4.3. Tác dụng kháng khuẩn
4.3.2. Tác dụng trên cận lâm sàng
Theo dừi quỏ trỡnh điều trị cho thấy, ở những bệnh nhõn đ−ợc đắp vết thương bằng cao lỏng bạch đàn, sau từ 3 - 4 ngày vết thương giảm phù nề, đỡ
đau nhức, giảm hoặc hết tiết dịch, giả mạc và tổ chức hoại tử sạch dần, tình trạng nhiễm khuẩn tại chỗ giảm; tình trạng toàn thân bệnh nhân tốt dần lên, bệnh nhân đỡ hoặc hết sốt, nhanh nhẹn, hoạt bát và ăn uống khá hơn.
So sánh số l−ợng bạch cầu trung bình và tỷ lệ bạch cầu đa nhân trung tính trung bình của hai nhóm tr−ớc điều trị cho thấy không có sự khác biệt (p > 0,05) [bảng 3.14].
Kết quả xét nghiệm máu trước và sau 7 ngày đắp cao lỏng bạch đàn cho thấy cú sự thay đổi rừ rệt theo hướng tớch cực. Số lượng bạch cầu trung bỡnh ở
nhóm nghiên cứu giảm rõ rệt, từ 13,82 ± 4,67G/l xuống còn 8,04 ± 1,30G/l, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,001). Tỷ lệ bạch cầu đa nhân trung tính trung bình ở nhóm nghiên cứu giảm rõ rệt, từ 79,11 ± 6,07% xuống còn 68,71
± 8,17%, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,001). Kết quả này cho thấy, quá trình viêm tại vết thương đã giảm đi sau khi đắp tại chỗ bằng cao lỏng bạch
đàn. Nh− vậy, cao lỏng bạch đàn có tác dụng chống viêm, làm giảm phù nề và giảm tiết dịch tại vết th−ơng phần mềm [bảng 3.12].
Số lượng hồng cầu trung bình ít thay đổi, trước khi đắp cao lỏng bạch
đàn là 3,95 ± 0,78T/l, sau khi đắp 7 ngày là 3,93 ± 0,58T/l, sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05), chứng tỏ cao lỏng bạch đàn không gây độc cho cơ thể [bảng 3.12].
So sánh sự thay đổi số l−ợng bạch cầu và tỷ lệ bạch cầu đa nhân trung tính ở hai nhúm sau khi đắp thuốc cho thấy nhúm nghiờn cứu giảm rừ rệt so với nhóm đối chứng, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,001 và p < 0,01). Trong
đó số l−ợng bạch cầu ở nhóm nghiên cứu là 8,04 ± 1,30G/l và nhóm đối chứng là 11,61 ± 2,86G/l, tỷ lệ bạch cầu đa nhân trung tính ở nhóm nghiên cứu là 68,71 ± 8,17%, nhóm chứng là 73,43 ± 5,67%. Kết quả này cho thấy cao lỏng bạch đàn có tác dụng chống viêm tại chỗ tốt hơn dung dịch natri clorid 10% [bảng 3.15].
Theo chúng tôi, cao lỏng bạch đàn có tác dụng chống viêm là do trong cao có flavonoid đã ức chế quá trình tổng hợp các mediator gây viêm, từ đó làm giảm tiết dịch, giảm phù nề tại chỗ, giảm quá trình thoát mạch của bạch cầu. Bên cạnh đó, flavonoid còn có tác dụng chống các gốc oxy hóa, các gốc tự do, làm giảm quá trình viêm tại chỗ và toàn thân [34].
4.3.2.2. Kết quả cấy khuẩn dịch vết th−ơng
Nguyễn Thị Thái Hằng, Nguyễn Duy Khang, Phạm Thị Hòa, Trần Xuân Mậu nghiên cứu in vitro cho thấy, tinh dầu bạch đàn có tác dụng ức chế một số vi khuẩn và nấm nh−: S. aureus, Klebsiella, Enterobacter, trực khuẩn lao,
phế cầu khuẩn, nấm Candida albicans, vi khuẩn S. dysenterae và S. flexneri...
[10], [13].
Nồng độ ức chế tối thiểu của tinh dầu bạch đàn đối với S. aureus, Klebsiella, Enterobacter là 2mg/ml; đối với E. coli, S. typhi là 8mg/ml; và với B. subtilis, Proteus, S. flexneri lớn hơn 8mg/ml [43].
Năm 2007, Nguyễn Minh Hà và cộng sự, Viện Y học cổ truyền Quân đội,
đã nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn của cao lỏng bạch đàn; kết quả cho thấy, cao lỏng bạch đàn có khả năng kháng khuẩn tương đương với một số thuốc có nguồn gốc thảo d−ợc khác. Hoạt tính kháng khuẩn rõ rệt với các vi khuẩn gây bệnh nh− S. aureus, P. aeruginosa và E. coli [8].
Cao lỏng bạch đàn có tính ổn định cao và có kết quả thống nhất, thể hiện ở các mẫu khuếch tán trong thạch và mẫu thuốc đ−ợc pha loãng ở các nồng độ khác nhau trong môi trường lỏng đều cho độ sai lệch không đáng kể. Theo đó,
đường kính vòng vô khuẩn của cao lỏng bạch đàn đối với S. aureus là 14,17mm, với P. aeruginosa là 9,6mm và với E. coli là 16,66mm [8].
Nồng độ diệt khuẩn tối thiểu (MBC) của cao lỏng bạch đàn đối với S.
aureus là 1/16, đối với P. aeruginosa là 1/16 và đối với E. coli là 1/8.
Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) của cao lỏng bạch đàn đối với 3 loại vi khuẩn trên đều là 1/32 [8].
Nghiên cứu trên vết bỏng ở động vật thực nghiệm cho thấy, đối với các vết bỏng đ−ợc điều trị bằng cao lỏng bạch đàn, tổ chức hạt bắt đầu hình thành từ ngày thứ 3 sau điều trị và thời gian tiếp đó phát triển rất tốt; thời gian liền sẹo tại vết bỏng trung bình là 24 - 25 ngày [8].
Cấy khuẩn ở các ngày thứ 1, ngày thứ 7, ngày thứ 14, kết quả cho thấy,
đối với cỏc vết bỏng đ−ợc điều trị bằng cao lỏng bạch đàn, số l−ợng vi khuẩn giảm hơn so với tr−ớc khi điều trị.
Kết quả cấy khuẩn vào ngày thứ 3 cho thấy sự xuất hiện của S. aureus ở 10/11 vết bỏng, P. aeruginosa ở 9/17 vết bỏng; cấy khuẩn ở ngày thứ 10 thấy sự xuất hiện của S. aureus là 6/17 và P. aeruginosa là 6/17; tới ngày thứ 18 thì
tỷ lệ này là 4/17 và 5/17.
Tác giả kết luận, cao lỏng bạch đàn có tác dụng kháng khuẩn tốt với các chủng vi khuẩn S. aureus, P. aeruginosa, và E. coli [8].
Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn của cao lá mỏ quạ, Đinh Văn Lực, Nguyễn Thị Hiền (1987) đ−a ra kết luận, đ−ờng kính vòng vô khuẩn với S.
aureus là 12mm, với P. aeruginosa là 18mm. Từ đó tác giả khẳng định, cao lá
mỏ quạ có tác dụng ức chế vi khuẩn ở mức độ vừa và yếu [19].
Lê Thế Trung và cộng sự (1991) nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn của thuốc Maduxin; kết quả cho thấy, đ−ờng kính vòng vô khuẩn với S. aureus là 22 - 24mm, với P. aeruginosa, E. coli là 18 - 22mm [39].
Nghiên cứu của Nguyễn Lung, Nguyễn Lam Hòa (1983) cho thấy, n−ớc sắc lá bạch đồng nữ tỷ lệ 1 : 1 có tác dụng ức chế các chủng vi khuẩn S. aureus, P. aeruginosa và Shigella [17]
Năm 1992, Nghiêm Đình Phàn đã công bố, cao lỏng Eupolin có khả
năng ức chế nhiều chủng vi khuẩn nh− Staphylococcus, E. coli, Proteus, Klebsiella, P. aeruginosa, Listeria và Corinebacterium. Cũng theo tác giả,
đ−ờng kính vòng vô khuẩn đo đ−ợc lớn nhất với E. coli là 24mm, với P.
aeruginosa, Listeria và Corinebacterium là 15mm [22].
So sánh với những nghiên cứu của các tác giả trên, chúng tôi nhận thấy, tác dụng kháng khuẩn của cao lỏng bạch đàn là tương đương.
Trong quá trình nghiên cứu, chúng tôi đã tiến hành cấy khuẩn dịch vết th−ơng ở nhóm nghiên cứu, kết quả cho thấy sự xuất hiện của P. aeruginosa và S. areus chiếm tỷ lệ cao nhất; trong đó, P. aeruginosa là 40,9%, S. areus là 45,5%, E. coli: 15,9%, Enterobacter: 15,9%, Proteus: 9,1%, Enterococus:
2,3% [bảng 3.16]. Kết quả này phù hợp với kết quả của các tác giả trong và ngoài n−ớc nh−:
- Tác giả Nghiêm Đình Phàn (1992) đã cấy khuẩn lấy từ 31 bệnh nhân có vết th−ơng phần mềm nhiễm khuẩn; kết quả cho thấy, S. aureus là 25,8%, P.
aeruginosa: 19,3% [22].
- Lưu Đắc Trung (1989) nghiên cứu trên 120 bệnh nhân tại chiến trường Tây Nam, kết quả cho thấy, S. aureus chiếm 59,1% [40].
- Hoàng Ngọc Hiển và cộng sự (1999) phân lập các loại vi khuẩn hay gặp tại Bệnh viện Quân y 103 từ 1/1998 - 5/1999 thấy, các loại vi khuẩn chủ yếu là: S. aureus, E. coli, Enterobacter và P. aeruginosa [11].
- Nguyễn Văn Hỷ (1996) nghiên cứu trên 51 bệnh nhân, kết quả là, S.
aureus chiếm 48,3% và P. aeruginosa: 20% [14].
Anbumani N., Kallyan J., Mallika M. nghiên cứu 3.333 vết th−ơng; kết quả cho thấy, trong số những vi khuẩn gây bệnh phân lập đ−ợc, S. aureus chiếm 37%, P. aeruginosa chiếm 15%, E. coli là 12%, Enterococcus sp là 8%, Klebsiella pneumoniae là 7%, và Acinetobacter: 6 % [46].
- N. Agnihotri, V. Gupta, R., M. Joshi (2004) phân lập 665 mẫu bệnh phẩm cho kết quả, P. aeruginosa là 59%, S. aureus: 17,9% [92].
- Dữ liệu từ các phòng nghiên cứu lâm sàng ở Mỹ, Pháp, Đức, Italy, Tây Ban Nha (2001) cho thÊy, S. aureus, Enterococcus, Coagulase-negative staphylococci (CNS), E. coli và P. aeruginosa là những chủng vi khuẩn gây bệnh th−ờng thấy ở tất cả các quốc gia trên thế giới [84].
Theo nghiên cứu của chúng tôi, sau đắp cao lỏng bạch đàn, mật độ vi khuẩn trung bình tại vết thương giảm có ý nghĩa thống kê, trong đó S. areus giảm từ 12,25 ± 3,77 (x103 vi khuẩn/cm2) xuống còn 5,83 ± 2,78 (x103 vi khuẩn/cm2) (p < 0,001), P. aeruginosa giảm từ 11,83 ± 2,58 (x103 vi khuẩn/cm2) xuống còn 5,31 ± 1,75 (x103 vi khuẩn/cm2) (p < 0,001). Kết quả
này cho thấy cao lỏng bạch đàn có tác dụng kháng khuẩn mạnh [bảng 3.17].
So với cao lân-tơ-uyn, kết quả nghiên cứu của chúng tôi có phần cao hơn đối với chủng S. areus, nh−ng thấp hơn đối với chủng P. aeruginosa [14];
so với gạc eupolin, kết quả của cao lỏng bạch đàn tương đương với tỷ lệ giảm của P. aeruginosa [23].
So sánh mật độ vi khuẩn ở hai nhóm sau 7 ngày đắp thuốc cho thấy, mật
độ vi khuẩn ở nhóm nghiên cứu giảm nhiều hơn so với nhóm chứng, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê. Trong đó mật độ S. aureus ở nhóm nghiên cứu là 5,83
± 2,78 (x103/cm2), ở nhóm đối chứng là 8,30 ± 3,0 (x103/cm2) (p < 0,01), mật độ P. aeruginosa ở nhóm nghiên cứu là 5,31 ± 1,75 (x103/cm2), ở nhóm đối chứng là 8,15 ± 1,58 (x103/cm2) (p < 0,001) [Bảng 3.19].
Kết quả trên cho thấy cao lỏng bạch đàn có tác dụng kháng khuẩn tốt hơn dung dịch Natri clorid 10%. Kết quả này cũng phù hợp với những quan sát trên lâm sàng, những vết thương đắp cao lỏng bạch đàn cho thấy đỡ tiết dịch, giảm phù nề, giảm hoặc hết mùi hôi, mô hạt phát triển mạnh; trên xét nghiệm mô bệnh học đã thấy sự hình thành các mạch máu tân tạo, đặc biệt là đã có sự hình thành các sợi collagen ở các mức độ khác nhau.
Theo chúng tôi, cao lỏng bạch đàn có tác dụng kháng khuẩn là do trong cao có chứa tanin và tinh dầu. Trong đó tanin có tác dụng làm se khô bề mặt vết thương, từ đó làm giảm tiết dịch, tạo ra môi trường không thuận lợi cho sự phát triển của vi khuẩn, tinh dầu có tác dụng kháng khuẩn mạnh.
Nhận xét của chúng tôi phù hợp với nhận xét của Nguyễn Thị Thái Hằng, Nguyễn Duy Khang (1993), Phạm Thị Hòa, Trần Xuân Mậu (1994), tinh dầu bạch đàn có tác dụng kháng khuẩn. Kết quả nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn của cao lỏng bạch đàn trên vết thương bỏng ở động vật thực nghiệm, Nguyễn Minh Hà và cộng sự (2007) cũng cho thấy, cao lỏng có hoạt tính kháng khuẩn với S. Aureus, P. aeruginosa và E. coli [8], [10], [13].
Theo Nghiêm Đình Phàn, kem H4 có tác dụng tốt đối với các vi khuẩn th−ờng thấy ở vết th−ơng. Sau 1 tuần điều trị, tỷ lệ S. aureus giảm từ 51,9%
xuống còn 37%, P. aeruginosa giảm từ 25,9% xuống còn 18,5% [25].
Theo tác giả Lê Ngọc Chính, cao bạch hoa xà có tác dụng làm giảm tỷ lệ S. aureus từ 19,3% xuống còn 12,9%, P. aeruginosa giảm từ 41,9% xuống còn 19,35% [3].
So sánh với các kết quả của các tác giả trên, chúng tôi thấy kết quả kháng khuẩn tại vết thương của cao lỏng bạch đàn là tương đương.
Vết th−ơng phần mềm là tổn th−ơng rất hay gặp, có tỷ lệ nhiễm khuẩn rất cao, tình trạng kháng kháng sinh của vi khuẩn ngày càng tăng. Vì vậy việc điều trị vết th−ơng phần mềm nhiễm khuẩn gặp nhiều khó khăn, thời gian điều trị kéo dài do tình trạng nhiễm khuẩn đã làm ảnh hưởng đến quá
trình liền vết th−ơng.
Qua kết quả nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn của cao lỏng bạch đàn, có so sánh với thuốc đối chứng và một số thuốc thảo d−ợc có tác dụng kháng khuẩn hiện đang đ−ợc sử dụng phổ biến, chúng tôi nhận thấy, cao lỏng bạch
đàn có tác dụng kháng khuẩn đối với những chủng vi khuẩn hay gặp trên vết th−ơng phần mềm.
4.4. tác dụng kích thích hình thμnh mô hạt
Quá trình liền vết th−ơng diễn ra ngay sau khi bị tổn th−ơng. Đó là quá
trình xâm nhập của các tế bào làm nhiệm vụ cầm máu, chống viêm, quá trình biểu mô hóa, tăng sinh nguyên bào sợi và hình thành sợi collagen nhằm lấp đầy và làm liền vết th−ơng.
Nếu toàn bộ lớp biểu bì bị tổn thương, lớp màng đáy bị phá vỡ thì quá
trình biểu mô hóa đ−ợc bắt đầu từ các mép vết th−ơng. ở các vết th−ơng nông, lớp tế bào màng đáy còn nguyên vẹn thì vùng tổn thương có thể được tái tạo lại nhờ sự phân bào của các tế bào còn lại ở màng đáy và biệt hóa thành các tế bào tr−ởng thành.