III. MÔI TRƯỜNG CHUYÊN TÍNH
3. Tính số lượng vi sinh vật
3.1. Phương pháp thạch bằng ( trên môi trường thạch )
- Mỗi tế bào vi sinh vật trên môi trường thắch hợp sẽ phát triển và cho chúng ta một khuẩn lạc. Do ựó số lượng khuẩn lạc cho ta biết số lượng vi sinh vật trong một gam cơ chất.
- Sau khi VSV ựã mọc trên môi trường thạch ựĩa (hộp lồng), ựem ựếm số lượng khuẩn lạc ựược hình thành bằng máy ựếm khuẩn lạc, hoặc ựếm trực tiếp theo phương pháp chia ô trên ựĩa môi trường.
Kết quả ựược tắnh theo công thức sau:
S = T x 10 x N x K
S: Số lượng vi sinh vật trong một gam cơ chất. T: Số khuẩn lạc trung bình trong một hộp petri
10: Số khuẩn lạc qui ra 1 ml ( vì lúc nuôi cấy trong hộp lồng chúng ta dùng 0,1 ml dung dịch cơ chất )
N: Số nghịch ựảo của nồng ựộ pha loãng
K: hệ số khô kiệt (Nếu không quy ựổi từ khô sang tươi)
3.2 Tắnh số lượng vi sinh vật trong môi trường lỏng ( phương pháp ựịnh tắnh )
Có những loại vi khuẩn không thể dùng mắt thường quan sát khuẩn lạc hoặc sản phẩm sinh ra cũng không có màu gì ựặc biệt ựể ựánh giá vi khuẩn hoạt ựộng. Trong trường hợp này phải dùng phản ứng màu ựể xác ựịnh. Cứ mỗi ống nghiệm có phản ứng màu gọi là ống ( + ). Dựa vào các ống dương tắnh, căn cứ vào bảng Mc.Crady chúng ta tắnh ra số lượng vi sinh vật.
Vắ dụ: độ pha loãng 10 -4 10-5 10-6 10-7 10-8 10-9 Số ống dương 3 + 3+ 3+ 2+ 1+ 0 - Tìm số chỉ tiêu: 321
Số chỉ tiêu là con số có 3 hàng số. Hàng số ựầu là số biểu hiện ở nồng ựộ loãng nhất các ống nghiệm ựều dương. Hai số tiếp theo là số ống dương ở 2 nồng ựộ tiếp theo sau.
- đem số chỉ tiêu này tra bảng Mc.Crady ta sẽ có số lượng vi khuẩn tương ứng: 15
- Từ con số này ta tắnh ra số lượng vi khuẩn trong một gam cơ chất theo công thức:
S = t x 10 x n x k
S: Số lượng vi sinh vật.
t: Số lượng vi khuẩn tra bảng 10: Số lượng vi khuẩn qui ra 1 ml
n: Số nghịch ựảo của nồng ựộ pha loãng k: Hệ số khô kiệt
S= 15 x 10 x 103 x 1,52 = 2,28 . 105 tế bào/1g
* Câu hỏi ôn tập: Bài số 6
1. Trình bày phương pháp pha loãng?
2. Những dụng cụ cần thiết ựể làm dãy pha loãng là gì?
3. Nguyên tắc cơ bản nhất của phương pháp pha loãng ựể nuôi cấy VSV là gì? 4. Phương pháp và cách tắnh số lượng VSV trên môi trường ựặc, môi trường
Bài số 7
đÁNH GIÁ đẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI SINH VẬT Mục ựắch:
- Giúp cho học viên hiểu rõ tầm quan trọng phải ựánh giá ựặc tắnh sinh học của các VSV
- Biết ựược các phương pháp cơ bản ựể ựánh giá ựặc tắnh sinh học của VSV
Nội dung:
- đánh giá thời gian mọc của chủng giống cần nghiên cứu
- đánh giá ựường kắnh khuẩn lcạc của chủng giống cần nghiên cứu - Xác ựịnh khả năng thắch ứng ở môi trường pH của chủng giống cần nghiên cứu
- Khả năng cạnh tranh của chủng giống cần nghiên cứu - Hoạt tắnh của chủng giống cần nghiên cứu