CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2. Điều kiện nuôi sinh khối Thalassiosira pseudonana ở các quy mô khác
3.3.2.3. Thử nghiệm nuôi thương phẩm với nguồn con giống được sản xuất bằng
bằng Thalassiosira pseudonana
Trên cơ sở kết quả nghiên cứu của các tác giảBabu và Mude (2014) [91], Silva
và cộng sự (2015) [92 , Kumar và Krishna (2015) [93] ], Suriya và cộng sự (2016)
[94], Samadan và cộng sự (2018) [95 , ] Nguyễn Phương Toàn và cộng sự (2013) [145] Nguy, ễn Duy Quỳnh Trâm và Huỳnh Thị Hương(2017) 46] [1 đã công bố về
nuôi thương phẩm TTCT trong các ao ni được lót bạt, trong nghiên cứu này, chúng tôi thử nghiệm nuôi thương phẩm TTCT với nguồn giống PL12 được sản xuất bằng Thalassiosira pseudonana để chứng minh nguồn tơm giống có tốc độ tăng
trưởng ổn định và có tỉ lệ sốngcao, thu được năng suất tôm thương phẩm cao và an tồn cho sản phẩm tơm ni trong ao ni 6.400 m2(Phụ lục 21).
a. Kết quả nuôi thương ẩm tôm thẻ chân trắngph
TTCT có tốc độ áph t triển và tăng trưởng nhanh trong điều kiện nuôi thâm canh [99]. Kết quả tăng trưởng về chiều dài của TTCT nuôi thương phẩm từ nguồn tôm
giống postlarvae 12 được sản xuất bằng thức ăn Thalassiosira pseudonana tươi sống vàđượctrình bày ở trên bảng 3.20.
Bảng 3.20. K t qu ế ả tăng trưởng về chi u dàề i của tôm thẻ chân trắng nuôi
thương phẩm (số liệu trình bày là giá trị trung bình ± SE)
Lơ thí nghiệm
Chiều dài to n thân (cm) à
15 ngày 30 ngày 45 ngày 60 ngày 75 ngày 90 ngày Lô TN 3,88 ± 0,05b 5,63 ± 0,04b 8,35 ± 0,07b 10,40 ± 0,08b 11,66 ± 0,01b 13,54 ± 0,06b
Lô ĐC 3,30 ± 0,07a 4,71 ± 0,12a 5,82 ± 0,03a 7,95 ± 0,04a 9,85 ± 0,06a 11,10 ± 0,04a
Ghi chú: n=30 cá thể cho mỗi nhóm; các chữ cái cùng cột khác nhau thể hiện sự sai khác nhau có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Lô TN: lô thử nghiệm, sử dụng nguồn giống TTCT PL12
sản xuất bằng T. pseudonana; Lô ĐC: lô đối chứng, sử dụng nguồn giống TTCT PL12 sản xuất
bằng T. weissflogii. Các điều kiện nuôi trồng khác được đồng nhất giống nhau.
Kết quả ở trên bảng 3.20 ã đ chỉ ra sau 15 ngày nuôi chiều dài của TTCT ở lô thử
nghiệm gấp 1,18 lần so với lô đối chứng. Sau 90 ng y nuôi, chiều dài của TTCT ởà lô thử nghiệm gấp 1,22 lần so với lô đối chứng. Như vậ ởy, lô đối chứng tôm nuôi
tăng trưởng ch m v chiều dàậ ề i toàn thân so với lơ thí nghiệm và sự sai khác có ý nghĩa thống kê sinh học (p<0,05). Theo công bố của Châu Tài Tảo và cộng sự
(2017), ở điều ki n nuôi trong b 1 mệ ể 3 với chiều d i tơm th nghià í ệm l 1,3 cm sau à 30, 60 và 90 ngày ni tơm đã có chiều dài tồn thân dao động từ ( - 55,6 ,9) cm, ( - 9,3 10,9 cm v 12,2 12,9 cm [1) à ( - ) 47]. Ở diện t ch ao tí ừ (1.300 1.700 - ) m2 và độ sâu nước 1,8 m đã cho thấy cuối v nuôi chi u dàụ ề i thân của TTCT đạt từ (11,9 - 13,2) cm sau 90 ngày nuôi cũng đã được Nguyễn Duy Quỳnh Trâm và Huỳnh Thị Hương (2017) công bố[146].
Kết quả tăng trưởng về khối lượng của TTCT nuôi thương phẩm đượcchỉ ra trên bảng 3.21.
Bảng 3.21. Tăng trưởng về khối lượng củ tôm thẻ chân trắng nuôi thương a ph m (ẩ số liệu trình bày là giá trị trung bình ± SE)
Lơ thí nghiệm
Khối lượng toàn thân (g)
15 ngày 30 ngày 45 ngày 60 ngày 75 ngày 90 ngày Lô TN 1,25 ± 0,03b 2,16 ± 0,13b 5,59 ± 0,12b 12,07 ± 0,21b 18,05 ± 0,12b 24,72 ± 0,35b
Lô ĐC 1,02 ± 0,01a 1,93 ± 0,04a 4,90 ± 0,06a 10,52 ± 0,10a 15,28 ± 0,05a 22,30 ± 0,07a
Ghi chú: n=180 cá thể cho mỗi nhóm; các chữ cái cùng cột khác nhau thể hiện sự sai khác nhau có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Lô TN: lô th nghiử ệm, sử dụng nguồn giống TTCT
PL12 sản xuất bằng T. pseudonana; Lô ĐC: lô đối chứng, sử dụng nguồn giống TTCT PL12
sản xuất bằng T. weissflogii. Các điều kiện nuôi trồng khác được đồng nhất giống nhau.
Kết quả được trình bày ở trên ả b ng 3.21 cho ta thấy ở lô đối chứng và thử
nghiệm khối lượng của TTCT ở lô thử nghiệm gấp 1,12 lần so với lô đối chứng sau 30 ngày nuôi. Tương tự, sau 90 ngày nuôi tăng trưởng về khối lượng của TTCT ở lô thử nghiệm gấp 1,11 lần so với lô đối chứng. Như vậy, ởlô đối chứng tôm nuôi tăng trưởng ch m v khậ ề ối lượng tồn thân so với lơ thí nghiệm và sự sai khác có ý nghĩa
thống kê sinh học (p<0,05).
Sở dĩ, nghiên cứu đã thu được kết quả của lô thử nghiệm cao hơn lô đối chứng bởi vì nguồn giống TTCT PL12 được lựa chọn kỹ đảm bảo sạch bệnh, khỏe mạnh và
trước khi đưa vào ni thương phẩm thì nguồn tơm giống ở lơ thử nghiệm đã có chiều dài, khối lượng khác biệt so với lô đối chứng (p<0,05). Lô thử nghiệm đã sử dụng nguồn giống TTCT PL12 ở lơ sản xuất 3 có chiều dài đạt (10,271 ± 0,000) mm
và khối lượng đạt (1,263 ± 0,006) g, ngược lại ở lô đối chứng các thơng số nói trên
đạt (9,139 ± 0,004) mm và (1,183 ± 0,001) g, tương ứng với kết quả thí nghiệm của
KP 2.
Ở ề đi u ki n nuôi trong b 1 mệ ể 3 với khối lượng tôm bố tr th nghiệm l 0,019 g í í à thì sau 30, 60 và 90 ngày ni có khối lượng dao động từ(1,6 1,9) g, (8,0 - 10,4) g - và (11,8 14,1) g đã được - Châu T i Tảo và à cộng sự (2017) công bố 47][1 . Trong
khi đó, với điều kiện ni trong ao đất thì TTCT có t c ố độ tăng trưởng ph biến ổ
khoảng (0,11 - 0,17) g/ngày cũng đã được công bố [95]. Nghiên cứu củaNguyễn Phương Toàn và cộng sự (2013) 45][1 đã cho thấy rằng TTCT được nuôi trong b ể
composite v i c c mớ á ậ ột đ 40, 60 v 80 con/mà 2đã đạt khối lư ng tương ợ ứng l 16,5, à 15,8 v 12,4 g/con sau 75 ngà ày nuôi.
Cũng cần nêu rõ rằng, ở giai ạđo n đầu mới th giả ống sẽ rất khó tính tốn chính xác được tỉ ệ ố l s ng của TTCT trong các ao nuôi. Thời gian này tơm có kích thước nhỏ, khó quan sát, tơm c thểó hao hụt nhiều do sốc môi trường m i. Do vậy, việc ớ
quan sát, theo dõi tỉ lệ sống của chúng trong ao nuôi là rất cần thiết. Kết quả theo
dõi về tỉ lệ sống của TTCT trong các ao nuôi thương phẩm được trình bày ở trên bảng 3.22.
Bảng 3.22.T ỉ lệ sống của tôm thẻ chân trắng ni thương phẩm (số liệu trình
bày là giá trị trung bình ± SD)
Lơ thí nghiệm
T l sỉ ệ ống của tôm thẻchân trắng (%)
15 ngày 30 ngày 45 ngày 60 ngày 75 ngày 90 ngày Lô TN 94,00 ± 0,50b 89,07 ± 0,40b 87,60 ± 1,10b 85,70 ± 0,17b 84,40 ± 0,66b 81,50 ± 0,50b
Lô ĐC 90,67 ± 0,76a 85,17 ± 0,76a 82,70 ± 0,26a 77,16 ± 0,54a 76,00 ± 0,53a 73,73 ± 0,25a
Ghi chú: n=180 cá thể cho mỗi nhóm; các chữ cái cùng cột khác nhau thể hiện sự sai khác nhau có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Lô TN: lô th nghiử ệm, sử dụng nguồn giống TTCT
PL12 sản xuất bằng T. pseudonana; Lô ĐC: lô đối chứng, sử dụng nguồn giống TTCT PL12
sản xuất bằng T. weissflogii. Các điều kiện nuôi trồng khác được đồng nhất giống nhau.
Kết quả nuôi thương phẩm TTCT chỉ ra trên bảng 3.22 đã cho thấymơ h nh thửì nghiệm đã cho kết quả ề ỉ ệ ố v t l s ng cao so với ở công thức đối chứng. Như vậy, ở lơ đối ch ng tơm ni có t l sứ ỉ ệ ống thấp hơn so với lô thửnghiệm 1,11 lần. Kết quảso sánh về ỉ ệ ống của TTCT sau 30 t l s ng y ni cà ó s ự sai kh c thống kê sinh học á (p<0,05).
Với điều kiện nitrong ao đất, TTCT có tỉ l s ng 62 - 98% đã được Samadan ệ ố
và cộng sự (2018) cơng bố[95 cịn ], ở bể1 m3 với mậ ột đ tôm nuôi 150 con/m3 sau 90 ng y ni cà ó t l sỉ ệ ống dao động từ 72,2 - 80,9% cũng đã được công bố bởiChâu Tài Tảo và cộng sự (2017) [1 47]. Cịn trong điều kiện ni TTCT với diện t ch ao í t ừ 1.300 1.700 m - 2có tỉ ệ ố l s ng đạt từ 56,9 65,2% - , tác giả Nguyễn Duy Quỳnh Trâm và Huỳnh Thị Hương (2017) [146] đã công bố. Trong nghiên cứu của chúng tôi thu được năng suất TTCT ở lô thử nghiệm (đạt 5,561 tấn/ha, FCR = 1,18/ 1 kg tôm) sau 90 ngày nuôi so với lô đối chứng (đạt 4,688 tấn/ha, FCR = 1,67/ 1 kg tôm)
(Phụ lục 23).
b. Phân tích hàm lượng protein, kim loại nặng và dư lượng ákh ng sinh của tôm thẻ chân trắng
TTCT thương phẩm cần phân tích chất lượng của chúng như protein, hàm lượng kim lo i nạ ặng và dư lượng kháng sinh. Kết quả phân tích hàm lượng protein, kim loạ ặi n ng và kháng sinh của TTCT thương phẩm được ch ỉra trên ng 3.23. bả
Bảng 3.23. Hàm lượng protein, kim loại v khà áng sinh c a tôm nguyên liủ ệu được ni t ừ
mơ hình th nghi m ử ệ
Tên chỉ tiêu Đơn vị Phương pháp thử Kết quả
Tetracyline mg/kg TCVN 8349:2010 KPH (<0,01)
Oxytetracyline mg/kg TCVN 8349:2010 KPH (<0,01)
Chloramphenicol mg/kg TCVN 8140:2009 KPH (<0,01)
Hàm lượng Cadmi (Cd) mg/kg TCVN 7603:2007 KPH (<0,8.10-4)
Hàm lượng Ch (Pb)ì mg/kg TCVN 7602:2007 KPH (<0,8.10-3)
Hàm lượng Asen (As) mg/kg TCVN 7770:2007 KPH (<0,2.10-3)
Hàm lượng Thủy Ngân (Hg) mg/kg TCVN 7604:2007 KPH (<0,5.10-3) Nitrofuran: - AOZ - AMOZ - AHD - SEM µg/kg µg/kg µg/kg µg/kg TCVN 8351:2010 KPH (<0,1) KPH (<0,3) KPH (<0,3) KPH (<0,3) Hàm lượng Protein % TCVN 8099 1:2009 - 16,80
Ghi chú: KPH: không phát hi n ngh a là dệ ĩ ưới ngưỡng phát hiện của phương pháp th . ử
Qua kết quả nghiên cứu thu được trong bảng 3.23 đã cho ta th ấy hàm lượng protein của TTCT nuôi thương phẩm đạt 16,80%. ã Đ khơng phát hiện ra c c lố ại khá ng sinh nguy hiểm như Tetracyline, Oxytetracyline, Chloramphenicol, AOZ,
AMOZ ở TTCT thương phẩm.Hàm lượng các kim loại nặng nhưCd, As, Pb v Hg à
đã không được phát hiện (theo Quyết định số 46/2007/QĐ - BYT [139] và QCVN 8 - 2 : 2011/BYT [140]) đối với mẫu TTCT àth nh phẩm.
TTCT thươngphẩm đư c thu đợ ể chếbiến tôm th nh phẩm đà áp ứng c c yêu cầu á của các h ệ thống quản lý: chứng nhận Global G.A.P (Global Good Agricultural
Practices - Thực hành nơng nghiệp tốt tồn cầu), tiêu chuẩn BAP (Best Aquaculture Practices - Thực hành nuôi trồng thủy sản tốt nhất), chứng nh n ASCậ (Aquaculture Stewardship Council - Hội đồng quản lý nuôi trồng thủy sản) ệ ố, h th ng quản lý chất
lượng ISO (International Organization for Standardization - Tổ chức tiêu chuẩn hóa quốc tế) và đạt yêu cầu để có thể xuất bán và áo c c chuỗi siêu thị bán l như Tesco, ẻ
Walmart… của Hoa Kỳ và UK (United Kingdom).
Như vậy, chúng tôi đã phân lập lại đượcThalassiosirasp. từ các mẫunhận từ tập đồn giống tảo của Cơng ty Cổ phần Chăn nuôi C.P Việt Nam đã bị nhiễm vi sinh vật và tảo tạp trong q trình lưu giữ và ni ở các cấp. Dựa trên những đặc điểm
hình thái tế bào, so sánh trình tự nucleotide đoạn gen 18S rRNA, chúng tôi đã định
tên khoa học của Thalassiosira sp. thuộc về loài Thalassiosira pseudonana. Trình
tự đoạn gen 18S rRNA của vi tảo nêu trên đã được đăng ký trên GenBank với mã số được cấp là MH545685.1. Lần đầu tiên ở Việt Nam, chúng tôi đã xác định được trình tự đoạn gen 18S rRNA và định tên khoa học chính xác lồi Thalassiosira pseudonana phân lập lại từ nguồn giống nhập nội của Thái Lan. Kích thước tế bào
của T. pseudonana (dài 2,5 ± 0,2 µm, rộng 2,0 ± 0,2 µm) nhỏ hơn lồi Thalassiosira weissflogii(dài 5,3 0,5 ± µm, rộng 2,6 ± 0,3 µm).
Chúng tơi đã lưu giữ T. pseudonana thành cơng ở nhiệt độ phịng trong ống
nghiệm sử dụngmôi trường lỏng AGP 20% và trên mơi trường thạch có bổ sung 0,8 - 1,5% agar. Đã nghiên cứu được đặc điểm sinh học sinh sản của T. pseudonanalàm
cơ sở khoa học cho hoạt hóa giống trong phịng thí nghiệm. Đường cong sinh trưởng của T. pseudonanađược ni trồng ở quy mơ bình thủy tinh 1 L sau 14 ngày ni cấy đã xác định được MĐTB đạt cực đại là (1,59 ± 0,05) x 106tb/mL ở6 ngày
nuôi cấy Trong khi đó, lồi . T. weissflogiicó MĐTB đạt cực đại chỉ là (1,11 ± 0,03) x 106tb/mL, thấp hơn so với loài T. pseudonana.
Kết quả nuôi sinh khối T. pseudonana ở bình thủy tinh 0,25 L, 1 L và 2 L có
MĐTB đạt cực đại tương ứng là (1,35 ± 0,02) x 106 tb/mL, (1,59 ± 0,05) x 106 tb/mL và (1,58 ± 0,02) x 106tb/mLcao hơn so với lồi T. weissflogiicó MĐTB đạt cực đại lần lượt là (1,02 ± 0,01) x 106tb/mL, (1,11 ± 0,03 x 10) 6 tb/mL và (1,09 ± 0,01) x 106 tb/mL. Tương tự, ở quy mô bể composite 0,2 m3, 1 m3 và 3,5 m3, thông
số nêu trên của T. pseudonana tương ứng đạt (1,18 ± 0,01) x 106 tb/mL, (0,82 ± 0,04) x 106tb/mL và (0,68 ± 0,01) x 106 tb/mL cịn lồi T. weissflogii chỉ đạt (0,99 ± 0,02) x 106tb/mL, (0,74 ± 0,01) x 106tb/mL và (0,59 ± 0,04) x 106tb/mL; thời gian đạt mật độ cực đại là 6 ngày. ết quả thu được nêu trên K cao hơn so với công bố củ tác giả a Trần Thị Lê Trang và Lục Minh Diệp (2017) [4], Trần Thị Lê Trang
(2014) [5], Gao và Yang (2012) [65], Amzil và cộng sự (2016) [69].Một quy trình
cơng nghệ ni T. pseudonana ở quy mơ phịng thí nghiệm và pilot (0,2 - 3,5 m3)
thu hoạch năng suất đạt 120 m3sinh khối tươi sống/ngày cũng đã được chúng tôi xây dựng Thời gian lưu giữ. mậtđộ cực đại của quần thể tảo T. pseudonanađược
kéo dài hơn từ 2 3 ngày so với loài T. weissflogii. -
Sinh khối T. pseudonana ni trồng được có giá trị dinh dưỡng cao hơn T. weissflogii bởi vì T. pseudonana có hàm lượng PUFAs đạt (42,44 ± 0,16)% so với
TFA cịn lồi T. weissflogii chỉ đạt (34,77 ± 0,08)%; EPA của T. pseudonana cao
gấp 1,25 lần so với T. weissflogii; DHA của T. pseudonana đạt (1,65 ± 0,01%) trong khi không phát hiện hàm lượng này ở T. weissflogii trong cùngmột điều kiện nuôi trồng. Tương tự, hàm lượng protein của T. pseudonanađạt (13,20 ± 0,01)% so
với SKK trong khi đó lồi T. weissflogii chỉ đạt (6,63 ± 0,25)%, lipít của T. pseudonana cao gấp 1,93 lần so với loài T. weissflogii, carbohydrate của T. pseudonana đạt (10,00 ± 0,12)% còn ở T. weissflogii chỉ đạt (7,86 ± 0,76)%. Ngoài
ra, sinh khối T. pseudonana giàu hàm lượng Cu cao gấp 1,61 lần so với( ở sinh khối
T. weissflogii) và Mn đạt 3,11 mg/kg nhưng T. weissflogii chỉ đạt < 0,01 mg/kg.
Chúng tôi muốn nhấn mạnh rằng, hàm lượng các kim loại nặng như Cd, Pb, As và
Hg trong sinh khối của cả 2 loài nêu trên đều nằm dưới ngưỡng cho phép đối với các mẫu thủy sản và sản phẩm thủy sản theo quy chuẩn Việt Nam (2011) [140].
Kết quả nghiên cứu về độc tính cấp và độc tính bán trường diễn đã cho thấy sinh
khốiT. pseudonana là không độc, an toàn cho TTCT khi chúng được sử dụng làm thức ăn tươi sống. Các kết quả nghiên cứu về vận động, khả năng nhận thức và trí
nhớ của chuột khi sử dụng sinh khốiT. pseudonana(tương ứng liều 100, 150 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày) đã không ảnh hưởng đến chức năng vận động nhưng lại tăng khả năng khám phá và giúp tăng cường trí nhớ ở chuột sau 4 tuần. Đây là những kết quả hoàn toàn mới được ghi nhận ở Việt Nam.
Lần đầu tiên ở Việt Nam, sinh khối T. pseudonana tươi sống nuôi trồng được đã được thử nghiệm làm thức ăn cho ấu trùng TTCT. Kết quả nghiên cứu đã chỉ ra rằng tăng trưởng về chiều dài toàn thâncủa ấu trùng TTCT PL12 cao hơn từ 1,07 - 1,12 lần, tăng trưởng về khối lượng cao gấp 1,07 lần và tỉ lệ sống tăng 1,10 - 1,11
lần so với lô sử dụng T. weissflogii làm thức ăn tươi sống. Ở giai đoạn PL12, ấu trùng TTCT có chiều dài đạt từ 9 - 11 mm - hoàn toàn đáp ứng yêu cầu của quy chuẩn kỹ thuật quốc gia Việt Nam (2014). Ngồi ra, ngoại hình, chất lượng của ấu
trùng TTCTđáp ứng theo QCVN 02 - 19: 2014/BNNPTNT [143] và TCVN 10257: 2014 [144] do Bộ Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã cơng bố. Trong điều kiện
thí nghiệm của chúng tơi đã không phát hiện thấy dư lượng kháng sinh nguy hiểm ở ấu trùng TTCT sản xuất được và hàm lượng các kim loại nặng như Pb, Hg, Cd và As đều nằm dưới ngưỡng cho phép đối với các mẫu thực phẩm theo Quyết định số 46/2007/QĐ - BYT [139] và QCVN 8 2: 2011/BYT [140]. -
So với nguồn giống tôm được sản xuất bằng T. weissflogii, sau 90 ngày nuôi
TTCT bằng thức ăn có T. pseudonanatươi sống đã làm tăng chiều dài tồn thân của tơm gấp 1,22 lần; tơm đạt tăng trưởng về khối lượng và có tỉ lệ sống cao gấp 1,11 lần. Ngoài ra, năng suất thu hoạch tôm thương phẩm ở lô được sử dụng T. pseudonanađạt cao hơn 1,19 lần nhưng lại có FCR thấp hơn 0,71 lần so với lô sử