.12 Kết quả khảo sát nồng độ của mAb – β4 bằng Sandwich ELISA

Một phần của tài liệu Đánh giá khả năng liên kết β HCG (β subunit of human chorionic gonadotropin) và một số kháng thể thương mại đặc hiệu (Trang 98 - 99)

Kết quả thí nghiệm của cặp kháng thể β4 – β2(ALP) cho thấy tín hiệu ổn định hơn so với cặp β2 – β1(ALP), tuy nhiên tín hiệu vẫn tương đối thấp ở tất cả các tỉ lệ. Điều này cũng phù hợp với các nghiên cứu đây cho thấy rằng β2 và β4 hoạt động không nhạy bằng β1 và do vị trí bắt cặp của chúng gần nhau về mặt không gian[3], nên khi kết hợp lại với nhau thì cả 2 kháng thể này đều cho ra một kết quả khơng tốt bằng khi có mặt β1.

Như vậy, thí nghiệm này đã cho thấy việc kết hợp kháng thể β1 và β2 là không hiệu quả. Cặp β4 – β2 cũng không mang lại kết quả khả quan. Vì vậy, có thể kết luận rằng trong 3 loại kháng thể khảo sát β2 là kháng thể hoạt động kém hiệu quả nhất.

3.5 Kiểm tra tính khả thi của cặp kháng thể

Mục đích của thí nghiệm này nhằm xác định nồng độ tối ưu của các kháng thể dán nhãn ALP được sử dụng làm kháng thể phát hiện trong phản ứng sandwich ELISA. Kháng thể bắt giữa sẽ được gắn vào giếng với nồng độ cố định 4.000 ng/mL. Sau đó, kháng nguyên hCG sẽ được thêm vào với các nồng độ 0, 100, 250, 500, 1.000, 2.500, 5.000, 10.000 (mIU/mL). Kháng thể phát hiện là mAb-β1-ALP, mAb-β2-ALP, mAb-β4- ALP với các nồng độ là 0, 100, 500, 1.000, 2.000, 4.000 và 5.000 (ng/mL). Thí nghiệm được lặp lại 3 lần.

Tương tự thí nghiệm 4, thí nghiệm này các yếu tố thay đổi sẽ nằm phía trên hCG (hay kháng thể phát hiện), vì vậy, cần đủ cả 3 loại kháng thể đang khảo sát β1, β2 và β4. Ở thí nghiệm này sẽ tập trung vào cặp β1- β4(ALP) và β4 – β1(ALP). Như vậy, sau 2 thí nghiệm, sẽ cho ra được kết quả β1 sẽ kết hợp với kháng thể nào hiệu quả hơn.

Một phần của tài liệu Đánh giá khả năng liên kết β HCG (β subunit of human chorionic gonadotropin) và một số kháng thể thương mại đặc hiệu (Trang 98 - 99)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(137 trang)