CHƯƠNG 2: PHÂN TÍCH CÂY TRỒNG
2.4.2 Xácđịnh nitơ protein trong thực vật
Phần lớn nitơ của thực vật là nitơ protein. Hàm lượng N protein đánh giá chất lượng sản phẩm và nó thay đổi phụ thuộc vào nhiều nhân tố như đặc điểm sinh học của cây, điều kiện khí hậu, đất, chế độ phân bón, nhất là phân nitơ. Hàm lượng protein gạo được coi là tiêu chuẩn gạo xuất khẩu.
Nguyên tắc của phương pháp: dựa trên cơ sở tách và kết tủa n protein, phần N không phải protein hòa tan trong dung dịch được rửa bằng nước hay dung dịch loãng dùng kết tủa. Phần n protein kết tủa được rửa, sấy khô và đốt như như khi phân tích nitơ tổng.
Kết tủa protein từ dung dịch bằng chì acetat, đồng sunfat, natri sunfosalisilic, axit tri cloacetic và axit photphovolphramic.
* Xác định N protein theo Banstein:
Cân 0,3-0,5 gam mẫu thực vật đã nghiền nhỏ cho vào cốc dung tích 150ml cho tiếp vào đó 50ml nước, trộn đều bằng đũa thủy tinh (để trong cốc cho tới khi cuối phân tích).
Đun cốc chứa nguyên liệu tới khi sôi.
Nguyên liệu giàu tinh bột thì đun trên bình cách thủy.
Khi cốc nguội,vừa khuấy vừa cho cẩn thận vào cốc 12,5ml dung dịch đồng sunfat. Sau đó thêm vào 12,5 ml dung dịch kiềm. Protein sẽ dược kết tủa nhanh. Để yên 1 giờ, lọc qua giấy lọc nhanh.
Rửa kết tủa trên giấy lọc , cốc, đũa mhieeuf lần. Rửa kết tủa có thể rất khó khi nguyên liệu giàu tinh bột, vì vậy có thể lọc qua phễu Bucner. Quá trình kết tủa kết thúc khi dịch rửa không có phản ứng với BaCl2.
Kết tủa sạch sấy khô ở 50-600C trong 1 giờ, sấy để cho giấy lọc tách khỏi phễu. Gói kết tủa protein cho vào bình Kenđan Thêm 10-20ml H2SO4 đặc, nếu lượng axit chưa ngập thì có thể thêm 5-7ml nữa. Thêm xúc tác (0,5-1g). Tro hóa mẫu trên bếp điện cho đến khi dung dịch trong bình Kenđan trắng. Rồi xác định N như mục 2.4.1.