II. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
b. Tiến hành nghiên cứu
Thực hành can thiệp: 17 ngày
Nhóm 1: Chuột suy dinh dưỡng được nuôi bằng sữa cơng thức 1. Nhóm 2: Chuột suy dinh dưỡng được ni bằng sữa cơng thức 2. Nhóm 3: Chuột suy dinh dưỡng được nuôi bằng Isocal.
Nhóm 4: Chuột suy dinh dưỡng được nuôi bằng thức ăn viên và uống nước tự do Nhóm 5: Chuột khỏe hay chuột không suy dinh dưỡng được nuôi bằng thức ăn
viên và uống nước tự do
Đánh giá hiệu quả cải thiện dinh dưỡng
o Prealbumin/huyết thanh tại 3 thời điểm: ngay khi bắt đầu nuôi bù ngày 1, ngày 7 và ngày 14. Prealbumin làm bằng kỷ thuật immuno-turbidimetric test OSR6175 của công ty Olympus Life and Material Science Europa, Germany từ 300 l máu đuôi chuột,
chống đông bằng EDTA tại công ty Melatec.
o Protein efficiency ratio (Sarwar 1994):
PER= Thay đổi cân nặng của chuột (g) Tổng lượng đạm ăn (g)
66
Chuột: cân chuột mỗi ngày, 5 nhóm.
Thực phẩm: cân lượng sữa uống được của 3 nhóm can thiệp.
Đánh giá tình trạng tiêu chảy: tính chất phân được theo dõi trong 14 ngày can thiệp. Đánh giá sự an toàn của probiotic
Phương pháp: Cấy máu
Thời điểm: Ngày 17, ngay khi giết chuột.
Quy trình cấy: Một mi-li-lít máu được rút từ tim vào ngày giết chuột, cho vào mơi trường BHI (Beef- Heart- Infusion) có thêm Thioglycolat, L -cystein dùng cho vi khuẩn yếm khí và Polyanethol Sulfonat để kháng đơng. Mẫu máu cấy được theo dõi mỗi ngày trong 5-7 ngày, nếu có mọc sẽ được định danh 3 probiotics là Lactobacillus
acidophilus, Bifidobacterium longum, Streptococcus faecalis theo phân loại Bergey
1984.
Nơi thực hiện: công ty Melatec
SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU
c.
Prealbumin
3 ngày 14 ngày 17 ngày
G/đ1a Xác định lượng ăn trung bình . G/đ1b:
Tạo chuột suy dinh dưỡng bằng cách cho ăn 25% lượng trung bình (Giảm 25% cân so với nhóm chứng)
Ngày 1 Ngày 7 Ngày14 Ngày17
G/đ2:
Nuôi phục hồi dinh dưỡng: chuột suy dinh dưỡng
Nhóm 1: Sữa đậu nành + 6,2% sữa bột + probiotics (cơng thức 1).
Nhóm 2: Sữa đậu nành + 8,6% sữa bột + probiotics (công thức 2)
Nhóm 3: Isocal (78% casein+22% đạm đậu nành) Nhóm 4: Thức ăn viên.
Nhóm chứng: chuột bình thường
Nhóm 5: Thức ăn viên.
Lƣu đồ 1. Quy trình thử nghiệm khảo sát hiệu quả cải thiện tình trạng dinh dưỡng ở chuột suy dinh dưỡng trung bình của sữa cơng thức 1 và 2 và probiotics so với Isocal và sự an toàn của probiotics trên chuột suy dinh dưỡng trung bình
67