp Hồ Chí Minh [3] Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất y học Hà Nội [4] Bùi Xn Vững (2011), Giáo trình phân tích cơng cụ, trường ĐHSP-ĐHĐN [5] Bài giảng Dược liệu tập (1998), Bộ Y tế Bộ Giáo dục Đào tạo [6] http://Wikipedia.org/wiki/steroid [7] http://www.coffeetour.com.vn/Home/ct/17/arabicacay-ca-phe-che [8] http://vi.wikipedia.org/wiki/C%C3%A0_ph%C3%AA_ch%C3%A8 [9] http://en.wikipedia.org/wiki/Bis(2-ethylhexyl)_adipate [10] http://en.wikipedia.org/wiki/Vitamin_E [11] http://yume.vn/thienlam1271989/article/ca-phe.35CBD60D.html SVTH: Nguyễn Thị Lê Phương GVHD: ThS Đỗ Thị Thuý Vân ... học cà phê chè Đối tượng phạm vi nghiên cứu * Đối tượng nghiên cứu L? ? cà phê chè huyện Krông Păk, tỉnh Đăk L? ?k * Phạm vi nghiên cứu - L? ? cà phê chè - Chiết tách, xác định thành phần hoá học, cấu... chè (Coffea arabica L. ) huyện Krông Păk, tỉnh Đăk L? ?k” Mục tiêu nghiên cứu - Xây dựng qui trình chiết tách hợp chất hóa học cà phê chè - Xác định thành phần hoá học, cấu trúc hợp chất hóa học cà. .. học cà phê chè? ?? (Nguyễn Quốc Nam Hải, 11/200 9) Nhận thấy tính ứng dụng cao số thành phần hoá học cà phê chè nên thực đề tài “ Nghiên cứu chiết tách xác định thành phần hóa học hợp chất cà phê chè