Trình tự phân tích:
- Tách photphat di động (chiết rút bằng NH4Cl 1N): 1g đất lắc 30 phút với 25ml NH4Cl 1N trong ống nghiệm li tâm 50ml.
Li tâm trên máy trong 10 phút ở vận tốc 3000 vòng/phút.
Gạn hết nước vào bình khác (không được mất đất), rồi lấy 10ml dịch chiết này xác định P theo phương pháp so màu xanh molipđen.
- Tách photphat nhôm (Al-P) bằng NH4F 0,5N, pH = 8,5:
Cho 25ml NH4F 0,5N vào ống nghiệm li tâm chứa đất sau khi xử lí bằng NH4Cl. Nút kín, lắc 1 giờ rồi li tâm như trên.
Gạn phần nước trong sang bình khác, dịch này cần cho vào 0,15 – 0,25g than hoạt tính không P lắc đều để yên 15-20 phút để khử màu.
Lọc vào bình polietilen (để tránh tác dụng hòa tan silic của F- ảnh hưởng đến quá trình so màu). Dịch lọc này đêm xác định P : Lấy 10ml dịch lọc vào bình định mức 50ml, thêm nước cất đến 2/3 bình + 10ml H3BO3 0,8M để liên kết với F- ở dạng NH4[ ]BF4
, rồi tiến hành hiện màu xanh molipđen.
Cho vào ống li tâm sau khi tách Al-P 25ml NaCl bão hòa, lắc 15 phút. Li tâm trên máy rồi gạn bỏ dịch chiết (để tách NH4F dư).
Cho vào 25ml NaOH 0,1N , lắc 2 giờ. Để yên 18-20 giờ. Quay li tâm trên máy . Rót nước trong sang bình khác, cho vào dịch chiết này 1 giọt H2SO4 đặc; 0,15 – 0,25g than hoạt tính. Lắc đều rồi để yên 10-20 phút rồi lọc. Lấy 10ml dịch lọc vào bình định mức 50ml, thêm nước, trung hòa rồi đem hiện màu xác định photpho .
- Tách photphat canxi (Ca-P) bằng H2SO4 0,5N:
Rửa đất sau khi xử lí bằng NaOH, bằng 25ml NaCl bão hòa như phần trên. Cho vào 25ml H2SO4 0,5N rồi lắc 1 giờ li tâm như trên.
Rót phần nước trong ra , lấy 10ml để xác định photpho.
Kết quả xác định các nhóm photphat được biểu thị bằng mg P2O5/100g đất, hoặc % so với photpho tổng số.