3.2.5.1. Dung môi
Chất rửa giải sử dụng trong sắc ký hấp phụ được dựa trên các dung môi khơng phân cực như hexan hoặc chứa lượng nhỏ nhóm phân cực như 2-propanol. Khi mẫu được đưa vào cột thì các phân tử mẫu có chứa các nhóm chức phân cực sẽ liên kết với các vị trí hoạt hóa trên chất nhồi.
Chúng sẽ bị thay thế lần lượt bởi các phân tử có chứa nhóm phân cực của chất rửa giải khi khai triển sắc ký và sẽ di chuyển xuống các vị trí mới ở phía dưới của cột. Việc thay thế này dễ hay không phụ thuộc vào độ phân cực tương đối của chúng. Các phân tử càng phân cực thì sẽ càng hấp phụ mạnh và vì thế sẽ di chuyển chậm trên cột.
Các dung mơi như đã đề cập đóng vai trị cạnh tranh với các phân tử trong mẫu ở các vị trí hoạt động trên chất hấp phụ. Như vậy, các phân tử dung mơi liên kết càng mạnh với pha tĩnh thì các chất trong mẫu nằm trong pha động lâu hơn và như thế chúng càng được rửa giải nhanh hơn. Vì thế sự lưu giữ khơng bị ảnh hưởng quá nhiều bởi khả năng hòa tan của mẫu trong chất rửa giải mà bởi khả năng hấp phụ của dung mơi. Dung mơi ban đầu nên chọn có những lực rửa giải trung bình để những dung mơi mạnh hơn tiếp theo có thể được thử.
Nói chung, với các chất hấp phụ phân cực như oxit nhôm hoặc silicagen, khả năng hấp phụ tăng lên khi chất bị hấp phụ có tính phân cực càng tăng. Đối với cacbon thì trật tự ngược lại. Trappe đã tìm thấy lực rửa giải của một loạt dung mơi cho những chất hấp phụ trên cột chứa silicagen giảm theo trật tự như sau:
Nước nguyên chất > methanol > etanol > propanol > aceton > etyl axetat > dietyl ête > clorofom > diclometan > benzene > toluene > tricloetylen > cacbon tetraclorua > cyclohexan > hexan.
Thực tế, dung mơi là yếu tố kiểm sốt trong sắc ký hấp phụ. Với dãy trên ta có thể chọn một dung mơi hoặc hỗn hợp dung môi với lực rửa giải thích hợp.