4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.2.1. Nhân giống sản xuất
Giống gốc ựưa vào sản xuất là vi khuẩn phó thương hàn lợn cường ựộc
Salmonella choleraesuis chủng S1,S2, ựược bảo quản trong ống ựông khô ở nhiệt ựộ 2 Ờ 80C. Mỗi lô sản xuất Ban giống của Xắ nghiệp thuốc thú y mở ống ựông khô, cấy trên môi trường thạch nuôi cấy vi khuẩn phó thương hàn lợn, chọn khuẩn lạc có kắch thước, màu sắc ựiển hình. đồng thời kiểm tra ựộc lực qua chuột lang ( tiêm 250.000.000 vi khuẩn cho chuột từ 250 Ờ 400gr, theo dõi trong 12 ngày chuột chết với bệnh tắch viêm ruột, gan sưng loét). Như vậy là giống gốc ựạt tiêu chuẩn ựể cấp cho sản xuất.
Ban giống của Xắ nghiệp thuốc thú y trung ương cấp giống gốc, mỗi chủng 3 ống giống (3 S1, 3 S2) . Giống VK gốc ựược nhuộm Gram và soi kắnh ựể kiểm tra kắch thước, hình thái và tắnh chất bắt màu của vi khuẩn; ria cấy trên
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 57
thạch ựĩa ựể kiểm tra ựộ thuần khiết.
Chúng tôi cũng dùng que cấy bạch kim lấy khuẩn lạc giống VK PTH ựạt yêu cầu ựể nuôi cấy trên môi trường tăng sinh (6 bình tam giác, mỗi bình có dung tắch 600ml môi trường ựã hấp tiệt trùng) và ựược nuôi dưỡng ở ựiều kiện 370C/ 6 giờ/ dàn lắc ựể nhân giống sản xuất. Khuẩn lạc của S. choleraesuis bở, dễ lấy.
Sau ựó cũng tiến hành kiểm tra thuần khiết canh trùng giống trên các môi trường cơ bản là 2 ống thạch máu, 2 ống thạch thường, 2 ống nước thịt, 2 ống yếm khắ và 2 ống thạch nấm. Các môi trường kiểm tra này ựược ựưa vào tủ ấm 370C và ựọc kết quả sau 18 Ờ 48 giờ, riêng thạch nấm ựể ở nhiệt ựộ phòng.
Chúng tôi ựọc kết quả kiểm tra thuần khiết trên các môi trường sau 18- 24 giờ thấy:
+ Ở trên các ống thạch chỉ có một loại khuẩn lạc duy nhất:
- Trên ống thạch máu: Khuẩn lạc mọc nhẵn, rìa gọn, không làm dung huyết.
- Trên ống thạch thường: Khuẩn lạc nhẵn, bóng, dưới ánh ựèn ựiện màu trắng ựục ánh xanh.
+Trên ống nước thịt: Canh trùng ựục ựều.
+ Trên ống yếm khắ: Canh trùng ựục ựều, không sinh hơi. + Trên ống thạch nấm: Không có nấm mọc.
Kết quả này cho thấy trên các môi trường kiểm tra chỉ có vi khuẩn S. choleraesuis mọc. Vậy là giống ựạt tiêu chuẩn về thuần khiết. Chúng tôi tiến hành tập trung các bình tam giác có chứa giống thuần khiết (mỗi bình 2 chủng) vào các bình cầu ựể có 1,0Ờ1,2 lắt giống/ bình. Sau ựó tiến hành lấy mẫu ựể ựếm số lượng vi khuẩn như trình bày ở mục 3.5.1.4 và chuyển bình giống vào tủ lạnh dương 2Ờ 40C ựể bảo quản giống, (không nên sử dụng những bình giống ựã ựể quá 7 ngày.)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 58
Kết quả kiểm tra thuần khiết và ựếm số lượng vi khuẩn PTH lợn của 5 lô giống ựược trình bày ở bảng 4.4:
Bảng 4.4. Kết quả kiểm tra thuần khiết và số lượng vi khuẩn PTH lợn của 5 lô giống
Môi trường kiểm tra Lô giống Thạch máu Thạch thường Nước thịt Yếm khắ Thạch nấm Số lượng VK tỷ/ml Mật ựộ VK tiêu chuẩn tỷ/ml Lô 1 TK TK TK TK TK 10,20ổ0,24 Lô 2 TK TK TK TK TK 10,34ổ0,16 Lô 3 TK TK TK TK TK 10,22 ổ0,33 Lô 4 TK TK TK TK TK 10,37ổ0,18 Lô 5 TK TK TK TK TK 10,30ổ0,21 10ổ0,5
Qua bảng 4.4 cho thấy trên các môi trường kiểm tra ựều ựạt tiêu chuẩn thuần khiết, mật ựộ vi khuẩn của 5 lô giống PTH ựạt từ 10,20ổ0,24 tỷ VK/ml ựến 10,37ổ0,18 tỷ VK/ml. đánh giá về khâu nhân giống sản xuất chúng tôi nhận thấy 5 lô giống PTH lợn ựều ựạt các tiêu chuẩn vi sinh vật ựó là: hình thái khuẩn lạc, kắch thước vi khuẩn, ựộ thuần khiết và số lượng vi khuẩn lớn hơn 10 tỷ VK/ml canh trùng giống. Do ựó chúng tôi quyết ựịnh ựưa các lô giống này vào sản xuất.