CHƯƠNG 2 : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3 Phương pháp nghiên cứu
2.3.4. Xác định các thông số sinh trưởng của Thalassiosira pseudonana
Sinh trưởng của Thalassiosira pseudonana được đánh giá thông qua các chỉ số như xác định số lượng tế bào bằng b ồng đếm u Neubauer (Đức), lượng sinh khối khô (SKK, g/L) và hàm lượng sắc tốchlorophyll a, b, carotenoit (μg/L).
Đếm số lượng tế bào bằng buồng đếm hồng cầu Neubauer
Số lượng tế bào đếm được trong dịch ni được tính theo cơng thức:
Số lượng TB = TB/mL x thể tích mơi trường ban đầu (mL) x hệ số pha lỗng (nếu có)
[114].
Tốc độ sinh trưởng đặc trưng µ/ngày được xác định theo cơng thức:
µ = (lnN1 - Nln 0)/ (t1 - t0)
Trong đó: µ là tốc độ sinh trưởng đặc trưng của vi tảo có đơn vị (µ/ngày), N1 là MĐTB tại thời điểm t1, N0 là MĐTB ở thời điểm t0 (tb/mL) 15]. [1
Xác định thời gian nhân đôi thế hệ: (td, ngày) td = ln2/μmax. Trong đó: μmax là tốc độ sinh trưởng cực đại đặc trưng.
Xác định sinh khối khô: Phương pháp xác định sinh khối khô sấy ở 105oC cho đến khi khối lượng khơng đổi được trình bày ở Phụ lục 6.
Xác định kích thước và hình thái tế bào
Soi mẫu dưới kính hiển vi quang học sau đó tiến hành xác định: hình thái tế bào được chụp bằng máy ảnh kỹ thuật số Canon IXY Digital 7.0 của Nhật Bản dưới kính hiển vi quang học Olympus CX21 ở độ phóng đại 400 lần và độ phóng đại của máy ảnh 5 lần.
Đo kích thước tế bào: dùng bộ thước đo trên kính hiển vi quang học gồm thước thị kính và thước vật kính. Đo đường kính và trục cao của tế bào theo đơn vị micron (µ). Đo 30 tế bào và lấy giá trị trung bình.
Cơng thức xác định kích thước tế bào: kích thước tế bào (µm) = r x h. Trong đó: r là chiều dài của tế bào, h là chiều rộng của tế bào.
Xác định hàm lượng sắc tố: Hàm lượng sắc tố chlorophyll a, b và carotenoit được chiết xuất bằng axeton 90% và xác định theo phương pháp so màu đo quang phổ ở các bước sóng tương ứng và tính theo cơng thức mơ tả của Christopher và cộng sự (1988) [116] được trình bày ở Phụ lục 7.