Thêm 1µL thuốc thử Modifier vào mỗi 10µL kháng thể cần dán nhãn, trộn nhẹ. Mở nắp lọ AP Mix và dùng pipet lấy mẫu kháng thể (đã thêm thuốc thử Modifier)
trực tiếp vào vật liệu đông khô. Trộn lại nhẹ nhàng bằng cách rút và nhả lại dung dịch một hoặc hai lần bằng pipet.
Đậy nắp lọ lại và để yên trong 3 giờ trong bóng tối trong tủ ổn nhiệt ở 22oC. Theo khuyến cáo của hãng, cũng có thể ủ mẫu cũng có thể cài đặt và để qua đêm; thời gian ủ lâu hơn không ảnh hưởng tiêu cực đến kết quả.
Sau khi ủ trong 3 giờ (hoặc hơn), thêm 1µL thuốc thử Quencher cho mỗi 10µL kháng thể được sử dụng và trộn nhẹ nhàng. Các phức hợp có thể được sử dụng sau 30 phút mà không cần lọc lại.
Điều kiện nhiệt độ để lưu trữ được khuyến nghị ở 4°C cho bất kỳ phức hợp nào. Cần thêm chất bảo quản nếu muốn bảo quản các kháng thể đã dán nhãn lâu dài.
2.3.5 Hóa chất dùng cho thử nghiệm chế tạo que thử
Bảng 2. 11 Các hóa chất dùng cho thử nghiệm chế tạo que thử
Tên Cơng thức/kí
hiệu Xuất xứ Mục đích sử dụng
Human chorionic
gonadotropin HCG Sigma
Thử nghiệm khả năng tạo màu ở vị trí test line với hCG ở các nồng độ khác
nhau hCG beta-1 Monoclonal
Antibody (INN-HCG-2) β1- mAb Invitrogen hCG beta-4 Monoclonal
Antibody (INN-HCG-24) β4-mAb Invitrogen
Gold Conjugation Kit AuNPs Abcam Gắn nano vàng cho kháng thể β4-mAb
Hydrochloric acid HCl Điều chỉnh pH
Boric Acid H3BO3 Sigma
Pha đệm borate
Natri Hydroxit NaOH Sigma
Sucrose C12H22O11 Sigma Pha dung dịch xử lý
conjugate pad và sample pad
Tween 20 C58H114O26 Sigma
Sodium phosphate
dibasic Na2HPO4 Sigma
Pha đệm PBS Potassium phosphate
monobasic KH2PO4 Sigma
Potassium chloride KCl Sigma
Sodium chloride NaCl Sigma
BSA- Bovine Serum
Albumin BSA Sigma
Pha dung dịch blocking BSA 3%
Sodium Azide NaN3 Sigma Bảo quản dung dịch
blocking BSA 3% Sodium Dodecyl Sulfate SDS Sigma Pha dung dịch rửa màng
EMP Millipore Merck Làm conjugate pad
Cellulose fiber Sample
Pad Absorbant Merck
Tấm hút định hướng dòng chảy
2.4 Thiết bị và dụng cụ sử dụng
Thiết bị điện di Mini Gel Tank, Invitrogen.