Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của loài bồ bồ ( ademosma indiana (lour.) merr.) phân bố ở địa bàn huyện Đại Từ tỉnh Thái Nguyên

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM DƢƠNG HỒNG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI BỒ BỒ (ADENOSMA INDIANA (LOUR.) MERR.) PHÂN BỐ Ở ĐỊA BÀN HUYỆN ĐẠI TỪ- TỈNH THÁI NGUYÊN LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT THÁI NGUYÊN - 2015 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn/ ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM DƢƠNG HỒNG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI BỒ BỒ (ADENOSMA INDIANA (LOUR.) MERR.) PHÂN BỐ Ở ĐỊA BÀN HUYỆN ĐẠI TỪ- TỈNH THÁI NGUYÊN Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60 44 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Nguyễn Thị Thanh Hƣơng THÁI NGUYÊN - 2015 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn/ LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết luận văn hoàn toàn trung thực chưa công bổ công trình khoa học khác Thái Nguyên, tháng năm 2015 Tác giả luận văn Dƣơng Hồng Nhung Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN i http://www.lrc-tnu.edu.vn/ LỜI CẢM ƠN Tôi xin bảy tỏ lòng biệt ơn sâu sắc tới cô giáo TS Nguyễn Thị Thanh Hương tận tình hướng dẫn, giúp đỡ hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Thạc sỹ Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, khoa Sau Đại học, khoa Hóa học trường Đại học Sư phạm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi cho trình học tập thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, cán phòng thí nghiệm Khoa Hóa học trường ĐHSP Thái Nguyên, phòng tổng hợp hữu - Viện Hóa học, Phòng nghiên cứu hoạt tính Sinh học - Viện Công nghệ Sinh học- Viện Hàn lâm Khoa học Việt Nam bạn bè đồng nghiệp giúp đỡ, tạo điều kiện cho suốt trình học tập thực luận văn Học viên Dƣơng Hồng Nhung Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN ii http://www.lrc-tnu.edu.vn/ MỤC LỤC TRANG BÌA PHỤ LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC CÁC BẢNG, SƠ ĐỒ iv DANH MỤC CÁC ẢNH, HÌNH v MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu đề tài 3 Nội dung nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Dự kiến kết đạt Dự kiến cấu trúc luận văn CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Andenosma loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 1.1.1 Tổng quan chi Adenosma (Họ Scrophulariaceae) 1.1.2 Đặc điểm thực vật loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 1.1.2.1 Tên khoa học 1.1.2.2 Đặc điểm thực vật phân bố tự nhiên 1.1.3 Đặc điểm thực vật loài Adenosma caeruleum R Br 1.1.3.1 Tên khoa học 10 1.1.3.2 Đặc điểm thực vật phân bố tự nhiên 10 1.2 Tình hình nghiên cứu thành phần hóa học số loài thuộc chi Adenosma 11 1.2.1 Nghiên cứu loài Adenosma caeruleum R.Br 12 1.2.2 Nghiên cứu loài Adenosma bracteosa Bonati 12 1.2.3 Nghiên cứu loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 12 1.3 Axit betulinic số dẫn xuất axit betulinic 22 1.3.1 Axit betulinic 22 1.3 Một số dẫn xuất axit betulinic 23 1.4 Hoạt tính sinh học số loài thuộc chi Adenosma 25 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN iii http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 1.5 Tác dụng dược lý số loài thuộc chi Adenosma Việt Nam 25 1.5.1 Tác dụng dược lý loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 25 1.5.2 Tác dụng dược lý loài Adenosma caeruleum R Br 27 1.5.3 Tác dụng dược lý loài Adenosma bracteosum Bonati 27 CHƢƠNG : THỰC NGHIỆM 28 2.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.2 Hóa chất, thiết bị 28 2.2.1 Hóa chất 28 2.2.1.1 Hóa chất dùng để phân lập chất từ phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 28 2.2.1.2 Hóa chất dùng để thử hoạt tính sinh học từ phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 28 2.2.2 Thiết bị 29 2.3 Phương pháp nghiên cứu xác định phân bố loài chi Adenosma địa bàn huyện Đại Từ- tỉnh Thái Nguyên 29 2.4 Phương pháp xử lý mẫu thực vật, chiết tách xác định cấu trúc chất phân lập 29 2.4.2 Chiết tách chất 30 2.4.3 Xác định cấu trúc chất 30 2.5 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học từ dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi dạng khô 30 2.5.1 Xác định khả ức chế peroxy hoá lipid (thử nghiệm MDA) 30 2.5.2 Xác định khả ức chế α-glucoside 30 2.6 Thực nghiệm 31 2.6.1 Quá trình phân lập chất từ phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 31 2.6.1.1 Chiết, tách mẫu phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 31 2.6.1.2 Phân lập chất từ cặn chiết etyl axetat 31 2.6.2.1 Chất AC4: 2-(4’-hydroxyphenyl)etyl triacontanoat 33 2.6.2.2 Chất AC1: Axit betulinic 33 2.6.2.3 Chất AC9: β-sitosterol-3-O- β-D-glucopyranosid (β-sitosterol glucosid) 33 2.6.3 Xác định khả ức chế peroxy hoá lipid (thử nghiệm MDA) 34 2.6.4 Xác định khả ức chế α-glucoside 35 2.7 Phương pháp xử lí số liệu 35 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN iv http://www.lrc-tnu.edu.vn/ CHƢƠNG : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 37 3.1 Xác định phân bố loài thuộc chi Adenosma huyện Đại Từtỉnh Thái nguyên 37 3.2 Phân lập chất từ cặn chiết etyl axetat phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 37 3.3 Xác định cấu trúc chất tách 38 3.3.1 Chất AC4 : 2-(4’-hydroxyphenyl)etyl triacontanoat 38 3.3.1.1 Phân tích phổ khối HR-ESI-MS 38 3.3.1.2 Phân tích phổ 1H-NMR (CDCl3, δH ppm) 39 3.1.3.3 Phân tích phổ 13C-NMR DEPT (CDCl3, δC ppm) 40 3.3.2 Chất AC1: Axit betulinic ( axit (3β)-3-Hydroxy-lup-20(29)-en-28-oic) 42 3.3.2.1 Phân tích phổ 1H-NMR (CDCl3, δH ppm) 42 3.3.2.2 Phổ 13C-NMR DEPT (CDCl3, δC ppm) 43 3.3.3 Chất AC9: β-sitosterol-3-O-β–D-glucopyranosid (β-sitosterol glucosid) 47 3.3.3.1 Phân tích phổ 1H-NMR (DMSO-d6, δH ppm) chất AC9 47 3.3.3.2 Phân tích phổ 13C-NMR DEPT (DMSO-d6, δC ppm) 48 3.4 Kết thử hoạt tính sinh học từ dịch chiết nước thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 51 3.4.1 Kết xác định khả ức chế peroxy hoá lipid (thử nghiệm MDA) 51 3.4.1.1 Chuẩn bị mẫu thử cách xác định giá trị IC50 51 3.4.1.2 Khả ức chế peroxy hoá lipid (thử nghiệm MDA) dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi dạng khô 52 3.4.2 Kết nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α- glucosidase dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng khô 55 3.4.2.1 Chuẩn bị mẫu thử cách xác định giá trị IC50 55 3.4.2.2 Khả ức chế enzyme α-glucoside dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng khô 56 3.4.3 Kết luận hoạt tính sinh học dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 57 KẾT LUẬN 58 KIẾN NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN v http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT AC1 Axit betulinic AC4 2-(4’-hydroxyphenyl)etyl triacontanoat AC9 β-sitosterol-3-O- β –D-glucopyranosid (β-sitosterol glucosid) 13 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân nguyên tử 13C C-NMR DEPT Phổ DEPT DMSO Dimetylsulfoside GC-MS Sắc ký khí khối phổ Phổ cộng hưởng từ hạt nhân nguyên tử 1H H-NMR HR-ESI-MS Phổ khối phân giải cao HTCO Hoạt tính chống oxi hoá IC50 Nồng độ gây tác động sinh học cho 50% mẫu thử nghiệm MDA Malonyl diandehit MT-4 Tế bào HIV ODC Mật độ quang học dung môi ODT Mật độ quang học mẫu thử pNPG p-nitrophenyl-α-D-glucopyranozit SKC Sắc ký cột SK-MEL-2 Tế bào ung thư hắc tố TCA Axit tricloaxetic TBA Axit thiobarbituric Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN iv http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC BẢNG, SƠ ĐỒ Bảng 1.1 Các thành phần hóa học tinh dầu từ phận mặt đất loài Adenosma indiana (Lour ) Merr 15 Bảng 1.2 Các thành phần hóa học thành phần dễ bay từ loài Adenosma indiana (Lour ) Merr 18 Bảng 1.3 Các thành phần dễ bay chiếm tỉ lệ lớn loài Adenosma indiana (Lour ) Merr 20 Bảng 1.4 Khả gây độc tế bào số loại ung thư người axit betulinic 23 Bảng 3.1 Số liệu phổ 1H-NMR chất AC4 2-(4’-hydroxyphenyl) etyl triacontanoat 39 Bảng 3.2 Số liệu phổ 13C-NMR chất AC4 2-(4’-hydroxyphenyl)etyl triacontanoat 40 Bảng 3.3 Số liệu phổ 1H-NMR chất AC1 axit betulinic 42 Bảng 3.4 Số liệu phổ 13C-NMR chất AC1 axit betulinic 43 Bảng 3.5 Số liệu phổ 1H-NMR chất AC9 47 Bảng 3.6 Số liệu phổ 13C-NMR chất AC9 48 Bảng 3.7 Kết xác định khả ức chế peroxy hoá lipid dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi dạng khô 53 Bảng 3.8 Kết xác định khả ức chế enzyme α-glucoside dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng khô 56 Sơ đồ 2.1: Sơ đồ chiết, tách chất từ phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 28 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN v http://www.lrc-tnu.edu.vn/ DANH MỤC CÁC ẢNH, HÌNH Hình 1.1 Lá loài Adenosma indiana (Lour.) Merr Hình 1.2 Bụi loài Adenosma indiana (Lour.) Merr Hình 1.3 Hình vẽ mô tả loài Adenosma indiana (Lour.) Merr Hình1.4 Hoa loài Adenosma indiana (Lour.) Merr Hình 1.5 Thân, lá, hoa loài Adenosma caeruleum R Br mọc tự nhiên huyện Đại Từ 10 Hình 1.6 Bụi loài Adenosma caeruleum R Br mọc tự nhiên huyện Đại Từ 10 Hình 1.7 Các chất phân lập từ dịch chiết clorofom loài Adenosma caeruleum R.Br 14 Hình 1.8 Các chất phân lập từ dịch chiết n-hexan etyl axetat từ phần mặt đất loài Adenosma indiana (Lour.) Merr 15 Hình 1.9: Công thức cấu tạo axit betulinic 22 Hình 1.10 Một số dẫn xuất axit betulinic có hoạt tính độc tế bào ung thư ức chế tế bào HIV 24 Hình 3.1 Phổ HR-ESI-MS chất AC4 38 Hình 3.2 Phổ 1H–NMR chất AC4 39 Hình 3.3 Phổ 13C-NMR chất AC4 41 Hình 3.4 Phổ 13C-NMR DEPT chất AC4 41 Hình 3.5 Công thức cấu tạo chất AC4 42 Hình 3.6 Phổ 1H–NMR chất AC1 43 Hình 3.7 Phổ 13C-NMR chất AC1 45 Hình 3.8 Phổ 13C-NMR DEPT chất AC1 46 Hình 3.9 Công thức cấu tạo chất AC1: (3β)-3-hydroxy-lup-20(29)-en-28-oic 46 Hình 3.10 Phổ 1H–NMR chất AC9 48 Hình 3.11 Phổ 13C-NMR chất AC9 49 Hình 3.12 Phổ 13C-NMR DEPT chất AC9 50 Hình 3.13 Công thức cấu tạo chất AC9 51 Hình 3.14 MDA dịch chiết nước phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr (Bồ bồ) dạng tươi dạng khô 54 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN vi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Hình P7 phổ 13C DEPT chất AC4 Hình P8 Phổ 1H chất AC1 Hình P9 Phổ 1H chất AC1 Hình P10 Phổ 1H chất AC1 Hình P11 Phổ 13C chất AC1 Hình P12 Phổ 13C chất AC1 Hình P13 Phổ 1H chất AC9 Hình P14 Phổ 1H chất AC9 Hình P15 Phổ 1H chất AC9 Hình P16 Phổ 13C chất AC9 Hình P17 Phổ 13C chất AC9 Hình P18 Phổ 13C chất AC9 Hình P19 Phổ 13C DEPTcủa chất AC9 Hình P20 Phổ 13C DEPTcủa chất AC9 Hình P21 Phổ 13C DEPTcủa chất AC9 [...]... http://www.lrc-tnu.edu.vn/ "Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của loài Bồ bồ Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố ở địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên. " 2 Mục tiêu của đề tài - Khẳng định sự phân bố của các loài thuộc chi Adenosma R.Br trên địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Khảo sát thành phần hóa học trong cặn chiết etyl axetat phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố trên địa. .. của loài Adenosma indiana (Lour.) Mer phân bố trên địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên 3 Nội dung nghiên cứu - Tiến hành thực địa khảo sát sự phân bố của các loài thuộc chi Adenosma R.Br phân bố trên địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Bằng các phép phân tích hóa học xác định thành phần hóa học trong cặn chiết etyl axetat phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố trên địa bàn. .. phân bố của các loài thuộc chi Adenosma R.Br trên địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Thành phần hóa học trong cặn chiết etyl axetat phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố trên địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Đánh giá hoạt tính chống oxi hóa và hoạt tính ức chế enzyme αglucosidase của dịch chiết nước của thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô 6... thực phẩm [50] Từ lâu nhân dân huyện Đại Từ mới chỉ sử dụng Adenosma indiana (Lour.) Merr trên địa bàn như một loài cây có tính thanh nhiệt, giải độc mà chưa có nghiên cứu nào bài bản về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố ở địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên Căn cứ các lý do trên, chúng tôi đã lựa chọn đề tài: Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - ĐHTN... thành phần hóa học của mẫu - Sử dụng các phương pháp phổ để xác định thành phần hóa học của mẫu - Khảo sát hoạt tính chống oxi hóa của dịch chiết nước phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô - Nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α- glucosidase của dịch chiết nước phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô 5 Dự kiến kết quả đạt đƣợc - Sự phân bố của. .. địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Bằng phép thử chống lipit hóa màng tề bào xác định hoạt tính chống oxi hóa của dịch chiết nước phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô - Nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α- glucosidase của dịch chiết nước phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô 4 Phƣơng pháp nghiên cứu Số hóa bởi Trung tâm Học liệu... địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Xác định hoạt tính chống oxi hóa của dịch chiết nước phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô Trong phép thử chống lipit hóa màng tế bào - Nghiên cứu hoạt tính ức chế enzyme α- glucosidase của dịch chiết nước phần thân của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dạng tươi và dạng khô - Định hướng về việc sử dụng các các chế phẩm từ phần. .. chất polyphenol và cumarin [6] Thành phần hóa học của loài Adenosma bracteosum Bonati mới chỉ dừng lại ở nghiên cứu về thành phần tinh dầu của loài này [46] 1.2.3 Nghiên cứu về loài Adenosma indiana (Lour.) Merr Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - ĐHTN 12 http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Năm 1939 F Guichard và J Clemensat phân tích loài Adenosma indiana (Lour.) Merr dưới định danh Nhân trần và thấy 1,67% kali... O (4 ) (5 ) OH OH (6 ) HO O OH HO O OH O OH (7 ) Hình 1.7 Các chất phân lập được từ dịch chiết clorofom của loài Adenosma caeruleum R.Br ( ) ( ) ( ) Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - ĐHTN 14 http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Hình 1.8 Các chất phân lập được từ dịch chiết n-hexan và etyl axetat từ phần trên mặt đất của loài Adenosma indiana (Lour.) Merr Từ dịch chiết n-hexan và etyl axetat từ phần trên mặt đất của. .. phổ biến ở các vùng trung du và miền núi Việt Nam, dùng để làm thuốc và chế biến nước uống quen thuộc có tính chất Số hóa bởi Trung tâm Học liệu - ĐHTN 1 http://www.lrc-tnu.edu.vn/ bản địa ở Việt Nam và nhiều nước châu Á từ bao đời nay Dịch chiết từ phần thân và lá loài Adenosma indiana (Lour.) Merr.; có hoạt tính sinh học rất cao, qua các nghiên cứu khoa học của y học hiện đại, dựa trên nguồn gốc là ...ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM DƢƠNG HỒNG NHUNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI BỒ BỒ (ADENOSMA INDIANA (LOUR.) MERR.) PHÂN BỐ Ở ĐỊA BÀN HUYỆN ĐẠI TỪ-... dân huyện Đại Từ sử dụng Adenosma indiana (Lour.) Merr địa bàn loài có tính nhiệt, giải độc mà chưa có nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học loài Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố. .. địa bàn huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên - Bằng phép phân tích hóa học xác định thành phần hóa học cặn chiết etyl axetat phần thân loài Adenosma indiana (Lour.) Merr phân bố địa bàn huyện Đại Từ