CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2. Điều kiện nuôi sinh khối Thalassiosira pseudonana ở các quy mô khác
3.3.1.2. Độc tính bán trường diễn của Thalassiosira pseudonana
a. Ảnh hưởng của Thalassiosirapseudonana lên tình trạng chung và sự thay đổi thể trọng của chuột cống trắng khi dùng dài ngày
Chuột cống trắng được theo dõi hàng ngày về tình trạng chung gồm hoạt động, ăn uống, tình trạng lơng, da, niêm mạc, chất tiết. Chuột ở lô chứng và các lô dùng
Thalassiosira pseudonana đều hoạt động bình thường. Chuột lơng mượt, da niêm mạc bình thường, ăn uống bình thường, nhanh nhẹn, mắt sáng và phân khơ. Ngồi đánh giá tình trạng chung của chuột ở các lơ thí nghiệm, thể trọng của chuột cũng được tiến hành theo dõi ở bảng 3.6.
Bảng 3.6.Ảnh hưởng của T. pseudonana đối với trọng lượng cơ thể chuột (n = 8, ± SD)
Thời điểm xét nghiệm
Trọng lượng cơ thể (g)
Lô chứng Lô thử nghiệm 1 Lơ thử nghiệm 2
Trước thí nghiệm 195,93 ± 3,02 202,58 ± 2,14 197,00 ± 3 ,51
Sau 14 ngày 208,60 ± 3,34 215,65 ± 2,70 202,15 ± 7,20
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Sau 28 ngày 223,99 ± 4,04 229,97 ± 4,22 216,52 ± 8,53
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Ghi chú: Lô chứng: uống dung dịch NaCl 0,9% tương ứng với liều 1,00 mL/kg trọng lượng cơ
thể ngày; Lô thử nghiệm : uống vi tảo liều / 1 100 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày (liều dự kiến có tác dụng ; Lô thử nghiệm : uống vi tảo) 2 liều 300 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày. Mức liều ở lô
thử nghiệm gấp 3 lần mức liều lô thử nghiệm 2 1.
Kết quả thu được ở bảng 3.6 cho thấy sau 28 ngày theo dõi, tất cả các lơ thí nghiệm thể trọng của chuột đều tăng so với thời điểm trước thí nghiệm. Khi so sánh giữa các lơ thí nghiệm tại cùng thời điểm nghiên cứu, thể trọng chuột của các lơ khơng có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p>0,05). Sau 14 và 28 ngày lấy mẫu, chuột tăng cân đều giữa các lơ thí nghiệm. Khi so sánh trong cùng lơ giữa các thời điểm sau so với trước thấy thể trọng chuột của cả ba lô nghiên cứu đều tăng, sự thay đổi có ý nghĩa thống kê với (p<0,05).
Như vậy, T. pseudonanavới các mức liều và thời gian sử dụng trong nghiên cứu không gây ảnh hưởng đến sự phát triển thể trọng của chuột.
b. Ảnh hưởng của Thalassiosira pseudonana lên một số chỉ tiêu huyết học của chuột
Kết quả ảnh hưởng của Thalassiosira pseudonana lên chức năng tạo máu của chuột thông qua một số chỉ tiêu huyết học của chuột thí nghiệm được trình bày ở bảng 3.7 và bảng 3.8.
Bảng 3.7. Ảnh hưởng của T. pseudonana lên một số chỉ tiêu huyết học của chuột (n = 8, ± SD)
Thời điểm
xét nghiệm Lô chứng Lô thử nghiệm 1 Lô thử nghiệm 2
Số lượng hồng cầu trong máu chuột (x 1012tế bào/L)
Trước thí nghiệm 8,06 ± 0,61 7,95 ± 0,86 7,53 ± 0,40
Sau 28 ngày 7,79 ± 0,52 6,99 ± 0,87 6,80 ± 0,71
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Hàm lượng huyết sắc tố trong máu chuột (g/dL)
Trước thí nghiệm 139,25 ± 6,71 137,00 ± 10,81 132,25 ± 7,23
Sau 28 ngày 155,63 ± 5,58 145,13 ± 12,44 146,25 ± 8,26
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Số lượng bạch cầu trong máu chuột (x 109g/L)
Trước thí nghiệm 7,34 ± 0,39 7,21 ± 0,62 7,35 ± 0,53
Sau 28 ngày 9,52 ± 3,27 9,56 ± 3,35 9,83 ± 3,15
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Ghi chú: Lô chứng: uống dung dịch NaCl 0,9% tương ứng với liều 1,00 mL/kg trọng lượng cơ thể/ngày; Lô thử nghiệm 1: uống vi tảo liều 100 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày (liều dự kiến có tác
dụng); Lơ thử nghiệm 2: uống vi tảo liều 300 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày. Mức liều ở lô thử nghiệm 2 gấp 3 lần mức liều lô thử nghiệm 1.
Bảng 3.8. Ảnh hưởng của T. pseudonana lên công thức bạch cầu trong máu chuột (n = 8, ± SD)
Thời điểm xét nghiệm
Lô chứng Lô thử nghiệm 1 Lô thử nghiệm 2
Lympho (%) Trung tính (%) Lympho (%) Trung tính (%) Lympho (% Trung tính ) (%) Trước thí nghiệm 42,41±9,98 38,34±7,81 50,55±9,88 36,24±10,26 42,06±11,46 34,54±10,55 Sau 28 ngày 48,91±2,77 40,64±12,24 42,39±12,37 43,08±11,85 47,84±13,95 37,24±5,57 P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05
Ghi chú: Lô chứng: uống dung dịch NaCl 0,9% tương ứng với liều 1,00 mL/kg trọng lượng cơ
thể/ngày; Lô thử nghiệm : uống vi tảo liều 1 100 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày (liều dự kiến có tác dụng ; Lơ thử nghiệm : uống vi tảo) 2 liều 300 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày. Mức liều ở lô
thử nghiệm gấp 3 lần mức liều lô thử nghiệm 2 1.
Kết quả được trình bày ở bảng 3.7 và bảng 3.8 cho ta thấy khi cho chuột uống T. pseudonana (liều 100 và 300 mg/kgtrọng lượng cơ thể/ngày) liên tục trong 28 ngày, các chỉ số huyết học trong máu chuột thay đổi khơng có ý nghĩa thống kê giữa các lơ chứng và thực nghiệm cũng như giữa các lô thực nghiệm với nhau (p>0,05). Như vậy, T. pseudonanasử dụng với các mức liều và thời gian khác nhau trong nghiên cứu đã không làm thay đổi các chỉ tiêu chức năng tạo máu của chuột.
c. Đánh giá mức độ tổn thương tế bào gan và chức năng gan chuột khi dùng Thalassiosira pseudonana dài ngày
Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của Thalassiosira pseudonana đến hoạt độ của các
enzyme AST và ALT của chuột trong thí nghiệmđược thể hiện ởbảng 3.9.
Bảng 3.9. Đánh giá mức độ tổn thương tế bào và chức năng gan, thận của chuột khi dùng T.
pseudonana dài ngày (n = 8, ± SD)
Thời điểm
xét nghiệm Lô chứng Lô thử nghiệm 1 Lô thử nghiệm 2
Hoạt độ AST trong máu chuột (UI/L)
Trước thí nghiệm 148,13 ± 31,03 141,00 ± 33,16 146,25 ± 21,56
Sau 28 ngày 142,75 ± 21,86 128,88 ± 8,34 146,88 ± 16,73
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Hoạt độ ALT trong máu chuột (UI/L)
Sau 28 ngày 106,38 ± 7,42 100,63 ± 9,87 107,13 ± 14,26
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Nồng độ Ure trong máu chuột (mg/dL)
Trước thí nghiệm 7,69 ± 0,68 6,75 ± 1,05 5,00 ± 1,53
Sau 28 ngày 6,09 ± 1,58 5,88 ± 0,67 4,28 ± 0,79
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Nồng độ Creatinin trong máu chuột (mg/dL)
Trước thí nghiệm 56,25 ± 3,15 55,13 ± 3,18 54,50 ± 4,00
Sau 28 ngày 41,88 ± 5,38 39,75 ± 3,01 50,38 ± 25,09
P trước - sau >0,05 >0,05 >0,05
Ghi chú: Lô chứng: uống dung dịch NaCl 0,9% tương ứng với liều 1,00 mL/kg trọng lượng cơ thể/ngày; Lô thử nghiệm : uống vi tảo liều 1 100 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày (liều dự kiến có
tác dụng ; Lô thử nghiệm : uống vi tảo) 2 liều 300 mg/kg trọng lượng cơ thể/ngày. Mức liều ở lô thử nghiệm gấp 3 lần mức liều lô thử nghiệm 2 1.
Kết quả thu được ở bảng 3.9 cho ta thấy trước khi thử nghiệm, hoạt độ của AST và ALT của chuột ở các lơ chứng và các lơ thí nghiệm đều khơng có sự khác biệt (p>0,05). Sau 28 ngày cho uống liên tục, ở lơ thử nghiệm hoạt độ của AST và ALT có sự thay đổi 2
không đáng kể so với đối chứng. Sự sai khác này khơng có ý nghĩa thống kê sinh học
(p>0,05). Từ các kết quả trên đã khẳng định, T. pseudonana với các mức liều và thời gian sử dụng trong nghiên cứu không làm thay đổi hoạt độ của AST và ALT trong máu chuột nghiên cứu. Do đó, T. pseudonana khơng gây tổn thương tế bào gan và không làm ảnh hưởng đến chức năng gan chuột trong nghiên cứu.
d. Đánh giá ảnh hưởng lên chức năng thận của chuột khi dùng Thalassiosira pseudonana dài ngày
Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của Thalassiosira pseudonana sử dụng dài ngày lên chức năng của thận thông qua nồng độ ure và creatinin huyết thanh cũng được trình bày ở
trên bảng 3.9.
Kết quả thu được ở bảng 3.9 cho thấy tại các thời điểm trước thí nghiệm và sau 28 ngày, các lô chuột thử nghiệm (1) và (2) và so sánh trong cùng một lô giữa các thời điểm thí nghiệm khác nhau đều có nồng độ ure và creatinintrongmáu chuột thay đổi khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05). Như vậy, T. pseudonana với các mức liều và thời gian sử dụng trong nghiên cứu (28 ngày) cho thấy chúng không ảnh hưởng lên chức năng thận của chuột.
e. Giải phẫu mô bệnh học gan, thận của chuột khi dùng Thalassiosira pseudonana dài ngày
Sau 28 ngày theo dõi, tiến hành giải phẫu chuột cho thấy bằng mắt thường và dưới kính lúp có độ phóng đại 25 lần thấy màu sắc, hình thái của gan, thận ở các lô dùng