thanh chuột tiêm epitope HAeB và protein dung hợp GST-H:1,2-HAeB a. Kiểm tra khả năng nhận diện virus H5N1 bất hoạt của kháng huyết
thanh chuột tiêm epitope HAeB
-Kháng nguyên dùng để phủ giếng là virus H5N1 bất hoạt được pha loãng đạt nồng độ tương đương 16 đơn vị ngưng kết hồng cầu, sau đó cố định lên đĩa ELISA mỗi thí nghiệm lặp lại 2 lần, 100µl/giếng. Hàng A cố định mẫu chứng không chỉ bổ sung đệm phủ giếng (coating buffer).
-Kháng thể sơ cấp được dùng là kháng huyết thanh thu nhận từ lô chuột thí nghiệm được tiêm epitope HAeB pha loãng bậc 2 từ 1/50 đến 1/1.600 trong serum dilution buffer. Đồng thời, chứng âm là mẫu huyết thanh được thu nhận trước khi tiêm chuột.
-Kháng thể thứ cấp được dùng là kháng thể thương mại Anti mouse IgG+IgA+IgM-HRP được pha loãng ở nồng độ 1/5.000 trong serum dilution buffer.
-Các bước tiến hành tương tự mục 2.2.10.a.
b. Kiểm tra khả năng nhận diện virus H5N1 bất hoạt của kháng huyết thanh chuột tiêm protein dung hợp GST-H:1,2-HAeB
-Kháng nguyên dùng để phủ giếng là virus H5N1 bất hoạt được pha loãng đạt được nồng độ tương đương 16 đơn vị ngưng kết hồng cầu, sau đó cố định lên đĩa ELISA mỗi thí nghiệm lặp lại 2 lần, 100µl/giếng. Hàng A cố định mẫu chứng không chỉ bổ sung đệm phủ giếng (coating buffer).
-Kháng thể sơ cấp được dùng là kháng huyết thanh thu nhận từ các lô chuột thí nghiệm được tiêm và được nhỏ mũi protein GST-H:1,2-HAeB sẽ pha loãng bậc 2
Luận văn thạc sĩ Vật liệu – phương pháp
Trang 52
từ 1/50 đến 1/1.600 trong serum dilution buffer. Đồng thời, chứng âm là mẫu huyết thanh được thu nhận trước khi tiêm chuột.
-Kháng thể thứ cấp được dùng là kháng thể thương mại Anti mouse IgG+IgA+IgM-HRP được pha loãng ở nồng độ 1/5.000 trong serum dilution buffer.
-Các bước tiến hành tương tự mục 2.2.10.a.