- Chống đông: bằng Heparin liên tục bằng đường toàn thân Liều khởi đầu
2.2.3.3. Định lượng creatinin
- Phương pháp: Creatinin được định lượng theo phương pháp Jaffe trên hệ thống máy xét nghiệm sinh hóa Bayer ADVIA 1650.
- Nguyên lý: Creatinin trong dung dịch Picrat kiềm tạo phức hợp màu đỏ da cam.
Đậm độ màu của chất này tỉ lệ thuận với nồng độ Creatinin trong bệnh phẩm, và được đọc bởi quang phổ kế với bước sóng 492 nm.
Phương trình phản ứng:
Creatinin + Axit Picric Phức hợp Creatinin Picrat ΔE Bệnh phẩm
Creatinin = x Nồng độ creatinin chuẩn mmol/L ΔE Chuẩn
Hòa loãng: có thể hòa loãng bệnh phẩm với một thể tích tương đương nước muối sinh lý NaCl 0,9%, khi tính kết quả phải nhân với hệ số hòa loãng (x2)
Tiến hành: cho vào 3 ống nghiệm các chất theo bảng sau:
Bảng 2.7. Pha hóa chất để định lượng Creatinin
Thuốc thử (ml) Ống 1 huyết thanh Ống 2 trắng Ống 3 mẫu
Creatinin 1mg% - - 0,5
Huyết thanh 0,5 - -
DD Acit Picric bảo hòa 3 1,5 1,5
Nước cất 0,5 0,5 -
Khuấy đều, sau 5 phút đặt ống nghiệm trong nồi cách thủy sôi 10 – 20 giây, sau đó quay ly tâm ống 1, còn ống 2 và ống 3 giữ nguyên.
Lấy dịch ly tâm từ ống 1 cho vào ống 2, ống 3 và một ống nghiệm 4.
Bảng 2.8. Pha dịch ly tâm để định lượng Creatinin
Ống 4 Ống 2 Ống 3
Dịch ly tâm 2ml 2ml 2ml
NaOH 0,1ml 0,1ml 0,1ml
Sau 20 phút, so màu ở bước sóng 530 nm, ống 4 và 3 so với ống trắng. Tính kết quả:
Creatinin huyết thanh (mg%) =
EMEr Er
x 1(mg%) x 2
Giá trị bình thường của creatinin 0,6 – 1,4mg/dL (mg x 8,85 = mol). Tính ĐLCT theo Công thức Cockcroft – Gault:
HSTT cre = (140 - tuổi ) x cân nặng (kg) (với nữ x 0,85) 0,814 x P cre (mol/L )