Nghiên cứu vòng đời của vi tảo lục Haematococcus pluvialis trong điều kiện phòng thí nghiệm

TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Giới thiệu chung về tảo và vi tảo 1.1.1. Khái niệm về tảo và vi tảo 1.1.2. Vài nét về đặc điểm sinh học của tảo 1.1.3. Sinh trưởng của tảo 1.1.4. Phân loại

MỞ ĐẦU1. Đặt vấn đề Vi tảo (Microalgae) là những loại tảo có kích thước hiển vi. Chúng có vai trò rất quan trọng trong tự nhiên và trong đời sống của con người. Trong các thuỷ vực tảo cung cấp oxy và là mắt xích đầu tiên trong chuỗi thức ăn của thủy vực, cung cấp hầu hết thức ăn sơ cấp cho cá cũng như các động vật thuỷ hải sản khác. Nhiều loại tảo biển còn được khai thác để sản xuất thạch (agar), alginate, sản phẩm giàu iod, làm phân bón . Nhiều tảo đơn bào được nuôi trồng công nghiệp để tạo ra những nguồn thức ăn cho ngành nuôi trồng thủy sản hay thực phẩm chức năng bổ dưỡng giàu protein, vitamin và khoáng dùng cho người. Tảo còn là nguyên liệu trong các ngành Y, Dược, mỹ phẩm, được sử dụng trong xử lí ô nhiễm môi trường, làm phân bón, góp phần giảm nhẹ sự biến đổi khí hậu toàn cầu (sử dụng tảo để giảm thiểu hiệu ứng nhà kính), gớp phần trong việc giải quyết vấn đề an ninh năng lượng (sản xuất nhiên liệu sinh học từ tảo) . Tuy nhiên, ứng dụng phổ biến nhất hiện nay của vi tảo là làm thức ăn trong nuôi trồng thuỷ sản và tách chiết những chất có hoạt tính sinh học có thể thương mại hóa được.Trong những sản phẩm từ tảo thì astaxanthin có giá trị thương mại lớn do các ứng dụng đa dạng và giá thành cao (khoảng 2500 – 3000 USD/kg) [27]. Đây là một loại chất thuộc nhóm carotenoit, có thể tìm thấy trong nhiều loại hải sản như cá hồi, cá vền, tôm cua, trứng cá, một số loài chim [15]. Động vật có vú không thể tự tổng hợp được astaxanthin và phải được cung cấp từ khẩu phần ăn.Loài vi tảo lục Haematococcus pluvialis có khả năng tích luỹ astaxanthin cao nhất. Tuy nhiên, hiện nay công nghệ nuôi tảo Haematococcus pluvialis để cung cấp nguồn giống thuần cho các nghiên cứu chuyên sâu về khoa học cơ bản trên đối tượng này cũng như ứng dụng sinh i khối tảo trong thực tế vẫn đang là thách thức đối với các nhà khoa học của Việt Nam. Chính vì thế, để có thể chủ động nguồn giống phù hợp với điều kiện khí hậu của Việt Nam, chúng ta cần phải tiến hành: “Nghiên cứu vòng đời của vi tảo lục Haematococcus pluvialis trong điều kiện phòng thí nghiệm”. Công việc được thực hiện tại phòng Công nghệ Tảo, Viện Công nghệ Sinh học thuộc Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam.1 PHẦN 1TỔNG QUAN TÀI LIỆU1.1. Giới thiệu chung về tảo và vi tảo1.1.1. Khái niệm về tảo và vi tảoTảo (Algae) là những thực vật bậc thấp (thực vật có bào tử, cơ thể không phân chia thành thân, rễ, lá). Trong tế bào (TB) tảo có chứa diệp lục và chúng sống chủ yếu ở nước.Vi tảo (Microalgae) là tất cả các loại tảo có kích thức hiển vi tức là muốn quan sát được chúng thì phải sử dụng kính hiển vi. Trong số khoảng 50.000 loài tảo trên thế giới thì vi tảo chiếm khoảng 2/3. Vai trò quan trọng của vi tảo thể hiện qua quá trình quang hợp hấp thụ CO2, cung cấp O2 cho các sinh vật khác trên trái đất, khép kín vòng tuần hoàn vật chất và làm tăng tốc độ quay vòng của các chu trình đó [5].Tảo có mặt ở khắp nơi trên trái đất, từ đỉnh núi cao cho đến dưới đáy biển sâu, thậm chí ở cả độ sâu khoảng 200m dưới biển nếu như nước biển ở đó rất sạch [9]. Những loài tảo sống trong các thuỷ vực được gọi là tảo phù du (phytoplankton) còn những tảo sống bám đáy thủy vực, bám trên các vật sống hay các thành tàu thuyền được gọi là tảo đáy (Phytobentos). Dạng tảo cộng sinh với nấm thành Địa y cũng là dạng phân bố rất rộng rãi và nhiều loài đã được khai thác dùng làm dược phẩm, nước hoa, phẩm nhuộm và các mục đích kinh tế khác (hiện đã biết tới 20.000 loài Địa y thuộc 400 chi khác nhau) [41].1.1.2. Vài nét về đặc điểm sinh học của tảoCơ thể tảo được gọi là tản (thallus) vì thiếu thân, rễ và lá nhưng chúng lại có chlorophyll a - sắc tố quang hợp điển hình. Hầu hết các loại tảo đều sống trong môi trường nước, từ nước ngọt đến nước mặn và nước lợ. Tảo có cấu trúc từ dạng đơn bào đến đa bào và tập đoàn. Nhìn chung tế bào tảo có 2 một số đặc điểm cấu trúc tương tự như thực vật bậc cao: có vách TB cấu tạo từ cellulose, có lục lạp và chlorophyll [3].Một số cấu trúc dạng tản của tảo mà chúng ta thường gặp là cấu trúc mônát, cấu trúc palmella, cấu trúc hạt, cấu trúc sợi, cấu trúc dạng bản và cấu trúc ống (siphon). Nhìn chung tảo có 3 phương thức sinh sản là sinh sản sinh dưỡng, sinh sản vô tính và sinh sản hữu tính [3].Phương thức dinh dưỡng của tảo được phân thành hai loại chính: quang tự dưỡng (photoautotrophy) và dị dưỡng (heterotrophy). Dạng trung gian của hai hình thức trên là tạp dưỡng (mixotrophy) [1]. Những tảo sống trên bề mặt thì cần ánh sáng để quang hợp. Quá trình quang hợp sử dụng CO2 và ánh sáng mặt trời để tạo ra các vật chất hữu cơ. Ở dạng tạp dưỡng, quang hợp vẫn là quá trình cơ bản để tạo chất hữu cơ nhưng trong một số trường hợp, tảo sử dụng được cả các chất hữu cơ có sẵn. Môi trường dinh dưỡng cho nuôi trồng tảo phải dựa theo nhu cầu dinh dưỡng của từng loài. Mặc dù vậy, việc xác định chính xác nồng độ của từng yếu tố dinh dưỡng cho một loài nào đó là rất khó khăn vì nồng độ dinh dưỡng tối ưu phụ thuộc rất nhiều vào mật độ quần thể, ánh sáng, nhiệt độ và pH môi trường.1.1.3. Sinh trưởng của tảo:Sự tăng trưởng của tảo nuôi trồng trong điều kiện vô trùng được đặc trưng bởi 5 pha [30] được thể hiện ở hình 1. 3 Hình 1: Năm pha sinh trưởng của vi tảo- Pha chậm hoặc cảm ứng (1): Tảo sinh trưởng chậm, mật độ TB tăng ít do phải thích nghi dần với môi trường sống mới.- Pha sinh trưởng theo hàm số mũ (2): Ở pha này mật độ TB tăng nhanh- Pha giảm tốc độ sinh trưởng (3): Sự phân chia TB sẽ chậm lại khi các chất dinh dưỡng, ánh sáng, độ pH, CO2 hoặc các yếu tố lý hóa khác bắt đầu hạn chế sự sinh trưởng.- Pha ổn định (4): Mật độ TB tương đối ổn định, không thay đổi do các yếu tố hạn chế và tốc độ sinh trưởng ở trạng thái cân bằng.- Pha tàn lụi (5): Chất lượng môi trường trở nên xấu đi, các chất dinh dưỡng suy kiệt tới mức không thể duy trì được sự sinh trưởng. Mật độ TB giảm mạnh.1.1.4. Phân loại:Căn cứ vào màu sắc, sự có mặt của các chất dự trữ, thành phần vỏ, cấu tạo nhân TB người ta có thể chia tảo thành những ngành khác nhau. Vi tảo chủ yếu thuộc về các chi trong các ngành sau:1- Ngành Chlorophyta (Tảo lục):Các chi Closterium, Coelastrum, Dyctyosphaerium, Scenedesmus, Pediastrum, Staurastrum, Dunaliella, Chlamydomonas, Haematococcus, Tetraselmis, Chlorella .4 2- Ngành Heterokontophyta (Tảo lông roi lệch):Các chi Melosira, Asterionella, Cymatopleurra, Somphonema, Fragilaria, Stephanodiscus, Navicula, Malomonas, Dinobryon, Peridinium, Isochrysis, Chaetoceros, Phaeodactylum, Skeletonema, Nitzschia 3- Ngành Euglenophyta (Tảo mắt):Các chi Phacus, Trachelomonas, Ceratium .4- Ngành Rhodophyta (Tảo đỏ):Các chi Porphyridium, Rhodella .1.1.5. Giá trị dinh dưỡng của vi tảo:Ưu điểm của vi tảo là kích thước nhỏ phù hợp, dễ tiêu hoá, ít gây ô nhiễm môi trường, nhiều loài không có độc tố, có thể chuyển hoá trong chuỗi thức ăn, tỷ lệ phát triển nhanh, có khả năng nuôi sinh khối lớn, cung cấp đầy đủ các dưỡng chất cần thiết cho động vật nuôi. Do đó đây là thức ăn sống đặc biệt quan trọng cho tất cả các giai đoạn phát triển của động vật thân mềm hai vỏ (Bivalvia) như: hầu, điệp, sò…; ấu trùng của hầu hết các loài tôm, cá, ốc và cho các động vật phù du. Nhìn chung hàm lượng protein của vi tảo dùng trong nuôi trồng thuỷ sản thay đổi từ 6 – 52%, carbohydrate: 5 - 23%, lipit: 7 - 23% [8].Đến nay, tất cả các nghiên cứu đều xác định rằng các loài tảo khác nhau thì chúng có giá trị dinh dưỡng khác nhau. Một loài tảo có thể thiếu ít nhất một thành phần dinh dưỡng cần thiết. Vì vậy, việc sử dụng hỗn hợp các loài tảo làm thức ăn cho động vật, thuỷ sản sẽ cung cấp chất dinh dưỡng tốt hơn nhưng phải biết kết hợp các loài tảo cho hợp lý cả về tỷ lệ và thành phần, phù hợp với nhu cầu dinh dưỡng của từng đối tượng nuôi cụ thể thì mới đem lại hiệu quả cao. 1.2. Những ứng dụng chủ yếu của vi tảo: đó là hai mảng sau:1.2.1. Sử dụng vi tảo làm nguồn thực phẩm cho con người và động vật:5 Vi tảo là nguồn thực phẩm chức năng quan trọng cho con người và động vật nuôi. Bất kì một loại protein đơn bào nào cũng phải trải qua thử nghiệm cẩn thận ở động vật thực nghiệm trước khi trở thành thức ăn cho người hoặc động vật. Ví dụ sinh khối tảo Spirulina đã được Chamorro (1980) tiến hành thử nghiệm độc tố ngắn hạn và trường diễn, nghiên cứu ảnh hưởng tới sự sinh sản, khả năng tiết sữa, đột biến và gây quái thai . Nhiều nghiên cứu độc tính cấp và độc tính bán trường diễn đối với các loài tảo khác (Scenedesmus, Micractinium, Chlorella .) cũng không tìm thấy bất cứ một bằng chứng nào về khả năng hạn chế việc sử dụng sinh khối tảo trong dinh dưỡng [3].Vào những năm gần đây việc sử dụng vi tảo nói làm nguồn dinh dưỡng cho con người đã thu hút sự quan tâm của nhiều nhà khoa học, nhà sản xuất và người tiêu dùng. Sinh khối tảo có giá trị dinh dưỡng cao và không có độc tố. Nhưng hiện nay việc sử dụng tảo làm nguồn thực phẩm còn gặp nhiều hạn chế vì giá thành sản xuất cao, thử nghiệm dinh dưỡng chưa đủ thuyết phục, thiếu cơ chế kiểm tra chất lượng thường xuyên và thói quen sử dụng các loại thức ăn truyền thống của người tiêu dùng. Trong tương lai, vi tảo hứa hẹn là nguồn thực phẩm sử dụng phổ biến cho mọi gia đình.Chlorella, Miractinium, Scenedesmus, Oocystis và Siprulina là các loại vi tảo thường được sử dụng để bổ sung sinh khối vi tảo vào khẩu phần thức ăn của các loại gia cầm. Ngoài ra vi tảo cũng được sử dụng có hiệu quả trong nghề nuôi tằm và nuôi cá cảnh. Việc đưa sinh khối tảo như Chlorella (protein chiếm 40 – 60% TLK), Scenedesmus (protein chiếm trên 30%), Siprulina (protein chiếm 65 – 70% TLK) [4] vào khẩu phần thức ăn của gà với tỷ lệ 7,5-10% là giải pháp có lợi về kinh tế. Các nhà khoa học đã thử nghiệm việc đưa sinh khối tảo Siprulina vào thức ăn của cá mè trắng, trắm cỏ, rô phi với tỷ lệ 5% làm tăng tỉ lệ sống và tốc độ tăng trưởng của cá. Những thí nghiệm gần đây cho thấy việc bổ sung tảo tươi vào khẩu phần thức ăn của gà mái đẻ giúp tăng tỷ lệ đẻ và 6 hàm lượng VTM A có trong trứng [3]. Do đó, việc ứng dụng vi tảo vào ngành chăn nuôi đang được coi là một hướng đi đầy tiềm năng và có triển vọng nhất.1.2.2. Khai thác các chất có hoạt tính sinh học từ tảo:Nhiều VTM hoà tan trong nước (B1, B12, B6, Biotin, C) được tìm thấy trong dịch nuôi tảo lam, tảo silic và tảo lục. Những loại VTM này được phát hiện dưới dạng các chất trao đổi trung gian như α-, β-, γ-tocopherol (VTM E) ở tảo lam và α-tocopherol và VTM K ở Pophyridium cruentum. Hàm lượng VTM trong sinh khối tảo phụ thuộc vào kiểu gen, chu trình sinh trưởng, điều kiện nuôi trồng và các thao tác di truyền. Hiện nay ở nhiều nước như Đài Loan, Nhật Bản, các chủng tảo Chlorella, Pophyridium đã được nuôi để sản xuất VTM.Trong vi tảo cũng chứa nhiều chất béo tương tự như ở dầu thực vật. Hàm lượng lipit trong tảo dao động từ 20-40% TLK. Trong một số điều kiện nhất định, tảo có thể chứa tới 85% lipit theo TLK. Ngoài chlorophyll, vi tảo còn chứa một số sắc tố bổ trợ như phycobiliprotein và carotenoit. Các loại carotenoit thông thường chỉ chiếm 0,1% TLK của vi tảo nhưng ở một số loài, chúng có thể đạt từ 5-14% TLK. Các sắc tố này có thể đánh dấu kháng thể đơn dòng ứng dụng trong nghiên cứu miễn dịch. Mặt khác, phycobiliprotein và β-caroten được biết đến như những yếu tố nâng cao sức đề kháng của cơ thể và là chất hỗ trợ phòng chống bệnh ung thư. Vi tảo còn chứa một lượng lớn carbonhydrat dưới dạng sản phẩm dự trữ (tinh bột, glycogen) hoặc các chất điều hoà thẩm thấu (glyceron, trehalose, glucose…). Ngoài ra có thể liệt kê một số chất chống oxy hoá có mặt trong sinh khối tảo như carotenoit (sắc tố), tocopherol, VTM C (VTM), superoxydismutase, catalase và glutation peroxydase (enzyme). Các vi tảo - nguồn các chất chống oxy hoá có triển vọng đang được khai thác là: Dunaliella salina: để sản xuất β-caroten, Heamatococcus pluvialis: để sản xuất astaxanthin, Porphyridium cruentum: để sản xuất Superoxydismutase (SOD).7 Vi tảo còn là nguồn cung cấp các chất có hoạt tính kháng sinh (như kháng vi khuẩn, nấm). Ví dụ như: axit acrylic thu từ vi tảo Phaecystis, axit γ- linoleic trong dịch chiết methanol từ tảo Spirulina platensis, Chrococcum . Testraselamiss suecia là một chất ức chế hình thành virus Vibrio sp.,. Một lượng lớn các chất tách từ vi tảo biển có vai trò diệt tảo độc hoặc thuốc trừ sâu như cyanobacterin tách từ Scytonema hofmanni đã được công bố [7].1.3. Thực trạng nghiên cứu - nuôi trồng vi tảo hiện nay: 1.3.1. Trên thế giới:Tảo được trồng đại trà ở các nước trên thế giới từ những năm 1972, các nước sản xuất vi tảo chủ yếu tập trung ở Châu Á và vành đai Thái Bình Dương. Những khu vực và vùng lãnh thổ có sản lượng vi tảo lớn là Trung Quốc, Nhật Bản, Đài Loan, Hàn Quốc, Thái Lan, Isarel, Hoa Kỳ, Mexico… Nhiều nhất là ở Mexico và Mỹ, nơi sản xuất tảo lớn nhất là ở Hawaii (khoảng 25 ha) và mới đây là Trung Quốc (16 ha). Trên thế giới còn có các trang trại nuôi trồng tảo với quy mô lớn, chất lượng cao như: Trang trại Twin Tauong (Myanmar) - Trang trại Sosa Texcoco (Mehico) - Công ty tảo Siam (Thái Lan) - Trang trại Chenhai (Trung Quốc) - Nông trại Hawai (HoaKỳ)…Tảo Spirulina được sử dụng như thực phẩm dinh dưỡng ở hơn 70 quốc gia trên thế giới. Người ta chỉ ra rằng ở hơn 30 trung tâm dinh dưỡng và bệnh viện ở các nước đang phát triển đã sử dụng chế phẩm từ tảo Spirulina làm thức ăn với hàm lượng 10g/ngày, kết quả cho thấy các bệnh nhân hồi phục trạng thái suy dinh dưỡng chỉ sau 1- 3 tuần lễ. Hiện có hơn 1000 bài báo khoa học được xuất bản đề cập đến hiệu quả sinh học của loài tảo này [40].1.3.2. Ở Việt Nam:Việt Nam có lợi thế là nước nhiệt đới, khí hậu nóng ẩm rất thuận lợi cho sự phát triển của vi sinh vật, nhất là tảo ngày càng phát triển. Từ năm 1972 các nhà khoa học bắt đầu đặt vấn đề nghiên cứu tảo do cố GS.TSKH. Nguyễn Hữu Thước làm chủ trì. Năm 1976, việc thử nghiêm nuôi trồng tảo đã 8 [...]... Ở Vi t Nam, vi tảo lục H .pluvialis là đối tượng nghiên cứu hoàn toàn mới, chưa có công trình nào nghiên cứu đầy đủ về đối tượng này Trước tình hình đó, vi c tiến hành nghiên cứu để có thêm những hiểu biết về các đặc điểm chính trong chu trình sống cũng như một số đặc điểm sinh học của loài tảo H pluvialis là rất cấp thiết Chính vì vậy, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài Nghiên cứu vòng đời của. .. 40 µm 3.2.2 Nghiên cứu vòng đời của Haematococcus pluvialis trong bình tam giác 250 ml trên môi trường C: Kết quả nghiên cứu vòng đời tự nhiên của vi tảo lục H pluvialis nuôi trong bình tam giác 250ml trên môi trường C được thể hiện ở hình 7, hình 8 và bảng 4, bảng 5 Hình 7: Mật độ tế bào của H pluvialis nuôi ở bình tam giác 250ml trong môi trường C 30 Bảng 4: Mật độ tế bào trung bình trong môi trường... nghiên cứu đề tài Nghiên cứu vòng đời của vi tảo lục Haematococcus pluvialis trong điều kiện phòng thí nghiệm PHẦN 2 VẬT LIỆU NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu 2.1.1 Chủng giống Chủng tảo Heamatococus pluvialis Flotow (H pluvialis) phân lập tại Hoà Bình, năm 2009 được nuôi cấy và lưu giữ trên môi trường C tại phòng 16 Công nghệ Tảo, Vi n Công nghệ sinh học ở 250C, dưới cường... TB sinh dưỡng này vẫn chỉ chứa sắc tố màu đỏ trong phần nội chất Chỉ sau 15 ngày nuôi cấy trong môi trường mới, các TB mới có màu xanh hoàn toàn 26 3.2 Nghiên cứu vòng đời của H pluvialis trong bình tam giác 250 ml: Nghiên cứu vòng đời của H pluvialis là một trong những nghiên cứu hết sức quan trọng, quyết định thành công trong công nghệ nuôi trồng loài vi tảo này trên quy mô lớn Khi chúng ta đã nắm... nhiên ở Vi t Nam chưa có một cơ sở hay một công trình công bố nào nuôi trồng thành công loài vi tảo này, vì vậy chúng tôi đã thực hiện những bước đi đầu tiên trong công nghệ nuôi trồng H pluvialis nhằm thu được những lợi ích mà nó mang lại 3.2.1 Nghiên cứu vòng đời của Haematococcus pluvialis trong bình tam giác 250 ml trên môi trường RM: Kết quả nghiên cứu vòng đời tự nhiên của H pluvialis trong bình... Haematococcus pluvialis trong hệ thống phân loại như sau [33]: Giới: Eukaryota Ngành: Chlorophyta 9 Lớp: Chlorophyceae Bộ: Volvocales Họ: Chlamydomonadales Chi: Haematococcus Loài: Haematococcus pluvialis 1.4.2 Đặc điểm hình thái và sự thay đổi các thành phần nội bào trong vòng đời của vi tảo lục H .pluvialis: Tảo đơn bào nước ngọt Heamatococcus pluvialis (H pluvialis) thuộc nhóm tảo lục hai roi và... Nghiên cứu sự thay đổi hình thái TB, hàm lượng sắc tố và protein nội bào trong vòng đời của Haematococcus pluvialis nuôi cấy trong điều kiện phòng thí nghiệm Nhiều công trình nghiên cứu trên thế giới về vòng đời của vi tảo H pluvialis đã chỉ ra rằng sinh trưởng của loài tảo này trải qua 4 giai đoạn với hình thái, kích thước, hàm lượng sắc tố và protein ở phần nội bào khác nhau Trong nghiên. .. giảm đi Nhiều công trình nghiên cứu trên thế giới về vòng đời của vi tảo H .pluvialis đã chỉ ra rằng sinh trưởng của loài tảo này trải qua 4 giai đoạn với hình thái, kích thước TB, hàm lượng sắc tố và protein nội bào khác nhau Theo Kobayashi và cs., [24] vòng đời của H pluvialis trải qua các giai đoạn như sau (hình 3): 11 Hình 3 Sự thay đổi hình thái trong vòng đời của H .pluvialis (I) Giai đoạn TB sinh... thông thường khác của phòng thí nghiệm phục vụ cho thí nghiệm và nghiên cứu 2.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu: - Địa điểm: Phòng công nghệ Tảo, Vi n Công nghệ Sinh học, Vi n Khoa học Công nghệ Vi t Nam - Thời gian: 23/02/2011 đến 22/05/2011 18 2.3 Phương pháp nghiên cứu: 2.3.1 Mô tả thí nghiệm vòng đời: Chủng tảo Haematoccus pluvialis được nuôi trong môi trường C khoảng 2-3 ngày, khi đó các TB chủ... và kích thước TB trong vòng đời của vi tảo H pluvialis được quan sát dưới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 400 lần 25 Như vậy, có 4 dạng hình thái TB của vi tảo H pluvialis đã quan sát được trong vòng đời của chúng Các TB sinh dưỡng hình elíp màu xanh, chuyển động được nhờ 2 roi Dạng TB này chiếm tới 90% so với tổng số TB trong 10 ngày nuôi trồng đầu tiên Kích thước TB dao động trong khoảng 13 . chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài Nghiên cứu vòng đời của vi tảo lục Haematococcus pluvialis trong điều kiện phòng thí nghiệm . PHẦN 2VẬT LIỆU. vòng đời của vi tảo lục Haematococcus pluvialis trong điều kiện phòng thí nghiệm . Công vi c được thực hiện tại phòng Công nghệ Tảo, Vi n Công