NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.12 Xác ñịnh các chỉ tiêu sinh lý, sinh hoá máu
ñồng thời kết hợp sử dụng thiết bị kiểm tra 18 chỉ tiêu huyết học theo mô tả bởi ðỗ ðức Việt (2006).
+ Tỷ khối hồng cầu (Hematocrit): Theo phương pháp của Wintrobe (1929).
+ Hàm lượng huyết sắc tố Hemoglobin (Hb): Tiến hành theo
phương pháp của Sunderman (1953) để tính hàm lượng Hemoglobin trong 100ml máu.
+ Cơng thức bạch cầu: Xác định theo phương pháp mơ tả bởi Schalm (1964) để xác định tỷ lệ (%) giữa các loại bạch cầu.
+ ðịnh lượng ñường huyết: Sử dụng thiết bị ño Glucometter theo mô tả
bởi Phạm Ngọc Thạch (1998).
+ ðộ dự trữ kiềm: ðịnh lượng theo phương pháp Nevodop cải tiến theo
mô tả bởi Phạm Ngọc Thạch (1998).
+ ðịnh lượng K và Na huyết thanh: Sử dụng thiết bị quang phổ hấp phụ
nguyên tử.
+ Xác ñịnh protein tổng số và các tiểu phần protein huyết thanh: Theo
phương pháp ñiện di protein huyết thanh trên gen axetat cellulose với dung dịch ñệm pH = 8,8.
+ ðịnh lượng protein tổng số trong huyết thanh: Protein tổng số trong
huyết thanh ñược xác ñịnh bằng thiết bị phân tích các chỉ tiêu sinh hóa máu tự ñộng Hitachi – 704.
2.3.13 Phương pháp gây bệnh thực nghiệm trên bê với vi khuẩn enterotoxigenic E.coli enterotoxigenic E.coli
Gây bệnh thực nghiệm trên bê sơ sinh tiến hành theo phương pháp mô tả bởi Acres và cs (1975). Tóm tắt như sau: Bê thí nghiệm được lựa chọn từ
những bị sữa đẻ lứa đầu, chưa được tiêm phịng vacxin E.coli, khơng bị tiêu
chảy. Vì vậy, phải lựa chọn bê thí nghiệm từ những cơ sở chăn ni bị sữa có lý lịch theo dõi bị mẹ. Bê được tách mẹ ngay sau khi sinh, khơng cho bú sữa đầu, ni tách biệt với 200 ml sữa hộp cho mỗi bê, cứ 6 h cung cấp sữa cho bê một lần. Vi khuẩn gây bệnh ñược lựa chọn trong số các chủng phân lập ñược, có các đặc tính sinh học của E.coli, mang kháng nguyên pili F5, sản sinh ñộc tố ñường ruột ST, gây chết 100% chuột thí nghiệm trong vịng 24 h. Ni cấy trên môi trường lỏng Tripticase soybeen ở nhiệt ñộ 370C trong thời gian 24 h. ðường gây bệnh cho bê là qua ñường miệng vào giờ thứ 7 sau khi sinh, chậm nhất là sau 16 giờ. Liều gây bệnh là 100 LD50 vì gây bệnh qua ñường miệng. Cứ 6 h bổ sung canh trùng một lần.