Plasmid pVFT-hab được tách chiết và thu nhận bằng phương pháp SDS-kiềm từ chủng DH5α/pVFT-hab. Sản phẩm tách được kiểm tra độ tinh sạch RNA bằng điện di trên gel agarose. Kết quả đo nồng độ và độ tinh sạch của plasmid sau khi thu nhận được xác định bằng máy đo Nanodrop được trình bày trong Bảng 3.1.
Bảng 3.1. Kết quả đo nồng độ plasmid pVFT-hab
Chỉ số Kết quả
OD260/OD280 1,91
Nồng độ (mg/ml) 1873,4
Luận văn thạc sĩ Kết quả - Biện luận
Trang 54
Bảng kết quả trên cho thấy nồng độ plasmid thu nhận được là khá cao và nằm trong giới hạn cho phép (1,8 < OD260/OD280 < 2,0). Do đó, chúng tôi sử dụng plasmid này cho phản ứng cắt.
Tiếp theo, chúng tôi xử lý plasmid được thu nhận trên với 2 enzyme cắt giới hạn là EcoRI và SalI để mở vòng plasmid, thực hiện phản ứng nối đầu dính, tạo vector tái tổ hợp. Kết quả được trình bày trên Hình 3.2.
Hình 3.2.Kết quả thu nhận pVFT-hab và plasmid pVFT-hab/EcoRI, SalI 1,Plasmid pVFT-hab; 2,Plasmid pVFT-hab/EcoRI, SalI;
3,Thang 100bp Plus
Kết quả điện di cho ba vạch DNA nằm phía trên vạch 6.000bp của thang chuẩn cho thấy chúng tôi đã tách chiết được plasmid pVFT-hab ở cấu hình tự nhiên. Ở giếng 2, có một vạch DNA nằm giữa vạch 6.000 và 8.000bp của thang chuẩn, tương ứng với kích thước lý thuyết của plasmid là 6.086bp. Sau khi được xử lý với 2 enzyme cắt giới hạn EcoRI và SalI, plasmid biến đổi thành cấu trúc mạch thẳng, di chuyển cùng với vị trí của thang tương ứng với kích thước của nó. Như vậy, chúng tôi đã thu nhận thành công plasmid pVFT-hab đã được xử lý với hai enzyme cắt giới hạn EcoRI và SalI.