- Gồm 3 khâu
- ADN dùng để chuyển gen gọi là thể truyền
- Véc tơ chuyển gen: là phân tử ADN cĩ khả năng tự nhân đơi và tồn tại độc lập trong tế bào và mang được gen cần chuyển
- Thể truyền thường dùng là ADN plasmit hoặc thể thực khuẩn
1. Tạo ADN tái tổ hợp
- Kĩ thuật tạo ADN tái tổ hợp
+ Tách ADN của tb cho và tb nhận ra khỏi tb. + Dùng enzim căt và nối ADN của tb cho vào ADN nhận tạo ADN tái tổ hợp
- Sự khác nhau khi dùng thể truyền là plasmit và thể thực khuẩn:
+ Thể truyền là plasmit: là ADN vịng, đầu đính so le
+ Thể truyền là thể thực khuẩn: ADN thẳng, đầu đính bằng
- Enzim cắt (restrictaza): tìm và cắt ở những liên kết xác định trên ADN
- Enzim nối (ligaza): nối ADN của tb cho vào thể truyền
2. Chuyển ADN tái tổ hợp vào tế bào nhận:
- Phương pháp biến nạp: + Dùng muối CaCl2
+ Dùng xung điện cao áp + Vi tiêm gen ...
- Phương pháp tải nạp: + Vi rút lây nhiễm vi khuẩn + Thể thực khuẩn kí sinh vi khuẩn
3. Tách dịng tế bào chứa ADN tái tổ hợp
- Để nhận biết tế bào vi khuẩn đã nhận được ADN tái tổ hợp phải chọn thể chuyền cĩ dấu chuẩn hoặc gen đánh dấu
- Ví dụ: dấu chuẩn là gen kháng khánh sinh, khi bổ sung vào mơi trường nuơi cấy kháng sinh thì tb khơng chứa ADN tái tổ hợp sẽ chết
Hoạt động 3: Tìm hiểu về Thành tựu ứng dụng cơng nghệ gen
- Gv giới thiệu H25.3 sgk, nêu các thành tựu chuyển gen?
- HS n/c mục III để trả lời câu hỏi. - GV nhận xét, kết luận.