3. Những đóng góp mới của đề tài
3.3.2.5. Lựa chọn nguồn nitơ bổ sung
Các nguồn nitơ khác nhau đư ợc sử dụng trong thí nghiệm gồm: Nitrate, ure, nitrite, ammonium, cao thi ̣t và cao men. Bình nuôi cấy được ủ ở 400C, trong 3 ngày. Thu dịch enzyme và xác đ ịnh hoa ̣t đ ộ xylanase. Kết quả đư ợc thể hiện trong hình 3.13 :
69
Hình 3.13. Nguồn nitơ bổ sung thích hợp cho khả năng tổng hợp xylanase của chủng B2H2 và chủng 118
Từ hình 3.13 ta thấy, việc bổ sung thêm nguồn nitơ có ảnh hưởng rõ rệt đến khả năng sinh trưởng và tổng hợp enzyme xylanase. So sánh với mẫu đối chứng (mẫu không bổ sung thêm nguồn nitơ), đối với chủng vi khuẩn B2H2, tất cả các nguồn nitơ vô cơ như nitrat, nitrit, (NH4)2SO4 đều làm giảm khả năng sinh xylanase ; ngược lại, hầu hết nguồn nitơ hữu cơ peptone, cao thịt, cao men được chọn nghiên cứu (ngoại trừ ure) đều tăng cường khả năng sinh xylanase của chủng (tăng khoảng 18%). Trong các nguồn nitơ được chọn thì cao thịt giúp tăng khả năng tổng hợp enzyme xylanase cao nhất , tiếp đó là cao men; Nitrat và nitrit ức chế mạnh nhất khả năng sinh trưởng và sinh enzyme của chủng này.
Đối với chủng xạ khuẩn 118, khả năng tổng hợp xylanase không chênh lệch nhiều khi bổ sung thêm các nguồn nitơ khác nhau vào cơ chất nuôi cấy. Các nguồn nitơ tăng cường khả năng sinh xylanase của chủng 118 là (NH4)2SO4, cao men, pepton và ure. Hoạt độ xylanase đạt được cao nhất khi bổ sung nguồn nitơ là urê (tăng 20%), tiếp đó là cao thịt (tăng 19%); Tuy nhiên, khi bổ sung 4% các nguồn nitơ khác như nitrat, nitrit, cao thịt thì hoạt độ xylanase đều bị giảm, khoảng 15%.
Tiếp tục thí nghiệm với cao thịt. Bổ sung cao thịt vào cơ chất nuôi cấy chủng B2H2 với tỷ lệ lần lượt là: 1, 2, 4, 6, 8 và 10% theo khối lượng. Sau 3 ngày, tiến hành thu dịch enzyme và xác định hoạt độ enzyme. Kết quả thu được như sau:
70
Hình 3.14. Mức độ ảnh hưởng của cao thịt đến khả năng tổng hợp xylanase của chủng B2H2
Như vậy, khi bổ sung 4% cao thịt vào cơ chất nuôi cấy, hoạt độ xylanasethu được tăng 18% so với ban đầu. Với lượng cao thịt bổ sung ít hơn hoặc nhiều hơn 4%, hoạt độ xylanase của chủng sẽ giảm.
Hình 3.15. Mức độ ảnh hưởng của urea đến khả năng tổng hợp xylanase của chủng 118
Tiếp tục thí nghiệm với urea. Bổ sung urea vào cơ chất nuôi cấy chủng 118 với tỷ lệ lần lượt là: 1, 2, 4, 6, 8 và 10% theo khối lượng. Sau đó thu dịch và tiến
71
hành xác định hoạt độ xylanase. Theo kết quả trong hình 3.15, với lượng urea bổ sung là 4% thì hoạt độ xylanase do chủng 118 tạo ra tăng lên 16%. Tiếp tục tăng lượng urea thêm vào thì hoạt độ xylanase của chủng 118 sẽ giảm dần.