CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.7 Cố định kháng thể lên màng nitrocellulose bằng in phun
Thí nghiệm này được tiến hành tương tự như đã mô tả trong phần 2.5.7, với sự khác biệt đến từ việc kháng thể sẽ được dùng máy in phun để cố định các kháng thể lên màng thay vì dùng micropipette.
Que thử LFA có sử dụng in phun nano này chỉ in phun kháng thể tạo vùng kiểm tra (test line), sau khi thử nghiệm trong mẫu hCG sẽ được cắt bỏ các phần khác chỉ để lại phần màng nitrocellulose. Kết quả như hình 3.17.
Hình 3. 17 Kết quả thử nghiệm que thử LFA có in phun nano
Từ hình 3.17 có thể thấy việc sử dụng cơng nghệ in phun với kích thước các giọt ở kích thước picoliter, đầu phun của máy in phun sẽ phun kháng thể ra đều hơn là nhỏ giọt kháng thể bằng micropipette. Sẽ gia tăng độ chính xác cho LFA hơn là phương pháp thủ công sử dụng micropipet trong phịng thí nghiệm. Kết quả đo màu bằng phần mềm ImageJ cho khoảng nồng độ từ 1.000 – 10.000 mIU/ml được trình bày trong đồ thị hình
Hình 3. 18 Kết quả đo màu bằng phần mềm ImageJ
Có thể thấy trong khoảng 1.000 – 8.000, giá trị cường độ màu tăng đều đặn (mỗi lần tăng xấp xỉ 10 đơn vị), từ nồng độ 8.000 – 10.000 giá trị cường độ màu tăng ít hơn (xấp xỉ 5 đơn vị) bởi vì nồng độ lúc này đã khơng cịn tăng gấp 2 lần mà chỉ cịn tăng 1.25 lần. Có thể thấy rằng nồng độ tăng tuyến tính (gấp 2 lần) thì giá trị màu cũng tăng đều đặn sau mỗi mốc nồng độ. Các điểm gần như nằm trên một đường thẳng. Các điểm vẫn chưa hồn tồn nằm trên một đường thẳng như kì vọng là bởi vì thiết kế của que LFA vẫn chưa hồn thiện, thơng số của thiết bị in phun chưa thực sự tối ưu, điều kiện chụp ảnh chưa đảm bảo ổn định.
Đường chuẩn có dạng y = 0,039x + 74.271 (y = ax + b), với x là nồng độ hCG và y là cường độ màu. Những số liệu và đường chuẩn này chưa thật sự tối ưu, chúng chỉ đóng vai trị là cơ sở cho các thí nghiệm tiếp theo nhằm tối ưu hơn que thử LFA. Kết quả thí nghiệm này cịn chứng minh được rằng cường độ màu có mối quan hệ tuyến tính với nồng độ hCG trong mẫu và tính khả thi trong việc chế tạo que thử LFA nhằm định lượng hCG.