Nghiên cứu quy trình sản xuất nấm hoàng chi trên giá thể bã mía kết hợp mùn cưa truyền thống

Vì thế để đáp ứng được nhu cầu thực tế cũng như phát huy hết thế mạnh của nước ta thì vấn đề đặt ra là nghiên cứu để đa dạng hóa nguồn giá thể trồng nấm bằng công nghệ sinh học, tìm ra h

VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG

Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Lớp : 49 CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa : 2007- 2011

Tháng 7 năm 2011

VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG

LỜI CẢM ƠN

Qua chuyến thực tập tuy ngắn ngủi này nhưng phần nào đã giúp tôi có những

trải nghiệm đầu đời vô cùng mới mẻ, tiếp thêm động lực để tôi bước vào đời vững

vàng hơn

Để hoàn thành luận văn này tôi xin chân thành cảm ơn đến cô – Ths Lê Nhã

Uyên đã tận tình giúp đỡ, chỉ bảo và truyền đạt những hiểu biết, kinh nghiệm quý

báu cho tôi ngay từ những ngày đầu khi thực hiện đề tài

Tôi cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến các thầy cô trường Đại Học Nha

Trang Thầy cô đã trang bị cho tôi những kiến thức vô cùng quý báu trong suốt 4

năm học tập tại trường, và lòng biết ơn chân thành đến các thầy cô ở Viện Công

Nghệ Sinh Học & Môi trường đã giúp đỡ và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi thực

hiện tốt đề tài

Tôi xin cảm ơn đến các cô chú, anh chị ở Phòng thí nghiệm Công nghệ sinh

học đã tạo mọi điều kiện tốt nhất cho tôi trong thời gian làm việc tại đây

Lời cuối, một tình cảm thiêng liêng nhất con xin gửi đến ba mẹ, anh chị và

những người bạn thân Mọi người luôn dành cho tôi những tình cảm nồng ấm nhất

XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN ! Nha trang, tháng 6 năm 2011

Sinh viên thực hiện

Nguyễn Thị Hạnh

MỤC LỤC

Trang

MỤC LỤC ii

DANH MỤC CÁC BẢNG iiv

DANH MỤC CÁC HÌNH v

DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ vi

CHƯƠNG 1 : MỞ ĐẦU 1

1.1 Sự cần thiết của đề tài : 1

1.2 Mục đích: 2

1.3 Yêu cầu: 2

1.4 Tình hình nghiên cứu và triển vọng của đề tài: 3

CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 5

2.1 Tổng quan về nấm Hoàng chi: 5

2.1.1: Vị trí phân loại, hình thái của nấm Linh chi: 5

2.1.1.1: Vị trí phân loại: 5

2.1.1.2 : Hình thái cấu tạo Linh chi nói chung: 6

2.1.2: Vị trí phân loại, hình thái, chu trình sống, giá trị dinh dưỡng, giá trị dược liệu, giá trị kinh tế của nấm Hoàng chi: 7

2.2 Tổng quan về nguyên liệu trồng nấm: 17

2.3 Một số bệnh thường gặp ở nấm Hoàng chi : 23

CHƯƠNG 3 : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30

3.1 Địa điểm và thời gian thực hiện đề tài : 30

3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm: 30

3.2.1 Vật liệu và phương pháp : 30

3.2.1.1 Vật liệu nghiên cứu: 30

3.2.1.2 Phương pháp nghiên cứu 31

CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ & THẢO LUẬN 36

4.1 Tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm của 2 loài nấm G.colossum trên môi trường thạch (PGA) 36

4.2 Tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm của nấm Hoàng chi trên môi trường hạt

lúa 39

4.3 Nuôi trồng thử nghiệm: 41

4.3.1 Tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm Hoàng chi trên môi trường giá thể tổng hợp: 41

4.3 Sự tạo quả thể: 46

4.4 So sánh chi phí nuôi trồng trên 2 loại giá thể mùn cưa và bã mía trên một túi nguyên liệu và đề xuất quy trình trồng: 48

CHƯƠNG 5 : KẾT LUẬN & ĐỀ NGHỊ 52

5.1 Kết luận : 52

5.2 Đề nghị: 52

TÀI LIỆU THAM KHẢO 54

PHỤ LỤC 56

DANH MỤC CÁC BẢNG

Trang

Bảng 2.1: Thành phần hoá học của nấm Hoàng Chi 12

Bảng 2.2: Thành phần các chất có hoạt tính ở Hoàng Chi 13

Bảng 2.3: Bảng so sánh giá trị dược liệu theo y học cổ truyền các loại Linh chi khác nhau 15

Bảng 2.4 Thành phần các hợp chất trong bã mía 7 17

Bảng 2.5 : So sánh năng suất các loại nấm trồng trên giá thể mùn cưa và bã mía 19

Bảng 2.6: Vài loài nấm mốc thường gặp trong nuôi trồng nấm 23

Bảng 2.7 Một số biểu hiện bệnh trong trồng nấm và biện pháp khắc phục : 25

Bảng 3.1 Thành phần của môi trường PGA cải tiến 32

Bảng 3.2: Thành phần môi trường cơ chất hỗn hợp 34

Bảng 4.1 Tốc độ sinh trưởng hệ sợi nấm Hoàng chi (G.colossum (Fr.) trên môi trường thạch PGA 36

Bảng 4.2 Tốc độ sinh trưởng hệ sợi (mm) của 2 loài nấm Hoàng chi Ganoderma colossum (Fr.) trên môi trường hạt lúa 40

Bảng 4.3 Tốc độ tăng trưởng hệ sợi (cm) của nấm Hoàng chi trên môi trường giá thể tổng hợp: 42

Bảng 4.4 So sánh chi phí nuôi trồng trên 2 loại giá thể mùn cưa và bã mía trên một túi nguyên liệu 1,2 kg: 48

DANH MỤC CÁC HÌNH

Trang

Hình 2.1 : Một số loại nấm Linh chi 6

Hình 2.2 Hình thái của Hoàng Chi 8

Hình 2.3 Chu trình sống của nấm Hoàng chi 10

Hình 2.4: Qúa trình hình thành bào tử đảm 10

Hình 2.5 : Đống ủ bã mía 18

Hình 2.6 : Mùn cưa 21

Hình 2.7: phân DAP 22

Hình 2.8: Cám gạo 22

Hình 2.9 Một số bệnh do mốc gây ra cho nấm 24

Hình 3.1 : Mẫu giống nấm 30

Hình 3.2 Cách phân lập mẫu nấm 32

Hình 3.3: Cách cấy chuyền qua môi trường hạt 33

Hình 4.1: Tốc độ lan tơ của nấm Hoàng chi trên môi trường thạch PGA 39

Hình 4.2: Tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm của nấm Hoàng chi trên môi trường hạt lúa 41

Hình 4.3: Tốc độ lan tơ của nấm Hoàng chi trong môi trường giá thể tổng hợp 45

Hình 4.4: Quả thể nấm Hoàng chi sau 64 ngày kết nụ 47

DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ

Trang Biểu đồ 4.1 Tốc độ lan tơ của nấm Hoàng chi trên môi trường thạch PGA

(mm/ngày) 37

Biểu đồ 4.2 Tốc độ lan tơ của nấm Ganoderma colossum (Fr.) trên môi

trường hạt lúa (mm/ngày): 40

Biểu đồ 4.3: Tốc độ lan tơ của nấm Hoàng chi trên môi trường giá thể tổng

hợp 42

CHƯƠNG 1 : MỞ ĐẦU 1.1 Sự cần thiết của đề tài :

Những năm gần đây, trồng nấm đang trở thành một nghề mang lại hiệu quả

kinh tế cao Đây là nghề cần ít vốn đầu tư, kỹ thuật đơn giản và tất cả mọi người từ

thành phố đến nông thôn, đồng bằng đến miền núi đều có thể làm được Nấm Linh

Chi hiện đang được trồng ở nhiều nơi và được chế biến thành các dược liệu sử dụng

trong đời sống hàng ngày Nghề làm nấm Linh Chi này đã mang lại thu nhập cao

cho hàng chục ngàn nông dân

Cách đây hàng ngàn năm, nấm Linh chi đã được dùng để làm thuốc Các sách

dược thảo của nhiều triều đại ở Trung Quốc đều ghi nhận Linh chi được sử dụng

làm thuốc từ lâu đời Sách “Thần nông bản thảo” có ghi: Linh chi là thuốc kết tinh

được cái quý của mây mưa trên núi cao, kết tinh của ngũ hành trong ngày đêm mà

khoe năm sắc nên có thể giữ sức khoẻ cho các bậc đế vương” Đến đời Minh (năm

1590) trong sách “Bản thảo cương mục”, tác giả Lý Thời Trần đã mô tả 6 loại Linh

chi và khái quát tác dụng trị liệu của Linh chi : Linh chi đều có tính bình, không

độc, có tác dụng làm tăng trí nhớ, dưỡng tim, bổ gan khí, an thần, chữa trị tức ngực

Với hệ hô hấp có tác dụng ích phổi, thông mũi, chữa ho nghịch hơi, an thần, ích tỳ

khí Nấm Linh chi còn có các tác dụng chữa trị chứng bí tiểu, bổ thận khí, chữa trị

đau nhức khớp xương, gân cốt Tuy nhiên trong xu hướng hiện nay, thị trường nấm

Linh chi không chỉ đòi hỏi về số lượng, chất lượng mà còn yêu cầu đa dạng về

chủng loại nấm cũng như đa dạng về nguồn giá thể trồng nấm Trong khi những phụ

phế phẩm nông nghiệp của nước ta khá đa dạng và phong phú Hiện nay, trên địa

bàn tỉnh Khánh Hòa việc sử dụng mía vào các mục đích như làm nước giải khát hay

cung cấp cho nhà máy đường đang phát triển mạnh mẽ, tuy nhiên vấn đề giải quyết

ô nhiễm do phế thải gây ra chưa được triệt để, điển hình như nhà máy đường Cam

Ranh gây ô nhiêm nghiêm trọng khu vực dân cư xung quanh với mùi hôi thối bốc

lên từ nhà máy, ảnh hưởng tới sức khỏe cũng như sinh hoạt của người dân

Vì thế để đáp ứng được nhu cầu thực tế cũng như phát huy hết thế mạnh của

nước ta thì vấn đề đặt ra là nghiên cứu để đa dạng hóa nguồn giá thể trồng nấm

bằng công nghệ sinh học, tìm ra hướng đi tốt nhất trong nghành trồng nấm, đủ sức

cạnh tranh với các quốc gia khác, đồng thời giải quyết được vấn đề ô nhiễm do phụ

phế phẩm công, nông nghiệp gây ra

1.2 Mục đích:

Hiện nay nghề trồng nấm là nghề mang lại hiệu quả kinh tế cao, trong đó Linh

chi là loại nấm được trồng khá phổ biến, chỉ cần với diện tích nhỏ vẫn có thể cho

năng suất cao, đầu tư thấp, vòng quay nhanh, đặc biệt là Hoàng chi do màu sắc đẹp,

tai nấm dày, cuống nấm ngắn hơn so với các loại Linh chi khác, và nhiệt độ phát

triển phù hợp với khí hậu tại tỉnh Khánh Hòa, và giá trị kinh tế không thua kém các

loại nấm Linh chi khác nhưng việc nuôi trồng vẫn chủ yếu làm trên nguồn giá thể

truyền thống là mùn cưa, chưa đa dạng hóa nguồn nguyên liệu, đồng thời phụ phế

phẩm nông nghiệp và công nghiệp chế biến ở nước ta khá dồi dào và thường chưa

được sử dụng triệt để, đúng mục đích và hậu quả là gây ô nhiễm môi trường xung

quanh.Vì những lý do nêu trên, nên tôi đã thực hiên đề tài ‘‘ Nghiên cứu quy trình

sản xuất nấm Hoàng chi trên giá thể bã mía kết hợp mùn cưa truyền thống’’

Nhằm tận dụng được nguồn nguyên liệu phế phẩm từ nghành công nghiệp mía

đường kết hợp với giá thể truyền thống là mùn cưa để trồng nấm Hoàng chi Nhằm

nâng cao sản lượng nấm Hoàng chi, giảm chi phí sản xuất, đồng thời tận dụng

nguồn nguyên liệu phế phẩm trong nghành công nghiệp mía đường Bã mía là

nguồn nguyên liệu cho không và thường gây ô nhiễm môi trường

1.3 Yêu cầu:

Hiểu rõ quy trình trồng nấm Hoàng chi (Ganoderma colossum) trên các môi

trường khác nhau, đồng thời so sánh mẫu tai nấm hình thành trên giá thể bã mía với

mẫu đối chứng và so sánh chi phí sản xuất của việc trồng hoàn toàn theo phương

pháp truyền thống (trên mùn cưa) với giá thể mới để đưa ra quy trình trồng phù hợp

nhất, tiết kiệm chi phí nhất

1.4 Tình hình nghiên cứu và triển vọng của đề tài:

Theo các tài liệu cổ thì từ các thời đại đồ đá cũ (5000 – 4000 năm trước Công

nguyên) những cư dân nguyên thủy Trung Quốc đã biết hái lượm và sử dụng nhiều

loại nấm ăn trong tự nhiên Năm 400 trước Công nguyên ở nước này đã có những

miêu tả khoa học về sinh lý, sinh thái của không ít các loại nấm ăn Năm 200 trước

Công nguyên, trong sách ‘‘Thần nông bản thảo binh’’ đã miêu tả tỉ mỉ về hình thái ,

tính năng, công dụng của các loại nấm dùng làm thuốc chữa bệnh hoặc để bồi bổ

sức khỏe như : Thanh chi, Xích chi, Hoàng chi, Bạch chi, Hắc chi, Tử chi, Phục

linh, Tàm nhĩ, Ngũ mộc nhĩ, Sanh khuẩn, Năm 200- 300 sau Công nguyên trong

sách ‘‘Thập Châu kí’’ có phần ghi chép các phương pháp nuôi trồng nấm Linh chi

(về sau xác định là loài Ganoderma lucidum) Hiện nay, nghề trồng nấm cũng phát

triển khá lâu trên thế giới, đặc biệt là Trung Quốc, Hàn Quốc, Nhật Bản, nhưng tại

Việt Nam thì nghề này mới phát triển hơn chục năm trở lại đây Trước đây việc

trồng nấm Linh chi thường được người dân sử dụng mùn cưa làm nguồn giá thể

chính, nhưng vì nguồn nguyên liệu này không phải là vô tận và đặc điểm nước ta là

nguồn phế phẩm nông nghiệp khá dồi dào nên việc tận dụng nguồn nguyên liệu phế

phẩm này cho các nghành công nghiệp chế biến khác nói chung và nghề trồng nấm

nói riêng đang được đầu tư nghiên cứu Trong đó các nguồn nguyên liệu như : trấu,

bông phế thải, rơm rạ, luôn được nhắc tới Tuy nhiên, bã mía là nguồn nguyên

liệu ít được nhiều người để ý Gần đây, các nhà khoa học trẻ thuộc Trung tâm Công

nghệ Sinh học thực vật (Viện Di truyền nông nghiệp Việt Nam) vừa nghiên cứu

thành công trồng nấm Linh chi trên bã mía, so với Linh chi trồng trên mùn cưa (loại

nguyên liệu phổ biến nhất hiện nay), thời gian trồng trên bã mía không kéo dài hơn

nhưng lại cho sinh khối cá thể và năng suất cao hơn Cách thức, điều kiện chăm sóc

nấm trên mùn cưa và bã mía là như nhau Một tấn bã mía khô thu được 35-40kg

nấm Linh chi khô, tương đương khoảng 4,5-5 triệu đồng Sau khi trồng thành công,

nấm Linh chi trồng trên bã mía qua phân tích tại phòng thí nghiệm Sinh - Hóa -

Protein (Viện Khoa học và công nghệ Việt Nam), kết quả cho thấy: Tính chất hóa -

sinh của nấm trồng trên mùn cưa và bã mía là tương đương nhau Chúng đều có đủ

thành phần của 17 axít amin quan trọng, không thay thế trong cơ thể con người

Phần lớn các mẫu axít amin trong mẫu Linh chi trồng trên bã mía có hàm lượng cao

hơn mẫu Linh chi trồng trên mùn cưa, chỉ có hàm lượng xenlulô là thấp hơn chút ít

Thành phẩm Linh chi trồng trên bã mía hoàn toàn đạt các tiêu chuẩn để tiêu thụ trên

thị trường

Nghiên cứu này đã mở ra một triển vọng mới cho những người nông dân

nhưng chi phí cho một hợp đồng chuyển giao công nghệ này có giá 50 triệu đồng

Đây là vấn đề nan giải cho người dân, vì vậy việc nghiên cứu quy trình sản xuất

trồng nấm Linh chi (cụ thể là Hoàng chi) trên giá thể bã mía kết hợp mùn cưa nhằm

giảm tối thiểu chi phí, hạn chế ô nhiễm môi trường do các phụ phế phẩm nông

nghiệp cũng như tạo ra hiệu quả kinh tế cao là triển vọng mà đề tài mang lại

CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan về nấm Hoàng chi:

2.1.1: Vị trí phân loại, hình thái của nấm Linh chi:

2.1.1.1: Vị trí phân loại:

Linh Chi thuộc nhóm nấm lớn và rất đa dạng về chủng loại Từ khi xác lập

thành một chi riêng, là Ganoderma Karst (1881), đến nay tính ra có hơn 200 loài

được ghi nhận, riêng Ganoderma lucidum đã có 45 thứ

Ngoài việc phân loại theo hình thái giải phẩu, còn có thể sắp xếp nấm Linh Chi

dựa theo các đặc điểm sau:

 Đặc điểm phát triển của quả thể:

b Nhóm lưu niên: một tai nấm phát triển trong nhiều năm

c Nhóm hằng niên; tai nấm phát triển từ 1-6 tháng

g Nhóm nhiệt độ thấp: tai nấm mọc ở nhiệt độ 20- 23°C

h Nhóm nhiệt độ trung bình: tai nấm mọc ở 24-26°C

i Nhóm nhiệt độ cao: tai nấm mọc ở 27- 30°C

d Hình dạng nấm Linh chi : Dựa vào hình dạng, màu sắc nấm Linh chi mà

người ta phân nấm Linh chi thành nhiều loại khác nhau như : Hắc chi, Hoàng chi,

Bạch chi, Hồng chi Mỗi loại Linh chi này khác nhau về màu sắc tai nấm và một

số tác dụng dược liệu sẽ được nói rõ ở phần sau

Vì vậy cho thấy, Linh Chi không những đa dạng về chủng loại, mà còn đa

dạng về cả sinh thái Đây là loại nấm mang tính toàn cầu (Patouillard, 1928;

Moreau, 1953)

2.1.1.2 : Hình thái cấu tạo Linh chi nói chung:

Nấm Linh Chi có chung một đặc điểm là tai nấm hoá gỗ; mũ xoè tròn, bầu dục

hoặc hình thận; có cuống ngắn hoặc dài hay không cuống Mặt trên mũ có vân đồng

tâm và được phủ bởi lớp sắc tố bóng láng như verni Mặt dưới phẳng, màu trắng

hoặc vàng; có nhiều lỗ li ti, là nơi hình thành và phóng thích bào tử nấm Bào tử

nấm dạng trứng cụt với hai lớp vỏ, giữa hai lớp vỏ có nhiều gai nhọn nối từ trong ra

ngoài Dưới đây là hình ảnh một số loại Linh chi:

c Nấm Hắc chi

Hình 2.1 : Một số loại nấm Linh chi

(nguồn http://vi.wikipedia.org/wiki/N%E1%BA%A5m_linh_chi)

2.1.2: Vị trí phân loại, hình thái, chu trình sống, giá trị dinh dưỡng, giá trị

dược liệu, giá trị kinh tế của nấm Hoàng chi:

a Vị trí phân loại:

Tên gọi: Nấm Hoàng chi hay kim chi, thuộc họ Linh chi ( Ganoderma lucidum)

Tên khoa học: Ganoderma colossum 1 (G Colossum)

Nấm Hoàng Chi (quả thể) cũng giống các loại Linh chi khác cây nấm gồm 2

phần cuống nấm và mũ nấm (phần phiến đối điện với mũ nấm)

Cuống nấm dài hoặc ngắn, đính bên có hình trụ đường kính 0,5-3cm

Cuống nấm ít phân nhánh, đôi khi có uốn khúc cong queo Lớp vỏ cuống màu

đỏ, nâu đỏ, nâu đen, bóng, không có lông, phủ suốt lên mặt tán nấm

Tai nấm hoá gỗ, hình quạt hoặc thận

Đặc điểm khác biệt là Hoàng chi có mặt trên mũ có vân đồng, tâm và bóng láng,

màu vàng cam cho đến đỏ vàng 2

Mặt dưới phẳng, có nhiều lổ nhỏ li ti, là cơ quan sinh bào tử Cuống nấm đặc và

cứng, sậm màu và bóng láng

Hình 2.2 Hình thái của Hoàng Chi ( nguồn Lê Duy Thắng)

c Chu trình sống:

Chu trình sống của nấm Hoàng chi cũng như các loài nấm đảm khác, ‘‘bắt

đầu từ đảm bào tử hữu tính, nảy mầm cho hệ sợi tơ dinh dưỡng (sơ và thứ cấp)

“Kết thúc” bằng việc hình thành cơ quan sinh sản là tai nấm Tai nấm sinh ra các

đảm bào tử và chu trình lại tiếp tục’’ 3

Bào tử đảm gặp điều kiện thuận lợi sẽ nảy mầm, hình thành sợi sơ cấp với các

tế bào đơn nhân, đơn bội (n) Sợi sơ cấp tồn tại ngắn trong chu trình sống Sau đó

chúng mau chóng tiếp xúc với sợi khác tính, giao phối sinh chất, song hạch hóa để

tạo ra sợi song nhân đơn bội (n + n) – sợi thứ cấp

Sợi thứ cấp phát triển rất mạnh và tồn tại lâu dài trong chu trình sống Ở phần

lớn các loài, tế bào đỉnh sẽ hình thành tế bào mấu nhỏ – thường gọi là khóa hay cầu

nối giữa 2 nhân khác tính Sau đó các nhân khác tính này đều phân chia nguyên

nhiễm 1 lần để tạo thành 4 nhân con, 2 nhân khác tính trong 4 nhân con ở lại đỉnh

sợi, 1 trong 4 nhân đi vào mấu, 1 trong 4 nhân còn lại đi xuống gốc tế bào, song song

với quá trình nó hình thành nên 2 vách ngăn để tạo thành 3 tế bào: tế bào đỉnh với 2

nhân đơn bội khác tính, tế bào mấu và tế bào gốc hòa tan màng với nhau, để tạo

thành 1 tế bào song nhân đơn bội, dấu tích tế bào mấu để lại gọi là khóa

Tế bào đỉnh với 2 nhân đơn bội trở thành tế bào mẹ của đảm khi 2 nhân đơn

bội, khác tính kết hợp với nhau để tạo thành 1 nhân lưỡng bội Nhân lưỡng bội tồn

tại trong thời gian rất ngắn, sau đó chúng phân chia liên tục 2 lần, lần đầu giảm

nhiễm, để tạo thành 4 nhân đơn bội – song song với quá trình này là tế bào đỉnh lớn

lên và được gọi là tế bào tiền đảm Sau đó tế bào tiền đảm hình thành 4 mấu lồi ở

đỉnh, mỗi nhân con cùng với một ít nguyên sinh chất của tế bào đỉnh chuyển vận vào

trong mấu lồi và cuối cùng tạo thành bào từ đảm Các bào tử đảm được hình thành

bên ngoài đảm, nên khi chín mùi sinh lý được phát tán một cách chủ động vào môi

trường

Các đảm có thể được sắp xếp thành dạng bờ dậu trên mặt giá thể (trường hợp

các nấm đảm không hình thành thể sinh sản trong chu trình sống) hoặc tập trung

thành lớp sinh sản trong thể sinh sản – quả thể (Hình 2.3).

Hình 2.3 Chu trình sống của nấm Hoàng chi

(nguồn Nguyễn Lân Dũng)

1 Sợi cấp một (n); 2 Sợi cấp hai (n+n); 3 Thể quả; 4 Phiến với các đảm;

5 Quá trình hình thành đảm; 6 Kết hợp nhân; 7 Đảm; 8 Hợp tử; 9 Giảm

phân, 10 Sự hình thành bào tử đảm; 11 Bào tử đảm;

Hình 2.4: Qúa trình hình thành bào tử đảm ( nguồn Nguyễn Lân Dũng)

d Nhu cầu dinh dưỡng của nấm Hoàng Chi:

Nấm sử dụng nitơ để cấu tạo nên màng sợi nấm dưới dạng các hợp chất kitin

Ngoài ra, nitơ còn tham gia vào thành phần cấu trúc của tế bào, cơ thể dưới dạng

protein, coenzyme…4 Do đó, nguồn nitơ còn phụ thuộc vào nguồn hydrate carbon

và các yếu tố trong quá trình nuôi cấy

Khi nấm đến tuổi trưởng thành thì phát tán bào tử từ phiến có màu nâu sẫm

*Nhiệt độ thích hợp: Hoàng chi có biên độ dao động nhiệt độ khá rộng

- Giai đoạn nuôi sợi: 20o

* Độ thông thoáng: Trong suốt quá trình nuôi sợi và phát triển quả thể, nấm Hoàng

Chi đều cần có độ thông thoáng tốt

* Ánh sáng:

- Giai đoạn nuôi sợi: không cần ánh sáng

- Giai đoạn phát triển quả thể: cần ánh sáng tán xạ (ánh sáng đọc được)

Cường độ ánh sáng cân đối từ mọi phía

- Ánh sáng thích hợp từ 600- 1200 lux

* Độ pH: Hoàng Chi thích nghi trong môi trường trung tính đến axit yếu (pH 5,5-7)

* Dinh dưỡng: Sử dụng trực tiếp nguồn xenlulôza

e Giá trị dinh dưỡng, giá trị dược liệu:

Về giá trị dinh dưỡng và giá trị dược liệu của nấm Hoàng chi, theo tài liệu

Trung quốc và kết quả phân tích thành phần hóa học nấm Hoàng chi của phân viện

Dược liệu thành phố Hồ Chí Minh và Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh được

thể hiện cụ thể ở Bảng 2.1 dưới đây:

Bảng 2.1: Thành phần hoá học của nấm Hoàng Chi (T.Quốc và V.Nam)

Chú thích: (*) Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh

(**) Phân viện Dược liệu thành phố Hồ Chí Minh

Những nghiên cứu phân tích kết hợp với lâm sàng ghi nhận ở Bảng 2.2:

Bảng 2.2: Thành phần các chất có hoạt tính ở Hoàng Chi

Steroid

Ganodosteron Lanosporeric acid A Lonosterol

Ganodermadiol Ganosporelacton A, B Lucidon A

Lucidol

Ưc chế sinh tổng hợp Cholesterol

Ưc chế giải phóng Histamin*

Hạ huyết áp, ức chế ACE**

Chống khối u Bảo vệ gan

cơ, giãm đau

miễn dịch

(*) Histamin (từ acid amin histidin mất nhóm -COOH) có tác động làm dãn và tăng

tính thấm của mao mạch, tăng nhịp tim và tăng co bóp cơ tim, co thắt cơ trơn và gây

ngộp thở ( ở người hen suyển), kích thích thần kinh, gây đau ngứa, gây dãn mạch,

nhức đầu, ức chế hiện tượng thực bào của bạch cầu trung tính, ức chế tạo kháng thể

của bạch cầu lymphocyte B và lymphokine của tế bào T (**) ACE (Angiotension

Converting Enzym): sự ức chế enzym này liên quan đến tác dụng hạ huyết áp

Trong đó, hai nhóm được quan tâm nhiều nhất là polysaccharid và triterpenoid

Polysaccharid gồm 2 loại chính:

GL-A: Gal: Glu: Rham: Xyl (3,2: 2,7: 1,8; 1,0) M= 23.000 Da

GL-B: Glu: Rham: Xyl (6,8: 2,0: 1,0) M= 25.000 Da

GL-A có thành phần chính là Gal, nên gọi là Galactan, còn GL-B có thành phần

chính là Glu, nên gọi là Glucan

b (1-3) -D-glucan, khi phức hợp với một protein, có tác dụng chống ung thư rõ

rệt ( theo Kishida và cộng sự., 1988)

Polysaccharid có nguồn gốc từ Hoàng Chi dùng điều trị ung thư đã được công

nhận sáng chế (patent) ở Nhật Năm 1976, Công ty Kureha sản xuất chế phẩm trích

từ Hoàng Chi có tác dụng kháng carcinogen Năm 1982, Công ty Teikoko sản xuất

sản phẩm từ Hoàng Chi có gốc glucoprotein làm chất ức chế neoplasm Trong

Hoàng Chi chất mucopolysaccharid dùng chống ung thư, đặc biệt là acid ganoderic

có tác dụng chống dị ứng, ức chế sự giải phóng histamin, tăng cường sử dụng oxy

và cải thiện chức năng gan.5 Hiện nay, đã tìm thấy trên 80 dẫn xuất từ acid

ganoderic Trong đó ganodosteron được xem là chất kích thích hoạt động của gan

và bảo vệ gan

Theo B K Kim, H W Kim & E C Choi (1994), thì dịch chiết nước và

methanol của quả thể Hoàng Chi ức chế sự nhân lên của virus Hiệu quả cũng nhận

thấy trên tế bào lympho T của người nhiễm HIV-1 Phân đoạn hổn hợp methanol

(A) kháng virus rất mạnh Các phân đoạn khác, như hexan (B), etyl acetat (C), trung

tính (E), kiềm (G) đều có tác dụng kháng virus tốt

Phân tích thành phần nguyên tố của nấm Hoàng Chi, còn phát hiện thấy có rất

nhiều nguyên tố (khoảng 40), trong đó phải kể đến germanium Germanium có liên

quan chặt chẻ với hiệu quả lưu thông khí huyết, tăng cường chuyển vận oxy vào

mô

Bảng 2.3: Bảng so sánh giá trị dược liệu theo y học cổ truyền các loại Linh chi

khác nhau :( theo tác giá Lý Thời Trần)

Thanh chi hay

Vị chua, tính bình, không độc; chủ trị sáng mắt, bổ gan khí, an thần, tăng trí nhớ

Hồng chi, Xích

Vị đắng, tính bình, không độc; tăng trí nhớ, dưỡng tim, bổ trung, chữa trị tức ngực

Hoàng chi hay

Vị ngọt, tính bình, không độc; an thần, ích tì khí

Theo Y học cổ truyền, thì Hoàng Chi có những công dụng:

- Kiện não (làm cho bộ óc tráng kiện)

- Bảo can (bảo vệ gan)

- Cường tâm (tăng sức cho tim)

- Kiện vị (củng cố dạ dày, hệ tiêu hoá)

- Cường phế (thêm sức cho phổi)

- Giải độc (giải toả trạng thái nhiễm độc)

- Giải cảm (giải toả trạng thái dị cảm)

- Trường sinh (sống lâu, tăng tuổi thọ)

Trong khoảng hai chục năm trở lại đây, nhiều khảo cứu trên thế giới tập trung

phân tích và tìm hiểu các thành phần hoá học có hoạt tính trong nấm Hoàng Chi

f Giá trị kinh tế:

Nấm Hoàng chi là một trong những loại nấm dược liệu mang lại hiệu quả kinh

tế cao cho người nông dân Mỗi năm việc nuôi trồng các loại nấm Linh chi nói

chung đã mang lại việc làm cho hơn 2000 lao động nhàn rỗi và hàng trăm triệu

đồng cho người nông dân Việc nuôi trồng, chế biến nấm Linh chi tạo thành dược

liệu đã thành nghề làm giàu nhanh chóng hiện nay Việc nuôi trồng nấm Linh Chi

được ghi nhận từ 1621 (theo Wang X.J.), nhưng để nuôi trồng công nghiệp phải hơn

300 năm sau (1936), với thành công của Giáo sư Dật Kiến Vũ Hưng (Nhật) Năm

1971, Naoi Y nuôi trồng tạo được quả thể trên nguyên liệu là mạt cưa Nếu tính từ

năm 1979, sản lượng nấm khô ở Nhật đạt 5 tấn/ năm, thì đến năm 1995, sản lượng

lên gần 200 tấn/ năm

Như vậy, trong vòng 16 năm, sản lượng nấm Linh Chi của Nhật đã tăng gấp

40 lần Nếu chỉ tính riêng thành phố Hồ Chí Minh, hiện nay tổng sản lượng nấm

Linh Chi nói chung và Hoàng chi nói riêng nuôi trồng cho từ 20-25 tấn khô/ năm

2.2 Tổng quan về nguyên liệu trồng nấm:

a Quy trình dự kiến trồng nấm Hoàng chi trên bã mía và mùn cưa:

b Bã mía: Thành phần của bã mía chiếm 25 – 30% so với khối lượng ép, trong

đó, thành phần các hợp chất trong bã mía thể hiện ở Bảng 2.4

Túi phôi

Quả thể

Phơi khô Làm ẩm với nước vôi 2%

Ủ đống 4-5 ngày,

có thể bổ sung thêm phân DAP

Khử trùng Cấy giống Nuôi ủ 20-25 ngày

Mở cổ nút, tưới đón quả

4 Hàm lượng chất béo 3,4

Lâu nay các nhà máy đường thường đem đốt một phần bã mía sau khi sản xuất

đường để cung cấp điện cho nhà máy, hoặc kết hợp với các phụ gia khác để sản

xuất ván sàn ép, nhưng chủ yếu lượng lớn bã mía được đổt đi và gây ô nhiễm môi

trường, chúng khó phân hủy, nhiều loại nấm mốc ăn đường gây chua, thối, có

những bãi chôn sau 3 năm đào lên bã mía vẫn không phân hủy

Hình 2.5 : Đống ủ bã mía

Trong bã mía có chứa một lượng xenlulo, hemixenlulo rất cao, ngoài ra hàm

lượng đường cung cấp nguồn cacbon cần thiết cho sự phát triển của hệ sợi nấm và

có thể nuôi được các loại nấm rơm, nấm sò, mộc nhĩ, nấm mỡ, nấm hương và nấm

linh chi Nếu tận dụng nguồn bã mía hiện nay cho việc nuôi nấm, mỗi năm có thể

thu về 250 triệu USD Thế nhưng, 2,5 triệu tấn bã mía/năm tập trung ở khoảng 40

nhà máy mía đường lớn trong cả nước, như nhà máy đường Cam Ranh lại chưa

được tận dụng đúng mức

7/

Http://vi.wikipedia.org/wiki/M%C3%ADa

Về chất lượng nấm Hoàng chi trồng trên bã mía, nấm Hoàng chi trồng trên bã

mía có một số hoạt chất nhóm polysarcarit và một số axit amin không thay thế với

hàm lượng cao hơn trong nấm Hoàng chi trồng trên mùn cưa Những hoạt chất này

có tác dụng tăng sức đề kháng của cơ thể, điều chỉnh hàm lượng cholesterol trong

máu …

Bã mía sau khi trồng và thu hoạch nấm trở thành nguồn phân bón hữu cơ có

chất lượng thay thế phân hóa học để cải tạo đất trồng mía Qua quá trình nuôi cấy,

tơ nấm sẽ phân hủy bã mía thành các phân vi sinh nhờ enzyme Các chất dinh

dưỡng nấm tiết ra sẽ góp phần phục hồi độ màu của đất, phục vụ ngành sản xuất

đường sạch

Căn cứ vào kết quả thí nghiệm và các số liệu thống kê, các nhà khoa học thuộc

Trung tâm Công nghệ sinh học thực vật (Viện Di truyền Nông nghiệp) đã đi tới

nhận xét : ‘‘nuôi nấm trên bã mía cũng đưa lại năng suất tương đương với rơm rạ,

mùn cưa Thậm chí, ở nấm sò và mộc nhĩ, phương pháp này còn đem lại năng suất

cao hơn’’ 8

Sau đây là vài số liệu so sánh cụ thể:

Bảng 2.5 : So sánh năng suất các loại nấm trồng trên giá thể mùn cưa và bã

mía (nguồn : theo bản tin Khoa Học Công Nghệ thành phố Hồ Chí Minh )

Năng suất(%) Loại nấm

Trồng trên mùn cưa Trồng trên bã mía

Nấm sò (bào ngư) 78,12 80

So sánh chi phí nuôi trồng Hoàng chi trên bã mía vói mùn cưa truyền thống :

Nếu sử dụng hết lượng bã mía vào sản xuất nấm các loại, sẽ tạo việc làm cho

khoảng 300.000-500.000 người, tạo lượng sản phẩm có giá trị khoảng 250 triệu

USD/năm Ngoài ra, việc nuôi nấm sẽ làm cho môi trường trong sạch do giải quyết

được lượng rác thải do bã mía gây ra

c Mùn cưa :

Mùn cưa là sản phẩm phế liệu của nghành công nghiêp chế biến gỗ, hàm lượng

xenlulo cao (70 %) ngoài ra còn co hemixellulo, và những hợp chất khác cần thiết

cho nấm phát triển, là nguồn cơ chất truyền thống trong trồng nấm

Hình 2.6 : Mùn cưa

8

Http://agriviet.com/nd/142-trong-nam-linh-chi-tren-ba-mia/

d Các chất bổ sung như: vôi, phân, cám gạo

- Vôi : có tác dụng khử trùng , điều chỉnh PH, độ ẩm cho cơ chất

- Phân DAP : là một loại phân tổng hợp trong đó hàm lượng Nitrogen (N) 18% và

P2O5 chiếm 46% có tác dụng cung cấp đạm lân cho sự phát triển tơ nấm

Hình 2.7: phân DAP

- Cám gạo thì bổ sung thêm một số vitamin ( B1, B1, B6, PP và axít folic ) cho sự

phát triển của nấm

Hình 2.8: Cám gạo

2.3 Một số bệnh thường gặp ở nấm Hoàng chi : (theo Lê Duy Thắng, Đại Học

Khoa Học Tự Nhiên thành phố Hồ Chí Minh)

Cơ chất dùng nuôi cấy hoặc trồng nấm rất giàu dinh dưỡng nên có thể là thức ăn

cho nhiều loại vi sinh vật khác nhau Dưới đây là vài loại nấm mốc thường gặp :

Bảng 2.6: Vài loài nấm mốc thường gặp trong nuôi trồng nấm

STT Tên nấm mốc Đặc điểm biểu hiện Hậu quả trên nấm

Tai nấm bệnh không

bị biến dạng nhung nơi vết bênh chuyển sang đen, chất lượng giảm

số ký sinh nấm lớn

Tai nấm, đặc biệt là phiến, bị mềm nhũn, đôi khi trở nên cứng

Thịt nấm chuyển sang nâu

cả túi nhựa) hoại sinh

ức chế sự tăng trưởng của tơ nấm, làm tơ không mọc được nguyên liệu phủ trắng sau chuyển sang vàng và cam

(Bệnh mốc xanh)

Tơ mảnh, mọc sát cơ chất và co cụm lại vết bệnh lúc đầu có màu trắng chuyển sang màu lục tối, sống hoại sinh

Ức chế sự tăng trưởng của tơ, nhất

là bào ngư Làm giảm sản lượng nấm

(Bệnh mốc xanh)

Tơ mảnh, mọc bung dạng bông trên

cơ chất vết bệnh trải rộng nhanh, bào

tử thành dể, mịn, lúc đầu có màu trắng chuyển sang lục lam Nấm sống hoại sinh, một số ký sinh trên nấm lớn Bệnh lan do bào tử

Ức chế mạnh lên sự tăng trưởng của tơ

fungicota

Tơ phát triển trên bề mặt tai nấm, tạo nhiều lỗ hang và các vết nứt hiện tượng bện khác với vi khuẩn là không nhầy nhớt và hôi thối Sống ký sinh trên nấm lớn, bệnh ta do ruồi và người hái nấm

Tai nấm biến dạng

và ngừng tăng trưởng, phẩm chất kém

Trong đó, vi khuẩn và nấm mốc có tốc độ sinh sản nhanh, đặc biệt bào tử nấm

mốc phát tán rộng nên khả năng lây nhiễm của chúng thường nhiều hơn Ở đa số

trường hợp ghi nhận được, thì nấm trồng có khả năng ức chế một phần mầm bệnh,

thậm chí bao chụp lên vết bệnh và vẫn ra tai nấm bình thường, tất nhiên sản lượng

nấm sẽ giảm sút so với không bệnh Nếu trường hợp nhiễm kèm theo ẩm độ nguyên

liệu cao hoặc pH acid (chua) có thể ức chế tơ nấm ăn lan và bệnh phát triển gây hư

hỏng toàn bộ cơ chất Hoặc nhầy nhớt (nhiễm trùng) hoặc đổi màu từng vùng hay

biến đổi đều khắp (nấm mốc), lúc này tơ nấm không mọc được và dĩ nhiên cũng

không tạo được quả thể

a: Mốc cam xuất hiện ở miệng bịch phôi b: Bịch phôi bị nấm râu (nấm nhầy)

Hình 2.9 Một số bệnh do mốc gây ra cho nấm

(Nguồn: Lê Duy Thắng)

Biểu hiên của một số bệnh ở nấm trồng :

Thường bệnh xảy ra ít có cách nào điều trị thật hiệu quả Chủ yếu là giảm bớt tác