NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.8 Phương pháp kiểm tra tính mẫn cảm của các chủng E.coli và Salmonella với kháng sinh và hoá dược
Salmonella với kháng sinh và hoá dược
Bảng tiêu chuẩn phân tích kết quả đường kính vịng vơ khuẩn
ðường kính vịng vơ khuẩn (mm) Tên kháng sinh
và hố dược Ký hiệu
Hàm lượng (µg) R I S Tetracycline T 30 ≤ 14 15 - 18 ≥ 19 Norfloxaxin NF 30 ≤ 12 13 - 17 ≥ 18 Colistin CL 10 ≤ 8 9 - 10 ≥ 11 Neomycin N 30 ≤12 13 - 16 ≥ 17 Penicillin P 10 ≤11 12 - 21 ≥ 22 Ampicillin AMP 10 ≤11 12 -13 ≥ 14 Streptomycin S 10 ≤11 12 - 14 ≥ 15 Enrofloxacin EF 30 ≤12 13 - 16 ≥ 17 Erythromycin ER 15 ≤13 14 - 17 ≥ 18 Kanamycin K 30 ≤13 14 - 17 ≥ 18
Phương pháp Bauer - Kirby dùng để đánh giá tính mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn mô tả bởi Carter và Cole (1990) được sử dụng trong thí nghiệm này. Môi trường tiêu chuẩn dùng ñể thử kháng sinh ñồ theo phương pháp Bauer - Kirby là mơi trường Mueller - Hinton agar được chuẩn bị theo hướng dẫn của nơi sản xuất và ñược ñổ vào ñĩa petri ñảm bảo mặt thạch dày 4 mm. ðĩa thạch có đường kính 10 cm cần đổ 25 ml mơi trường, đĩa có đường kính 15 cm đổ 60 ml mơi trường. Các ñĩa thạch được bao gói bảo quản ở nhiệt ñộ 4 - 80C, không quá 2 tuần, trước khi sử dụng ñể tủ ấm 10 - 20 phút. Vi khuẩn cần kiểm tra tính mẫn cảm với kháng sinh nuôi cấy trên môi trường lỏng Brain heart infusion. Dùng micropipet vô trùng chuyển 10 µl canh trùng lên mặt đĩa thạch, dàn ñều, ñể yên trong thời gian 3 - 5 phút cho khô mặt thạch. Dùng panh ñặt và cố ñịnh các ñĩa giấy chứa kháng sinh cần kiểm tra sao cho các ñĩa giấy này tiếp xúc với mặt thạch và cách nhau khơng dưới 15mm, để n 15 - 20 phút rồi lật úp đĩa thạch, ủ ấm hiếu khí ở nhiệt ñộ 370C. ðọc kết quả sau 18 – 24 h bằng cách đo đường kính vịng vơ khuẩn. Kết quả này ñược so sánh với bảng tiêu chuẩn cho từng loại kháng sinh ñể ñánh giá mức ñộ mẫn cảm của vi khuẩn đối với kháng sinh đó.