Phản ứng đồng phân hĩa taxifolin xảy ra theo quy trình được trình bày trong sơ đồ Hình 3.6.
Hình 3.6. Sơ đồ bán tổng hợp alphitonin (82) từ taxifolin (81)
Qui trình chung
Hỗn hợp dung dịch của taxifolin (n mmol), nước DI (VH2O mL) trong một bình kín một cổ được làm lạnh rồi hút chân khơng và nạp khí nitơ vào. Sau đĩ, bình phản ứng được đun trên bếp cách dầu với nhiệt độ trong dầu truyền nhiệt lên đến T°C và thời gian phù hợp t giờ. Sau khi phản ứng kết thúc, hỗn hợp phản ứng được để nguội, lọc loại bỏ kết tủa màu vàng được xác định là quercetin. Dịch nước được chiết bằng ethyl acetate khoảng 5 lần đến hết sản phẩm auronol (kiểm tra bằng SKLM). Dịch chiết được làm khan bằng Na2SO4 , rồi quay cất loại dung mơi. Phần cặn thơ được phân tách trên cột silica gel với hệ dung mơi CH2Cl2/EA (2/1) cho alphitonin với hiệu suất phụ thuộc vào điều kiện phản ứng.
Alphitonin (82):
1H-NMR (500 MHz, Acetone-d6): δ (ppm) 9,65 (1H, brs, OH), 7,70 (1H, br s, OH), 7,66 (1H, br s, OH), 6,72 (1H, d, J = 2,0 Hz, H-2′), 6,61 (1H, d, J = 8,0 Hz, H-5′), 6,54 (1H, d, J = 2,0 , 8,0 Hz, H-6′), 6,43 (1H, br s, OH), 5,86 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-5), 5,82 (1H, d, J = 1,5 Hz, H-7), 3,05 (1H, d, J = 13,5 Hz, Hb-10), 3,02 (1H, d, J = 13,5 Hz, Ha-10). 13C-NMR (125 MHz, Acetone-d6): δ (ppm) 195,4 (C=O), 172,5 (C-8), 169,6 (C-6), 158,8 (C-4), 145,3 (C-3′), 144,7 (C-4′), 126,3 (C-1′), 122,9 (C-6′), 118,5 (C- 2′), 115,5 (C-5′), 107,0 (C-2), 102,7 (C-9), 96,7 (C-5), 91,4 (C-7), 41,8 (C-10).
Nghiên cứu ảnh hưởng của các điều kiện nhiệt độ, dung mơi và thời gian đến phản ứng đồng phân hĩa taxifolin.
Phản ứng được tiến hành theo quy trình chung trong bình kín chịu áp với các điều kiện thay đổi ảnh hưởng đến hiệu suất phản ứng về nhiệt độ (Bảng 4.4), về dung mơi (Bảng 4.5) và về thời gian (Bảng 4.6). Lượng mol của taxifolin trong các phản ứng khảo sát là 1 mmol (0,304 g). Do phản ứng tiến hành trong bình kín nên nhiệt độ phản ứng được khảo sát trên cơ sở tương quan với nhiệt độ dầu dẫn nhiệt.
Nghiên cứu độ ổn định của quy trình
Phản ứng đồng phân hĩa taxifolin được tiến hành theo quy trình trên, sau khi đã xác định được các điều kiện ảnh hưởng với lượng mol tác nhân tăng dần từ 1 mmol đến 15 mmol (Bảng 4.7)