Khoa Học Tự Nhiên thành phố Hồ Chí Minh)
Cơ chất dùng nuôi cấy hoặc trồng nấm rất giàu dinh dưỡng nên có thể là thức ăn
cho nhiều loại vi sinh vật khác nhau. Dưới đây là vài loại nấm mốc thường gặp :
Bảng 2.6: Vài loài nấm mốc thường gặp trong nuôi trồng nấm
STT Tên nấm mốc Đặc điểm biểu hiện Hậu quả trên nấm
1
Cephalosporium spp. (Bệnh gợn
sóng màu hung)
Tơ nám màu hung xuất hiện vài ngày sau khi quả thể rì các giọt nước màu
nâu. Đôi khi thành lớp màng mỏng
bao lấy phiến nấm. Bao từ sinh ra
gom trong các dịch nhày. Sống ký
sinh hoặc hoại sinh
Tai nấm bệnh không bị biến dạng nhung nơi vết bênh chuyển sang đen, chất lượng
giảm
2
Dactylium dendroides
(Bệnh mạng nhện)
Tơ phù lên quả thể như mạng nhện ban đầu màu trắng sau đó chuyển
sang hồng rồi vàng. Đỉnh bào tử hình
trưng và sinh theo dạng chùm. Một
số ký sinh nấm lớn.
Tai nấm, đặc biệt là phiến, bị mềm nhũn, đôi khi trở nên cứng.
Thịt nấm chuyển sang nâu. 3 Monilia spp (new ospora spp) (Bệnh mốc cam)
Tơ mọc dày, màu chuyển sang vàng hoặc cam. Cơ quan sinh sản dạng
khối khối màu cam (có khi đục thủng
cả túi nhựa) hoại sinh.
ức chế sự tăng trưởng của tơ nấm, làm tơ không mọc được. nguyên liệu
phủ trắng sau chuyển sang vàng và cam 4 Mycogone perniciosa (Bệnh nốt ruồi)
Tơ ngắn cuộn đầu, màu trắng quanh
tai nấm. Hậu bào tử hình thành sau vài ngày, màu sẫm (làm vết bệnh có (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
màu nâu). Bệnh lan truyền bằng đỉnh
bào tử. ký sinh trên nấm lớn.
Quả thể chết non.
Tai nấm mền nhũn
và chuyển sang màu kem. Bề mặt tai nấm
có những giọt màu nâu do nhiễm trúng
tạo mùi hơi khó chịu
5 Pertticillium spp. (Bệnh mốc xanh)
Tơ mảnh, mọc sát cơ chất và co cụm
lại. vết bệnh lúc đầu có màu trắng
chuyển sang màu lục tối, sống hoại
sinh
Ức chế sự tăng trưởng của tơ, nhất là bào ngư. Làm
giảm sản lượng
nấm.
6 Trichoderma spp. (Bệnh mốc xanh)
Tơ mảnh, mọc bung dạng bông trên
cơ chất. vết bệnh trải rộng nhanh, bào tử thành dể, mịn, lúc đầu có màu trắng chuyển sang lục lam. Nấm sống
hoại sinh, một số ký sinh trên nấm
lớn. Bệnh lan do bào tử.
Ức chế mạnh lên sự tăng trưởng của tơ
7 Vertticillium
fungicota
Tơ phát triển trên bề mặt tai nấm, tạo
nhiều lỗ hang và các vết nứt. hiện tượng bện khác với vi khuẩn là không nhầy nhớt và hôi thối. Sống ký
sinh trên nấm lớn, bệnh ta do ruồi và
người hái nấm
Tai nấm biến dạng
và ngừng tăng trưởng, phẩm chất
Trong đó, vi khuẩn và nấm mốc có tốc độ sinh sản nhanh, đặc biệt bào tử nấm (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
mốc phát tán rộng nên khả năng lây nhiễm của chúng thường nhiều hơn. Ở đa số trường hợp ghi nhận được, thì nấm trồng có khả năng ức chế một phần mầm bệnh,
thậm chí bao chụp lên vết bệnh và vẫn ra tai nấm bình thường, tất nhiên sản lượng
nấm sẽ giảm sút so với không bệnh. Nếu trường hợp nhiễm kèm theo ẩm độ nguyên liệu cao hoặc pH acid (chua) có thể ức chế tơ nấm ăn lan và bệnh phát triển gây hư
hỏng toàn bộ cơ chất. Hoặc nhầy nhớt (nhiễm trùng) hoặc đổi màu từng vùng hay biến đổi đều khắp (nấm mốc), lúc này tơ nấm không mọc được và dĩ nhiên cũng
không tạo được quả thể.
a: Mốc cam xuất hiện ở miệng bịch phôi b: Bịch phôi bị nấm râu (nấm nhầy)
Hình 2.9 Một số bệnh do mốc gây ra cho nấm
(Nguồn: Lê Duy Thắng)
Biểu hiên của một số bệnh ở nấm trồng :
hại của nó và nhất là ngăn chặn nguồn bệnh lây lan không chỉ trong một đợt nuôi
trồng mà có thể nhiều đợt tiếp theo.
Một số biểu hiện bệnh trong trồng nấm và biện pháp khắc phục :
Tùy theo biểu hiện của bệnh mà có phương pháp khắc phục (Bảng 2.7). Bảng 2.7 Một số biểu hiện bệnh trong trồng nấm và biện pháp khắc phục : STT Hiện trạng Nguyên nhân Biện pháp khắc phục
1
Tơ không mọc
hoặc không bám vào cơ chất
– Nguyên liệu quá ẩm
– Nguyên liệu bị ngộ độc do mạt cưa
có chất đầu, chất thơm. Bổ sung đạm không đúng cách, nồng độ amoniac (NH4) cao trong cơ chất. Nhiễm tạp trước khi cấy giống
– Giống yếu, già hoặc chết
– Nhiệt độ không thích hợp (nóng
hoặc lạnh quá)
– Xem lại độ ẩm ban đầu
– Kiểm tra nguyên liệu và quá trình chế
biến
– Thay giống tốt hơn
– Che ủ (nếu lạnh)
thông thoáng (nếu
nóng)
2 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Tơ mọc chậm và
thưa hoặc rối nùi. Một số trường
hợp ngừng nửa
chừng
– Nguyên liệu không đạt yêu cầu
(pH acid (chua) hoặc kiềm, độ ẩm cao, đọng nước ở đáy. Đôi khi cũng do hơi khô)
– Nguyên liệu bị nhiễm khuẩn
– Giống thoái hóa (ít xảy ra so với 2
lý do trên)
– Kiểm tra khâu chế
biến nguyên liệu
– Xem lại khâu khử
trùng – Thay giống tốt hơn 3 Tơ mọc đều nhưng không ra nấm – Giống thoái hóa
– Nhiệt độ không thích hợp (cao quá
hoặc đôi khi thấp quá)
– Tơ chưa đủ trưởng thành (ra nấm) – Độ ẩm không đủ hoặc hơi khô
– Thay giống tốt hơn
– Theo dõi nhiệt độ,
tạo điều kiện cho
nấm kết nụ
– Thiếu thông thoáng gian (sau khi tơ nấm đầy), rồi mới đem ra tưới
– Giữ độ ẩm không
khí trên 85% bằng cách phun nước.
– Xem lại điều kiện
nhà trồng (tăng độ thoáng khí) 4 Quả thể kết nụ nhưng không lớn hoặc chết non – Giống thoái hóa
– Nguyên liệu bó (rơm) hoặc nén
(mạt cưa hay cơ chất khác) không
chặt. Tai nấm dễ mất rễ và tàn lụi.
– Thiếu dinh dưỡng
– Nhiều tai nấm cùng xuất hiện và cạnh tranh nhau. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
– Dinh dưỡng giảm qua quá trình thu hái nhiều lần
– Thay giống mới – Tăng độ nén cho mô – Bổ sung dinh dưỡng – Hạn chế số tai nấm phát triển cùng lúc (rạch hoặc mở túi một phần)
– Tưới dinh dưỡng
hoặc kết thúc quá
trình thu hoạch
5 Tai nấm bị nhũn trước khi thu hái
– Nhiễm bệnh (nấm mốc, vi khuẩn
hoặc côn trùng...)
– Tưới nước trực tiếp và quá mạnh
lên tai nấm (nhất là nấm rơm và bào ngư) – Cách ly nguồn bệnh, sử dụng thuốc để trị – Tránh tưới nước thành giọt lên tai nấm. 6 Cuống nấm dài và nhỏ ; mũ nấm – Nơi nuôi trồng bị ngộp (nồng độ thán khí CO2 cao) – Thông thoáng, nhất là chân nhà
không phát triển – Thiếu ánh sáng trồng – Cung cấp đủ ánh sáng cho nấm (ánh sáng khuếch tán) 7 Tai nấm dị dạng
(bông cải, teo đầu,
khô cứng, chết non...) – Nhiễm bệnh (nấm mốc, côn trùng, nhện nấm...) – Nước tưới bị phèn, mặn
– Ẩm độ không khí hơi khô
– Nhiệt độ thay đổi đột ngột (lạnh
quá hoặc nóng quá)
– Xác định bệnh,
cách ly và xử lý
thuốc
– Kiểm tra nước tưới
bằng giấy pH (độ
phèn) hoặc cảm quan (độ mặn)
– Nâng độ ẩm bằng
cách phun tưới nước
– Che chắn thích
hợp nhất là nơi có sự thay đổi nhiệt độ
nhiều giữa ngày và
đêm.
8 Sản lượng kém
– Cơ chất thiếu dinh dưỡng (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
– Nhiễm bệnh
– Giống yếu hoặc thoái hóa
– Thời tiết thất thường, nhiệt độ thay đổi đột ngột
– Thu hái không đúng cách (tách tai nấm hay hái không cẩn thận ảnh hưởng đến các tai nấm bên cạnh
hoặc thừa gốc gây nhiễm cho nấm đợt 2 hoặc 3...)
– Thêm dinh dưỡng đầy đủ
– Vệ sinh môi trường kỹ hơn trước
và sau mỗi đợt nuôi
trồng
– Thay giống tốt hơn
– Che chắn thích
hợp
– Xem lại cách thu
Việc sử dụng thuốc không phải là biện pháp tối ưu, nó thường dẫn đến các
hậu quả xấu như :
Gây độc cho người tiếp xúc trực tiếp với thuốc.
Ảnh hưởng đến nấm trồng, làm tơ yếu dễ nhiễm bệnh hơn. Trong nhiều trường
hợp tơ bị chết hoặc quả thể ngừng tăng trưởng.
Giảm chất lượng sản phẩm : nấm có thể tích lũy các chất độc của thuốc và sản
phẩm của nó hoặc tai nấm trở nên độc cho người sử dụng.
Làm mất cân bằng sinh thái : thuốc diệt mầm bệnh nhưng đồng thời cũng diệt cả
các sinh vật có lợi, bao gồm những “thiên địch” của đối tượng gây bệnh hay những
kẻ thù của chúng. Thí dụ: kiến ăn nhện mạt (mites). Vì vậy khi bệnh phát triển trở
lại, thì lan truyền rất nhanh và hậu quả nghiêm trọng hơn gấp nhiều lần.
– Sự lờn thuốc : việc sử dụng thường xuyên thuốc diệt khuẩn, diệt côn trùng, nhất là tình hình lạm dụng thuốc trong trồng nấm hiện nay có thể dẫn đến hậu quả là vi trùng, nấm mốc hoặc côn trùng quen dần với thuốc (lờn thuốc). Đến khi dịch bệnh
phát triển khó chặn đứng.
Tuy nhiên, vì thuốc vẫn là cách dập dịch bệnh nhanh và hữu hiệu nhất, nên trong trồng nấm vẫn phải dùng một số thuốc để phòng ngừa và điều trị các bệnh ở nấm.
Một số biện pháp phòng bệnh trong nuôi trồng nấm:
Biện pháp tích cực nhất nhằm tránh những tổn thất do dịch hại gây ra là tổ chức (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
phòng ngừa. Việc ngừa bệnh bao gồm nhiều vấn đề :
. Chọn địa điểm
Nơi trồng nấm nên xa nguồn bệnh như cống rãnh, rác rưởi, lá cây mục, phế liệu
trồng nấm, chuồng trại chăn nuôi... Ngoài ra, cũng nên tránh các nơi có nhiều bụi, như nhà máy xay xát, chế biến nông sản, cưa xẻ gỗ...
. Hợp lý hóa qui trình sản xuất
Việc bố trí kho nguyên liệu, nơi dự trữ sản phẩm (nấm khô), phòng cấy,
– Người chăm sóc không nên đi từ phòng này sang phòng khác, nhất là sau khi vào phòng trồng.
Phòng ủ cần thoáng và ánh sáng vừa phải, bịch phôi không chồng chất lên nhau
để tránh nấm mốc, côn trùng có điều kiện ẩn náu và phát triển.
– Nhà trồng nên tưới tập trung, tránh làm theo kiểu gối đầu thành nhiều đợt, bệnh đợt trước có thể lây sang đợt sau.
. Xử lý môi trường và nguyên liệu
– Trước và sau mỗi đợt nuôi trồng cần vệ sinh kỹ nhà trồng, như : nền đất, dàn kệ hoặc kèo cột. Việc xử lý nên tiến hành cùng lúc và trước khi nuôi trồng ít nhất là hai ngày, như phun thuốc diệt côn trùng trên vách, rải thuốc diệt tuyến trùng trên nền (nền đất hoặc cát), quét vôi cộng muối hoặc nhớt cặn lên các dàn cột (gỗ, tầm
vông).
– Thu dọn nguyên liệu rơi vãi, không quét tấp vào một góc nào đó, lâu ngày sẽ gây
nhiễm.
– Cơ chất đã không khử trùng thì thôi, còn ngược lại phải hấp thật kỹ, vì bên trong có nhiều thành phần thích hợp cho mầm bệnh mọc nhanh hơn bình thường.
. Ngăn chặn bệnh lây lan
Trường hợp bệnh đã xảy ra (bệnh lây lan) phải cô lập ngay khu vực bệnh, như cách ly nguồn bệnh và phun thuốc diệt. Phun ngừa khu vực xung quanh, theo
dõi kiểm tra thường xuyên hơn.
Bình thường chưa thấy bệnh xảy ra cũng phải có kế hoạch chăm sóc định kỳ để
có thể phát hiện sớm mầm bệnh, kịp ngăn chặn trước khi lây lan.
– Nhà trồng, nhà ủ hay cơ sở nói chung, càng ít người lạ ra vào càng tốt. Đặc biệt là
CHƯƠNG 3 : VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Địa điểm và thời gian thực hiện đề tài :
a. Địa điểm :
Đề tài được thực hiện tại Phòng thí nghiệm Công nghệ Sinh học của Viện
nghiên cứu công nghệ sinh học và môi trường, trường Đại học Nha Trang.
b. Thời gian :
Thời gian thực hiện đề tài từ tháng 3/2011 đến tháng 7/2011. 3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm:
3.2.1. Vật liệu và phương pháp :
3.2.1.1. Vật liệu nghiên cứu: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Mẫu giống nấm
Nguồn mẫu giống nấm Hoàng chi Ganoderma colossum Fr. (viết tắt là Fr.)*
để thực hiện các thí nghiệm của đề tài nhận được từ Viện công nghệ sinh học và môi
trường, mẫu đã được nuôi cấy khoảng 2 tuần tuổi. Chọn các ống nghiệm có tơ phát
triển tốt, đều và thuần chủng, chưa có hiện tượng lão hóa: tơ nấm màu trắng, tơ phát
triển bình thường không bị rối, không có xuất hiện các điểm nấm mốc , tơ khỏe chưa bị chuyển sang màu vàng chứng tỏ tơ nấm bị già.
Hình 3.1 : Mẫu giống nấm
Bã mía
Bã mía được thu gom tại các quán giải khát trên địa bàn thành phố Nha Trang. Sau
đó được phơi khô, cắt nhỏ rồi ngâm với nước vôi (2%) để khử trùng , để ráo, ủ 4- 5 ngày để phối trộn với các thành phần khác cho vào túi PE ( Polyetylen).
Dụng cụ và thiết bị: tại phòng thí nghiệm công nghệ sinh học của Viện Công nghệ sinh học và Môi trường gồm:
- Bình tam giác, ống nghiệm, đĩa petri.
- Tủ cấy : hãng Telstar, Tây Ban Nha
- Que cấy, đèn cồn, nút bông, giấy báo, dây thun, dao mổ, kéo, panh, túi PE chịu
nhiệt.
- Nồi hấp Autoclave : (hãng Sturdy industrial Đài Loan)
- Tủ sấy: (hãng Binder, Đức)
- Lò vi sóng : (hãng LG, Hàn Quốc) - Cân điện tử.
- Phòng ủ sợi, nhà nuôi.
Dụng cụ trước khi sử dụng được sấy ở 1600C trong 2 giờ. Hóa chất :
- Agar
- KH2PO4, Peptone, MgSO4, Glucose: (tiệm hóa chất Tam Hưng)
3.2.1.2. Phương pháp nghiên cứu
a. Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm 1. Khảo sát tốc độ tăng trưởng hệ sợi nấm G. Colossum.
trên môi trường thạch (PGA cải tiến : Potato Glucose Agar)
Mục đích: xác định tốc độ tăng trưởng của hệ sợi nấm chịu ảnh hưởng bởi các
Tiến hành thí nghiệm
Pha chế môi trường PGA cải tiến với các thành phần dinh dưỡng như ở Bảng
3.1. Khoai tây, cà rốt, giá đỗ rửa sạch, cắt nhỏ, nấu chín, lọc kỹ lấy nước, sau đó (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
cho các thành phần còn lại vào nấu tiếp, điều chỉnh đến 1 lít, đợi nguội khoảng
60 – 700C, cho vào ống nghiệm, đĩa petri. Khử trùng bằng nồi Autoclave nhiệt độ 1210C, 1 atm trong 20 phút, để nguội.
Bảng 3.1. Thành phần của môi trường PGA cải tiến
Thành phần Hàm lượng Nước chiết (*) Glucose Agar KH2PO4 Peptone MgSO4 1 lít 20 g 20 g 1 g 1 g 1 g
(*) Nước chiết gồm: 200 g khoai tây, 100 g cà rốt và 100 g giá đỗ.
Dùng que cấy, dao mổ và pank tách lấy phần thạch có tơ nấm, rồi cắt thành từng
miếng độ 6mm2, cấy vào đĩa petri, ủ tối ở nhiệt độ 26 ± 20C. Hình vẽ mô tả:
Quan sát và đo tốc độ lan tơ nấm định kỳ 2 ngày/1 lần, rút ra nhận xét kết luận.
Thí nghiệm 2. Khảo sát tốc độ ăn sâu của nấm Ganoderma colossum
trên môi trường hạt lúa
Mục đích: xác định tốc độ ăn sâu của tơ chịu ảnh hưởng của yếu tố nhiệt độ và độ ẩm.
Tiến hành thí nghiệm
Ngâm lúa khoảng 12 giờ, loại bỏ hạt lép, để ráo nước. Sau đó đun cho đến khi hạt
nứt đều, rửa sạch và để cho ráo nước, bổ sung thêm CaCO3 (2%) chất này giúp
điều chỉnh PH và độ ẩm cho lúa, sau đó cho lúa vào ống nghiệm với lượng bằng
nhau theo công thức môi trường hạt. Đem hấp khử trùng trong Autoclave ở
1210C, 1 atm trong 60 phút.
Công thức môi trường hạt:
o Thóc hạt; 88%
o Cám: 10%
o Vôi: 2%
o Nước: đủ ẩm 60- 65%
Dùng que cấy, dao và pank tách lấy phần thạch có tơ nấm thành những mẫu
khoảng 6mm2 cấy vào môi trường hạt, ủ tối ở nhiệt độ phòng.
Hình 3.3: Cách cấy chuyền qua môi trường hạt
Thí nghiệm 3. Khảo sát sự sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm và sự hình thành quả
thể trên cơ chất hỗn hợp mùn cưa phối trộn với bã mía phế thải
Mục đích: Khảo sát đánh giá phát triển và sự hình thành quả thể trên môi trường cơ chất phối trộn với bã mía.
Tiến hành thí nghiệm
Phối trộn cơ chất theo tỷ lệ như Bảng 3.2, ủ qua đêm, tiến hành đóng bịch cơ (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});