2 NH4OH + HSO4 = (NH4)SO4 + HO Chuẩn HSO4dư bằng NaOH:
2.2.2.7 Xác định đường khử (Phương pháp Nelso n Somogy) Dụng cụ
Dụng cụ - ống nghiệm 16 mm x 200 mm - Bi thuỷ tinh - Pipet 1ml, 10ml - Bình định mức 100ml - Máy lắc ống nghiệm
- Máy so màu bước sóng 600nm
Hóa chất
Dung dịch 1.
Na2CO3 : 12,5g
NaHCO3: 10g Na2SO4: 100g
Hòa tan trong 400ml rồi định mức tới 500ml nếu cần.
Dung dịch 2.
CuSO4.5H2O: 30g
Hòa tan trong 200 ml nước đã có 4 giọt H2SO4đặc
Dung dịch 3.
Amonium molybdate : (NH4)6Mo7O4.4H2O
12,5g hòa tan trong 225ml H2O, sau đó thêm 10,5ml H2SO4đặc Sodium arsenate heptahydrate : Na2HAsO4.7H2O
1,5g hòa tan riêng trong 12,5ml H2O, sau đó cho từ từ vào dung dịch Amonium molybdate trên và khuấy liên tục.
Định mức dung dịch thành 250ml và để ở 370C qua đêm.
Dung dịch 4.
Lấy 25ml dung dịch (1) + 1ml dung dịch (2)
Chuẩn bị mẫu
− Dịch đường pha loãng 1000 lần − Bia đã loại CO2, pha loãng 100 lần.
Quy trình
Cho 1ml dung dịch cần phân tích ( đã pha loãng) thêm vào 1ml hóa chất (4). Hỗn hợp đặt trong bình cách thủy được đun sôi trong 20 phút, sau đó được làm lạnh bằng nước trong 5 phút.
Bổ sung thêm 1ml dung dịch (3) vào hỗn hợp, lắc cho tới khi hết CO2. Hỗn hợp để thêm 10 phút trước khi cho thêm 10ml nước cất.
Hỗn hợp phản ứng được đo ở bước sóng 600nm, mẫu trắng làm tương tự thay bằng 1ml nước cất. Tính kết quả dựa vào đường chuẩn.
Dựng đường chuẩn:
Chuẩn bị dung dịch Maltose 8% : dung dịch A Lấy 2ml A định mức thành 1000 bằng nước cất Chuẩn bị 10 ống nghiệm 16 mm x 200 mm
Cho vào ống nghiệm với thể tích tăng dần từ 0,1tới 1 ml Thêm nước cất vào các mẫu cho tới thể tích 1ml
Làm các bước thí nghiệm tương tự như phần trên.
Xây dựng đường chuẩn bằng phương pháp đồ thị
Tính toán kết quả
Đo mật độ quang của dung dịch nghiên cứu, từ đó căn cứ theo đồ thị chuẩn xác định nồng độ chất nghiên cứu.