Từ 28 mẫu phân ủ, thức ăn và chất thải chăn nuôi, rác thải, phế phụ phẩm nông nghiệp, bã nấm, chúng tôi đã phân lập đƣợc 17 chủng vi sinh vật có khả năng phân giải xenluloza (xạ khuẩn:11; vi nấm: 2; vi khuẩn: 4), 12 chủng có khả năng phân giải tinh bột (5 chủng xạ khuẩn và 7 chủng vi khuẩn) và 6 chủng vi khuẩn có khả năng phân giải protein. Kết quả đƣợc trình bày tại bảng 3.3.
Bảng 3.3. Số lƣợng chủng vi sinh vật phân lập
Nguồn phân lập VSV phân giải xenluloza VSV phân giải tinh bột VSV phân giải protein Số
mẫu Số chủng phân lập mẫu Số Số chủng phân lập mẫu Số Số chủng phân lập
Phân ủ 3 2 - - -
Chất thải chăn nuôi
8 5 8 4 8 2
Rác thải sinh hoạt 5 3 5 4 5 3
Rơm rạ, bã nấm 9 7 9 2 - - Thức ăn chăn nuôi ủ chua - - 3 2 3 1 Số mẫu 25 25 16 Tổng số chủng phân lập (35) 17 12 6 Số chủng có KT VPG≥ 20 mm 8 5 2
80
Để tuyển chọn chủng giống cho nghiên cứu chế phẩm vi sinh vật xử lý nhanh chất thải chăn nuôi, các chủng đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng dịch thể ở điều kiện thích hợp. Hoạt tính các chủng phân lập đƣợc đánh giá định tính bằng phƣơng pháp khuyếch tán enzym ngoại bào của dịch nuôi cấy trên môi trƣờng thạch đĩa chứa cơ chất. Từ 35 chủng, sơ bộ sàng lọc đƣợc 15 chủng có khả năng sinh trƣởng mạnh, hoạt tính sinh học ổn định, bao gồm: 8 chủng phân giải xenluloza, 5 chủng phân giải tinh bột và 2 chủng phân giải protein; kích thƣớc vòng phân giải đều ≥ 20 mm. Đặc biệt, trong đó có các chủng đa hoạt tính; vừa phân giải xenluloza, vừa phân giải tinh bột hoặc vừa phân giải protein, vừa phân giải tinh bột. Kết quả đánh giá hoạt tính phân giải xenluloza, tinh bột, protein của các chủng vi sinh vật đƣợc trình bày trong bảng 3.4.
Bảng 3.4. Khả năng phân giải chất hữu cơ của các chủng vi sinh vật
Ký hiệu chủng Đƣờng kính vòng phân giải (D-d, mm)
Xenluloza (CMC) Tinh bột tan Protein (cazein)
TB7 28 - - XK47 29 - - XK112 34 20 - PT03 25 - - PT09 23 30 - BN5 22 29 - RT6 24 - - B75 - - 26 B15 - 21 30 B20 26 36 -
Chú thích (-): Không có vòng phân giải hoặc kích thước nhỏ, không rõ.
Trong số 8 chủng vi sinh vật phân giải xenluloza đƣợc tuyển chọn, chủng xạ khuẩn ký hiệu XK112 có khả năng phân giải xenluloza cao nhất (kích thƣớc vòng phân giải đạt 34 mm), đây là chủng ƣa nhiệt, có khả năng sinh trƣởng ở dải nhiệt độ rộng từ 35 đến 600C. Đặc biệt, ngoài khả năng tổng hợp xenlulaza, chủng XK112
81
còn có khả năng tổng hợp amylaza, vì vậy rất thích hợp để đƣa vào chế phẩm vi sinh vật xử lý chất thải chăn nuôi.
Từ 5 chủng vi sinh vật có hoạt tính phân giải tinh bột, lựa chọn đƣợc chủng vi khuẩn B20 có hoạt tính phân giải tinh bột mạnh nhất (kích thƣớc vòng phân giải đạt 34 mm), ngoài ra còn có khả năng tổng hợp xenlulaza nhƣng hoạt tính phân giải xenluloza không cao bằng chủng XK112.
Trong 2 chủng vi sinh vậtcó khả năng phân giải protein, chủng vi khuẩn B15 có hoạt tính phân giải protein mạnh nhất (kích thƣớc vòng phân giải đạt 30 mm) đồng thời cũng có khả năng phân giải tinh bột. Chủng vi khuẩn B15 sinh trƣởng tốt sau 48- 72 giờ nuôi cấy, mật độ tế bào đạt trên 109 CFU/ml.