TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.2. TÍNH CHỊU HẠN CỦA THỰC VẬT, TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỪNG VÀ TÍNH CHỊU HẠN CỦA CÂY VỪNG
1.3.2. Tỡnh hỡnh nghiờn cứu sự ủa dạng di truyền của cõy vừng
Mặc dự là cõy lấy hạt cú dầu ủược con người biết ủến ủầu tiờn và cú lịch sử phỏt triển lõu dài nhưng vừng vẫn là cõy ớt ủược chỳ ý. Trờn thế giới vẫn chưa có một trung tâm nông nghiệp nào chuyên nghiên cứu về vừng [56].
Hầu hết cỏc vựng trồng vừng trờn thế giới ủều tập trung ở cỏc nước ủang phỏt triển. Chính vì lý do này mà việc sử dụng các kỹ thuật sinh học phân tử vào việc nghiên cứu, cải tiến các giống vừng bị hạn chế. Chỉ mới có một vài công bố về việc sử dụng chỉ thị phân tử như isozym, ISSR, RAPD, AFLP, SSR…
[71], [85], [123], [134], [214]. Trong những nghiờn cứu ủú, chỳng tụi mới gặp chỉ cú 1 nghiờn cứu tập trung vào phõn tớch ủể cải thiện ủặc ủiểm nụng học chín không tách vỏ của vừng [214].
ða dạng di truyền của những loài cõy trồng cú thể ủược xỏc ủịnh bằng nhiều phương phỏp khỏc nhau, thụng qua ủặc ủiểm hỡnh thỏi, cỏc ủặc ủiểm nông sinh học, sử dụng chỉ thị isozym hay chỉ thị ADN [123], [138], [165], [179], [181] [213]. đã có 2 nghiên cứu sử dụng ựặc ựiểm hình thái ựể phân loại kiểu gen của vừng Ấn ðộ thành các nhóm phân loại khác nhau [103], [171]. Tuy nhiờn, phương phỏp dựa trờn cỏc ủặc ủiểm hỡnh thỏi và ủặc ủiểm nụng sinh học ủể ủỏnh giỏ ủa dạng di truyền lại phụ thuộc nhiều vào nhõn tố mụi trường. Vỡ thế, cỏc ủiều kiện trong suốt thời gian gieo trồng sẽ ảnh hưởng khụng nhỏ ủến kết quả ủỏnh giỏ [97]. Phương phỏp dựng chỉ thị ADN khắc phục ủược hạn chế này vỡ nú khụng chịu ảnh hưởng bởi ủiều kiện mụi trường [208]. Cho ủến nay, thụng tin về trỡnh tự ADN của vừng cũn hạn chế, nờn việc sử dụng phản ứng PCR dựa trên chỉ thị phân tử như RAPD và AFLP là phương phỏp phổ biến ủể xỏc ủịnh ủa hỡnh của vừng [71], [105], [141], [142], [187], [208], [214].
Trờn thế giới, việc ỏp dụng cỏc kỹ thuật nghiờn cứu ủa dạng di truyền cú phần ủa dạng hơn.
Bhat và cs (1999) ủó sử dụng kỹ thuật RAPD ủể xỏc ủịnh mối quan hệ di truyền giữa 58 giống vừng Ấn ðộ [73]. Parani cs (1997) ủó nhận thấy chỉ thị RAPD cú mức ủộ ổn ủịnh cao và cú thể tiến hành dưới những ủiều kiện thớ nghiệm ủược kiểm soỏt [169]. Những nghiờn cứu này ủó chỉ ra rằng, chỉ thị RAPD cú thể sử dụng thành cụng trong việc xỏc ủịnh ủa dạng di truyền [92].
Bằng cỏch sử dụng kỹ thuật RAPD với 12 mồi ngẫu nhiờn, Ercan cs (2004) ủó ủỏnh giỏ tớnh ủa hỡnh và quan hệ di truyền của 38 giống vừng ở 4 vựng sinh thỏi Thổ Nhĩ Kỳ. Mức ủộ ủa hỡnh cao của cỏc giống vừng trong nghiờn cứu ủó chỉ ra rằng kỹ thuật RAPD rất có hiệu quả trong việc lựa chọn nguồn gốc các giống vừng, ứng dụng trong chọn giống [92].
Kỹ thuật RAPD cũng ủó ủược sử dụng ủể xỏc ủịnh mức ủộ tương ủồng di truyền của 10 giống vừng ở Sudan. Với 25 mồi RAPD ủó xuất hiện 65 băng ủa hỡnh và 10 giống vừng này ủược chia làm 2 nhúm chớnh [50].
Ở Việt Nam, nghiờn cứu ủa dạng di truyền ở cõy vừng cũn rất nhiều hạn chế. Toan Duc Pham và cs ủó sử dụng 23 mồi cựng kỹ thuật phõn tớch RAPD ủó cho thấy mức ủộ sai khỏc về mặt di truyền khỏ cao giữa 20 giống vừng thu thập từ Việt nam và Campuchia. Sự ủa dạng di truyền này cho thấy kỹ thuật RAPD cú thể ủược sử dụng ủể phỏt hiện nguồn gốc, quan hệ họ hàng giữa các loại cây trồng nói chung và các giống vừng nói riêng [208].
AFLP là phương phỏp rất cú hiệu quả trong xỏc ủịnh quan hệ di truyền và lập bản ủồ di truyền phõn tử. Chỉ thị AFLP ủó ủược sử dụng rất thành cụng trong nghiờn cứu ủa dạng di truyền của cỏc loại cõy trồng như: lạc [112], ủậu tương [210]. Nhưng mới cú rất ớt cụng trỡnh ủó sử dụng kỹ thuật phõn tử AFLP trong việc xỏc ủịnh quan hệ di truyền ở cõy vừng.
Ghulam và cs (2007) sử dụng kỹ thuật AFLP, với 21 mồi ngẫu nhiờn ủể phõn tớch ủa dạng di truyền, mối quan hệ giữa nguồn gốc ủịa lý và ủặc ủiểm sinh thỏi của 96 giống vừng thu thập ở cỏc vựng khỏc nhau trờn thế giới. Kết quả ủó phân loại các giống vừng làm 2 nhóm lớn: nhóm 1, gồm các giống vừng chủ yếu ở phắa đông Châu Á, nhóm 2 gồm các giống ở phắa Nam Châu Á [105].
Trong nghiờn cứu của Laurentin và cs (2007), tớnh ủa hỡnh và quan hệ di truyền của 20 giống vừng Venezuela cũng ủó ủược xỏc ủịnh bằng kỹ thuật AFLP. Tỏm mồi sử dụng trong nghiờn cứu ủó cho tỷ lệ băng ủa hỡnh cao (91%). Kết quả cũng chứng minh AFLP là cụng cụ hữu ớch ủể tỡm ra quan hệ di truyền giữa các giống vừng nói riêng và các giống cây trồng nói chung, có tính ứng dụng cao trong chọn giống thực vật [141].
CHƯƠNG 2
ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP