Phản ứng glucosyl hĩa alphitonin (82) dựa trên nguyên tắc của phản ứng Koenigs-Knorr sử dụng glucopyranosyl halogenua với thử nghiệm ở các điều kiện xúc tác khác nhau như ZnCl2, CdCO3, HgI2 hoặc Ag2CO3 với K2CO3 (Bảng 4.8). Các kết quả phản ứng cho thấy sản phẩm trung gian alphitonin-4-O-β-D-tetraacetyl glucopyranoside (124) thu được khi cĩ mặt hỗn hợp chất xúc tác và chất xúc tiến
K2CO3/Cs2CO3. Sau khi loại bỏ các nhĩm bảo vệ của sản phẩm đã thu được alphitonin-4-O-β-D-glucopyranoside (125) theo sơ đồ Hình 3.8
Hình 3.8. Sơ đồ tổng hợp alphitonin-4-O-β-D-glucopyranoside (125)
Tổng hợp alphitonin-4-O-β-D-tetraacetyl glucopyranoside (124)
Trong một bình kín hai cổ đã được bơm hút chân khơng và nạp đầy khí N2, dung dịch của alphitonin (82, 912 mg; 3 mmol) trong dimethylformamid (15 mL) được làm lạnh xuống nhiệt độ 0°C, các hợp chất 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-D- glucopyranosyl bromide (123, 1,36 g; 3,3 mmol), K2CO3 (912 mg; 6,6 mmol) và Cs2CO3 (1,08 g; 3,3 mmol) được lần lượt cho vào. Hỗn hợp phản ứng được khuấy 130 phút ở 0°C, sau đĩ đưa về nhiệt độ phịng và khuấy thêm 4 h cho phản ứng hết (kiểm tra bằng SKLM). Sau khi phản ứng kết thúc, hỗn hợp phản ứng được trung hịa bằng HCl 0,1N đến pH 6-7 và được chiết với EtOAc (2 × 30 mL). Dịch chiết EtOAc được kết hợp lại và làm khan qua Na2SO4, quay cất chân khơng loại dung mơi. Phần cặn được tinh chế bằng sắc ký cột pha đảo (H2O / MeOH gradient) thu được 741 mg hợp chất 124, hiệu suất 39%.
Alphitonin-4-O-β-D-tetraacetyl glucopyranoside (124):
1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ (ppm) 6,66/6,64 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-2′), 6,57/6,53 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5′), 6,52/6,48 (1H, dd,
1,5 Hz, H-5), 5,96/5,93 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-7), 5,35 (1H, t, J = 9,0 Hz, H-3′′), 5,32/5,22 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-1′′), 5,23 (1H, dd, J = 8,0 , 9,0 Hz, H-2′′), 5,11 (1H, m, H-4′′), 4,33/4,31 (1H, dd, J = 5,0, 12,0 Hz, Hb-6′′), 4,18/4,11 (1H, dd, J = 1,7, 12,0 Hz, Ha-6′′), 4,09/4,02 (1H, m, H-5′′), 3,02 (2H, m, H-10), 2,00 - 2,10 (12H, 4 × OAc). 13C-NMR (125 MHz, CD3OD): δ (ppm) 194,9 (C=O), 174,3 (C-8), 173,5 (C- 6), 172,4, 71,6, 171,4 và 171,3 (4 × OAc), 157,7/157,5 (C-4), 145,6 (C-3′), 145,1 (C-4′), 126,5 (C-1′), 123,1/122,9 (C-6′), 118,8/118,7 (C-2′), 115,9/115,7 (C-5′), 107,4/107,1 (C-2), 103,0/102,9 (C-9), 100,1/99,4 (C-5), 99,8 (C-1′′), 94,6/94,5 (C- 7), 74,1 (C-3′′), 73,2/73,1 (C-5′′), 72,4/72,3 (C-2′′), 69,7/69,6 (C-4′′), 63,0/62,9 (C- 6′′), 42,3/42,2 (C-10), 20,8 , 20,7 , 20,6 và 20,5 (4 × OAc). Tổng hợp alphitonin-4-O-β-D-glucopyranoside (125)
Trong một bình cầu 3 cổ cĩ lắp phễu nhỏ giọt và nhiệt kế được nạp đầy khí N2, hỗn hợp dung dịch của 124 (634 mg; 1 mmol) trong methanol (20 mL) được làm lạnh xuống 0°C, dung dịch của NaOH/MeOH/H2O (176,0 mg, 4,4 mmol)/5 mL/5 mL được nhỏ dần vào. Hỗn hợp phản ứng được khuấy trong 30 phút ở 0°C, sau đĩ được trung hịa với HCl 0,1N đến pH 6-7 rồi được chiết với EtOAc (3 × 30 mL). Dịch chiết EtOAc được kết hợp lại và làm khan qua Na2SO4, quay cất chân khơng loại dung mơi. Phần cặn được tinh chế bằng sắc ký cột pha đảo với hệ dung mơi rửa giải (H2O/MeOH gradient) thu được 210 mg hợp chất 125 ở hiệu suất 45%.
Alphitonin-4-O-β-D-glucopyranoside (125) cĩ số liệu phổ trùng với số liệu phổ của chất TAT6 phân lập từ lá cây chay Bắc Bộ (Bảng 4.1 và Bảng 4.2).
3.1.5. Tổng hợp các dẫn xuất nitrile của auronol maesopsin, alphitonin và maesopsin-4-O-β-D-glucopyranoside
Các dẫn xuất nitrile của auronol maesopsin (98), alphitonin (82) và maesopsin-4-O-β-D-glucopyranoside (116) được tổng hợp theo sơ đồ Hình 3.9 và Hình 3.10.
Hình 3.9. Sơ đồ tổng hợp các dẫn xuất nitrile của chất 82 và 98
Hình 3.10. Tổng hợp dẫn xuất nitrile của chất 116