Nghiên cứu quy trình sản xuất vacxin vô hoạt nhị giá tụ huyết trùng phó thương hàn lợn

luận văn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI ----------      ---------- NGUYỄN PHƯƠNG LAN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH SẢN XUẤT VACXIN VÔ HOẠT NHỊ GIÁ TỤ HUYẾT TRÙNG – PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : THÚ Y Mã số : 60.62.50 Người hướng dẫn khoa học: TS. NGUYỄN BÁ HIÊN HÀ NỘI – 2010 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các kết quả, số liệu nêu trong bản luận văn này là hoàn toàn trung thực và chưa ñược bảo vệ một học vị nào khác. Tôi xin cam ñoan rằng các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Nguyễn Phương Lan Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân tôi còn nhận ñược sự giúp ñỡ tận tình của nhiều cá nhân và tập thể. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo - TS. Nguyễn Bá Hiên- Trưởng bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm - Khoa Thú y Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội, người ñã tận tình giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn này. Tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn tới thầy cô giáo Bộ môn Vi sinh vật- Truyền nhiễm, Khoa Thú y; Viện ðào tạo sau ðại học; Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội; Phân xưởng vacxin Vi trùng, Phòng kiểm nghiệm vacxin Vi trùng, Xí nghiệp thuốc thú y TW; Trạm Thú Y ðan Phượng ( Hà Nội) ñã tạo mọi ñiều kiện thuận lợi giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cúu. Tôi xin cảm ơn tới gia ñình, bạn bè và ñồng nghiệp ñã giúp ñỡ, ñộng viên tôi trong suốt quá trình thực hiện luận văn tốt nghiệp. Hà Nội, ngày 11 tháng 11 năm 2010 Tác giả Nguyễn Phương Lan Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . iii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt v Danh mục các bảng v Danh mục các hình viii 1. MỞ ðẦU i 1.1. ðặt vấn ñề 1 1.2. Mục ñích yêu cầu của ñề tài: 2 1.3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài: 2 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1. Một số hiểu biết cơ bản về vacxin 4 2.2. Bệnh tụ huyết trùng lợn (Pasteurellosis suum) 23 2.3. Bệnh Phó thương hàn lợn ( Paratyphus suum ) 31 3. NỘI DUNG – NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 3.1. ðối tượng nghiên cứu 37 3.2. ðịa ñiểm nghiên cứu 37 3.3. Nội dung nghiên cứu 37 3.4. Nguyên vật liệu, trang thiết bị nghiên cứu 37 3.5. Phương pháp nghiên cứu 41 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 48 4.1. Chế tạo canh trùng tụ huyết trùng lợn 48 4.1.1. Nhân giống sản xuất ( Working seed) 48 4.1.2 Môi trường sản xuất 50 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . iv 4.1.3 Sản xuất 52 4.2. Chế tạo canh trùng phó thương hàn lợn 56 4.2.1. Nhân giống sản xuất 56 4.2.2 Môi trường sản xuất 58 4.2.3 Sản xuất 60 4.3. Phối hợp các thành phần ñể tạo vacxin (Tập trung bán thành phẩm) 65 4.3.1. Chất bổ trợ keo phèn: 65 4.3.2. Chế tạo riêng biệt hai loại vacxin tụ huyết trùng lợn và phó thương hàn lợn (tập trung bán thành phẩm) 66 4.3.3. Chế tạo vacxin nhị giá TP 68 4.4 Kiểm nghiệm vacxin nhị giá TP 70 4.4.1 Kiểm tra vô trùng vacxin 70 4.4.2. Kiểm tra an toàn vacxin 71 4.4.3. Kiểm tra hiệu lực vacxin 73 4.5. So sánh ñánh giá chất lượng của vacxin ñơn giá THT lợn với vacxin nhị giá TP trên thực ñịa 76 5. KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 78 5.1. Kết luận: 78 5.2. ðề nghị: 78 TÀI LIỆU THAM KHẢO 79 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT MLD Minimum Lethal Dose ( liều gây chết tối thiểu) OIE Office International des Epizootie (Tổ chức dịch tễ Thế giới) PTH Phó thương hàn P. multocida Pasteurella multocida S. choleraesuis Salmonella choleraesuis THT Tụ huyết trùng TP Tụ huyết trùng – Phó thương hàn TCN tiêu chuẩn ngành TK thuần khiết VK Vi khuẩn DANH MỤC CÁC BẢNG Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . vi STT Tên bảng Trang 4.1. Kết quả kiểm tra thuần khiết và 50 4.2. Kết quả hóa nghiệm các thành phần môi trường sản xuất của 5 lô canh trùng THT lợn 52 4.3. Kết quả kiểm tra thuần khiết, số lượng vi khuẩn và vô trùng của 5 lô canh trùng THT lợn 55 4.4. Kết quả kiểm tra thuần khiết và số lượng vi khuẩn PTH lợn của 5 lô giống 58 4.5. Kết quả hóa nghiệm các chỉ tiêu của 5 lô môi trường nuôi cấy VK PTH lợn 60 4.6. Kết quả kiểm tra thuần khiết, số lượng vi khuẩn và vô trùng của 5 lô canh trùng PTH lợn 63 4.7. Kết quả kiểm tra an toàn ñộc tố canh trùng PTH lợn ( sau 7 ngày theo dõi ) 64 4.8. Kết quả hóa nghiệm các chỉ tiêu keo phèn 65 4.9. Kết quả pha loãng canh trùng tụ huyết trùng lợn, phó thương hàn lợn và bổ sung chất bổ trợ là keo phèn 67 4.10. Kết quả kiểm tra vô trùng vacxin ñơn giá THT, PTH lợn bán thành phẩm 68 4.11. Kết quả phối hợp hai loại canh trùng tụ huyết trùng, phó thương hàn lợn và bổ sung chất bổ trợ là keo phèn 69 4.12. Kết quả kiểm tra vô trùng với vacxin nhị giá TP 70 4.13. Kết quả kiểm tra an toàn vacxin nhị giá TP trên lợn 71 4.14. Kết quả kiểm tra an toàn vacxin nhị giá TP trên thỏ 72 4.15. Kết quả kiểm tra an toàn vacxin nhị giá TP trên chuột lang 73 4.16. Kết quả kiểm tra hiệu lực vacxin THT và vacxin nhị giá TP lợn ñối với thỏ 74 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . vii 4.17. Kết quả kiểm tra hiệu lực vacxin PTH lợn và vacxin nhị giá TP lợn trên chuột lang 75 4.18. Kết quả kiểm tra an toàn của vacxin THT lợn và nhị giá TP lợn trên thực ñịa 76 4.19. Kết quả ñánh giá hiệu lực của vacxin ñơn giá THT lợn với vacxin nhị giá TP 77 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . viii DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên hình Trang 3.1 Qui trình tóm tắt sản xuất vacxin vô hoạt nhị giá THT – PTH Lợn 43 3.2 Sơ ñồ hệ thống lên men 44 4.1 Mật ñộ VK THT lợn tại các thời ñiểm nuôi cấy 54 4.2 Mật ñộ VK PTH lợn tại các thời ñiểm nuôi cấy 61 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nông nghiệp . 1 1. MỞ ðẦU 1.1. ðặt vấn ñề Theo Cục Chăn nuôi (Bộ Nông nghiệp và phát triển Nông thôn) do nhu cầu thực phẩm phục vụ ñời sống sinh hoạt hàng ngày không ngừng tăng, nên ngành chăn nuôi ñược chính phủ ưu tiên ñầu tư phát triển. Sự ưu tiên này thể hiện trong chiến lược phát triển của ngành từ nay ñến năm 2020 với mục tiêu tăng trưởng 8-10% / năm. Chỉ tiêu phấn ñấu ñến năm 2020: sản lượng thịt xẻ ñạt 5.500 tấn/năm, trong ñó thịt lợn chiếm 63%, thịt gia cầm 32%, thịt bò 4%, thịt khác 1% [1]. Như vậy, ngành chăn nuôi nói chung và ngành chăn nuôi lợn nói riêng ñã và ñang ñược ðảng và Nhà nước quan tâm chỉ ñạo chặt chẽ. Mục tiêu của chính phủ là phát triển chăn nuôi lợn tập trung, hàng hóa, hiệu quả và bền vững, có năng suất chất lượng và sức cạnh tranh cao trên thị trường nhằm ñáp ứng nhu cầu về thực phẩm trong nước và xuất khẩu. Chuyển dịch phương thức chăn nuôi nhỏ tán trong nông hộ sang phương thức tập trung công nghiệp. Tuy nhiên, những năm gần ñây ngành chăn nuôi lợn phát triển thiếu bền vững do dịch bệnh thường xuyên xảy ra. Việc khống chế dịch bệnh gặp nhiều khó khăn do nhận thức của người chăn nuôi chưa cao, có nhiều ñịa phương còn lơ là việc tiêm phòng vacxin cho vật nuôi. Tình hình bùng phát các ổ dịch như: lở mồm long móng, dịch tả, tụ huyết trùng, phó thương hàn lợn . kèm theo là sự phát sinh các dịch bệnh mới như tai xanh là một hồi chuông cảnh báo cho chúng ta về sự bất ổn trong chăn nuôi lợn. Hiện nay, ñể phòng chống bệnh truyền nhiễm xảy ra thì biện pháp tốt nhất, nhanh chóng nhất, ñem lại hiệu quả cao nhất và chi phí thấp nhất là sử dụng vacxin ñể tạo miễn dịch cho vật nuôi, qua ñó các ñộng vật này sẽ có khả năng miễn dịch với mầm bệnh. . là tụ huyết trùng và phó thương hàn lợn, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ñề tài: Nghiên cứu quy trình sản xuất vacxin vô hoạt nhị giá tụ huyết trùng – phó. phó thương hàn lợn . 1.2. Mục ñích yêu cầu của ñề tài : . Xây dựng ñược quy trình sản xuất vacxin vô hoạt nhị giá tụ huyết trùng – phó thương hàn lợn.