Hiệu suất vi gói vi khuẩn ở hai phƣơng thức đƣợc trình bày ở bảng 3.5. Cả 2 cách thức vi gói với các nồng độ alginate thay đổi đều cho tỉ lệ ―nhốt‖ vi khuẩn rất cao, hiệu suất đạt từ 96-98 % và không có sự khác biệt (p>0,05) về hiệu suất vi gói giữa 2 cách này (bảng 3.5).
Theo báo cáo của Krasaekoopt và c.s., (2004), khi tiến hành vi gói 3 chủng L. acidophilus 547, Bifidobacterium bifidum ATCC 1994 và L. casei 01 bằng phƣơng pháp nhỏ giọt với nguyên liệu alginate đều cho hiệu quả vi gói đạt 99,9% và không khác biệt (p>0,05) so với tổng số lƣợng tế bào ban đầu bổ sung vào vi gói [54].
Sự khác biệt về hiệu suất vi gói giữa thí nghiệm này với nghiên cứu của nhóm tác giả trên đƣợc lý giải bởi 2 nguyên nhân sau:
Đào Thị Minh Châu Luận văn Thạc Sĩ Sinh Học
70
Với phƣơng pháp tạo nhũ, kích thƣớc hạt vi gói rất nhỏ và thu nhận các hạt này theo phƣơng pháp ly tâm, do đó không tránh khỏi việc thất thoát một lƣợng nhỏ hạt vi gói ở thao tác loại bỏ hỗn hợp dung dịch dầu và CaCl2 dƣ thừa, rữa hạt.
Ở phƣơng pháp nhỏ giọt, để đảm bảo kích thƣớc và cấu trúc hạt vi gói đƣợc đồng nhất, chúng tôi chủ động bỏ hỗn hợp (alginate và vi khuẩn) ở thể tích cuối cùng khoảng 0,2 ml, tránh tình trạng tạo bọt khí trong cấu trúc hạt vi gói gây ra bởi thao tác bơm dung dịch ra khỏi đầu tiêm.
Tuy nhiên, hiệu suất ―nhốt‖ vi khuẩn giữa 2 phƣơng pháp thực hiện đều không khác biệt nhau (p>0,05) ở các nồng độ alginate khác nhau (bảng 3.5).
Phƣơng pháp Nồng độ Alginate (%) Số lƣợng vi khuẩn L. casei Log (CFU/ml) Hiệu suất vi gói (%) Tổng số lƣợng tế bào ban đầu
Tổng số lƣợng tế bào trong chế phẩm TN 2,0 10,54 ± 0,06 10,14 ± 0,13 96,16 ± 0,80a 2,5 10,53 ± 0,05 10,14 ± 0,20 96,28 ± 1,40a 3,0 10,53± 0,08 10,09 ± 0,08 95,91 ± 0,80a 3,5 10,43 ± 0,06 10,20 ± 0,07 97,72 ± 0,60a NG 2 10,43 ± 0,11 10,16 ± 0,06 97,44 ± 1,60a 2,5 10,46 ± 0,06 10,12 ± 0,03 96,78 ± 0,30a 3 10,52 ± 0,02 10,37 ± 0,06 98,51 ± 0,50a 3,5 N N N
Với kỹ thuật nhỏ giọt, nồng độ 3,5% gây khó khăn cho quá trình tạo hạt vì
Kết quả được tính dựa trên giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn (n=3) a
là giá trị trung bình cột, chỉ sự khác biệt không có ý nghĩa về mặt thống kê (p>0,05). TN: tạo nhũ, NG: nhỏ giọt, N: không khảo sát
Bảng 3.5. Hiệu suất vi gói L. casei bởi hai phƣơng pháp tạo nhũ và nhỏ giọt
Đào Thị Minh Châu Luận văn Thạc Sĩ Sinh Học
71
dung dịch alginate keo nhớt hơn đã gây tắc đầu kim tiêm, do đó chúng tôi không khảo sát nồng độ 3,5% đối với các thí nghiệm vi gói nhỏ giọt.